5天和分化1天NSCs中片状伪足出现在5ng/ml的SDF-1α刺激15min左右，而分化3天的NSCs细胞边缘在同样刺激下未出现类似伪足结构。 4.不同分化状态的NSCs中，PI3K/Akt和MAPKs信号通路对SDF-1α的应答水平不同。在5ng/ml的SDF-1α刺激不同时间段（0、5、15、30、60min）或不同浓度SDF-1α（0、5、25、50、100ng/ml）处理30min后，在不同分化状态NSCs中PI3K/Akt和MAPKs信号通路的激活状态所对应的SDF-1α浓度、SDF-1α刺激时间段以及活性持续时间均不相同。 5. PI3K/Akt和MAPKs对不同分化状态的NSCs趋化性迁移发挥的调节作用各不相同。已证明细胞的群体趋化性迁移、迁移速度和迁移效率都与细胞所处的分化状态密切相关的，与迁移相关的信号通路在不同分化阶段的细胞中发挥不同程度的调节作用，说明细胞的分化状态可以改变信号通路在细胞中的激活水平，进而改变细胞内部调控细胞迁移行为的分子机制，最终引起细胞趋化性迁移行为的改变，在分子水平上对细胞分化状态影响迁移能力做了初步解释。

本研究为提高NSCs移植临床治疗手段成功率提供新思路，首次将干细胞分化状态对迁移的影响纳入研究范围，为寻找更稳定高效的治疗途径提供广阔的视野。
目的：观察黄连碱(Coptisine)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性细胞因子NO、TNF-a和IL-1B的作用以及对p-ERK1/2、IκBα和iNOS蛋白表达的影响,探讨黄连碱体外抗炎作用及其机制。 方法：用LPS诱导RAW264.7巨噬细胞,建立细胞炎症反应模型： (1)选择一氧化氮(NO)为指标,筛选黄连中五个主要成分的抗炎活性； JQ1 (2) Am-Blue细胞增殖与活性检测试剂(SunBioTM)检测黄连碱对RAW264.7巨噬细胞增殖的影响； (3) Griess法检测细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量； (4) ELISA法检测细胞培养上清液肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白介素-1B(IL-1B)含量； (5) Western Blot技术检测RAW264.7巨噬细胞p-ERK1/2、IκBα和iNOS蛋白的表达。 结果：(1)黄连五个主要成分中小檗碱、黄连碱和巴马汀都能明显抑制LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞NO的释放(p0.05)；

(3)黄连碱10μM组、30μM组NO释放量均明显低于LPS组(p0.05),BAY11-7082组NO释放量明显低于LPS组(p<0.05),其释放量随着剂量的增加而减少,BAY11-7082组TNF-a和IL-1B释放量明显低于LPS组(p0.05)；PD98059组p-ERK1/2蛋白表达明显低于LPS组(p0.05)；空白对照组RAW264.7巨噬细胞IκBα蛋白表达最高；LPS组IκBα蛋白表达最低,与空白对照组比较有显著性差异(p<0.05),其表达量随着剂量的增加而减少；BAY11-7082组iNOS蛋白表达明显低于LPS组(p
目的：本课题通过LPS诱导的RAW264.7细胞,建立体外炎症细胞模型,观察芦荟大黄素对LPS诱导RAW264.7的细胞释放NO、TNF-a和IL-1β的影响,以及芦荟大黄素对ERK、iNOS蛋白表达和NF-κB信号通路下游基因表达的影响,探讨芦荟大黄素抗内毒素作用及其机制。 寻找更多 方法：采用MTT法,制备RAW264.7细胞生长曲线；采用Griess法,检测芦荟大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO量；采用ELISA,检测芦荟大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞释放的TNF-a和IL-1β量；采用Western blot法,研究芦荟大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞ERK、iNOS蛋白表达和磷酸化水平的影响；采用瞬时转染技术,研究芦荟大黄素对LPS诱导RAW264.7NF-K B信号通路下游基因表达的影响。 结果：1.40μM、20μM、15μM、1OμM、5μM、0.1μM的芦荟大黄素对RAW264.7细胞增殖没有显著的影响。 2.阳性药10μM NF-κB抑制剂BAY-11-7082以及20μM芦荟大黄素、20μM大黄酸、40μM大黄素对LPS诱导的RAW264.7细胞释放NO的抑制作用明显,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。 4.在1μg/ml的LPS刺激下,RAW264.7细胞中iNOS蛋白表达、ERK蛋白磷酸化水平水平显著提高。而在芦荟大黄素存在的情况下,LPS刺激后的iNOS蛋白表达、ERK磷酸化水平显著降低。本实验结果说明芦荟大黄素能够抑制由LPS引起的细胞内iNOS蛋白表达、ERK磷酸化水平。 5.TNF-a能刺激HELA细胞表达更多的NF-κB,模型组与空白组有显著性差异(P<0.01),阳性药BAYll-7082能显著抑制TNF-a刺激的HELA细胞活化本课题来源于国家自然科学基金：项目编号：81073118NF-κB,并且与模型组比较差异有统计学意义(P
目的：研究布比卡因对福尔马林炎性疼痛模型中脊髓胶质细胞及炎性因子的影响。

方法：成年雄性SD大鼠，体重200-220克，取大鼠72只，随机分为4组,假手术组：右足底掌部皮下注射0.1mL生理盐水；炎性痛组：右足底掌部皮下注射2.5%福尔马林试剂0.1mL，建立福尔马林炎性痛模型；布比卡因组：经蛛网膜下腔注射0.125%布比卡因40μL后同炎性痛组建立炎性疼痛模型；生理盐水组：经蛛网膜下腔注射40μL生理盐水后同炎性痛组建立炎性疼痛模型。于建立右足底掌部炎性疼痛模型的术前、术后1d、术后3d和术后5d分别观察机械缩足反射阈值（MWT）及累积疼痛评分，并于术后行为学实验结束后取L4-6脊髓进行Western blot方法测定脊髓小胶质细胞标记物（OX42）和星形胶质细胞标记物（GFAP）的蛋白表达水平及测定IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平。 Selleckchem BIBF-1120 结果：术后1d，与炎性痛组和生理盐水组相比，假手术组及布比卡因组大鼠MWT增高；累积疼痛评分下降（P＜0.05）；与假手术组相比，炎性痛组和生理盐水组大鼠脊髓OX42和GFAP的表达增加（P＜0.05）；与炎性痛组和生理盐水组相比，布比卡因组大鼠脊髓OX42和GFAP的表达降低（P＜0.05）。与假手术组相比，炎性痛组和生理盐水组大鼠脊髓IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA表达上调；与炎性痛组和生理盐水组相比，布比卡因组大鼠脊髓IL-1β、TNF-αmRNA表达下调（P＜0.05），而IL-6表达水平在两组间的差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论：在炎性疼痛模型中，布比卡因可抑制脊髓胶质细胞OX42和GFAP的表达及炎性因子IL-1β、TNF-α释放。
目的 体外条件下从大鼠骨髓中分离出单个核细胞,使用特定的培养基使其向内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)分化生长,以Ad-GFP缺陷性腺病毒为载体将HGF基因转染原代培养的大鼠血管内皮祖细胞,之后注入缺血后肢裸鼠体内,观察其体内血管生成能力。 方法 1.