5%乙醇溶液。在实验期间每天定时观察各组小鼠进食、饮水、毛色、活动及大便性状，称量体重，观察大便隐血情况，并进行疾病活动指数评分（DAI），至造模第8天全部小鼠均处死，收集小鼠结肠组织，一部分用于石蜡包埋切片，HE染色，并观察组织病理学损伤情况,行组织学评分；另取两份组织保存于液氮中备用。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测结肠黏膜组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、髓过氧化物酶(MPO)的表达；应用免疫组织化学染色观察结肠组织p-p38MAPK的表达情况及逆转录转氨酶链聚合反应（RT-PCR）方法检测结肠组织内p38MAPKmRNA的表达。结果：1.B组小鼠症状、组织学检查均符合UC诊断标准，且DAI及组织学评明显高于A组，经过地塞米松和姜黄素干预后，C组、D组、E组和F组DAI及组织学评分有不同程度的降低。2.ELISA结果：

Ibrutinib购买 B组结肠黏膜中TNF-α、 MPO的含量分别为（382.26±21.82、339.31±13.61）明显高于C组（257.42±19.04、238.95±11.17）、D组（333.67±17.72、298.93±9.94）、E组（287.89±19.57、258.60±13.07）和F组（271.10±13.25、248.52±9.24），有统计学差异（P均＜0.01），C组的含量显著低于D组、E组的含量，有统计学差异（P＜0.05），C组同F组相比差异无统计学意义（P＞0.05）；E组、F组较D组含量低，差异有统计学意义（P＜0.05），F组较E组降低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。3.免疫组织化学法结果：B组小鼠结肠黏膜p-p38MAPK表达（6.80±0.77）明显高于A组（0.52±0.32），差异有统计学意义(P＜0.01)，经地塞米松及姜黄素低、中、高剂量干预后,C组(2.50±0.82)、D组（4.36±1.02）、E组（3.62±0.79）、F组（3.12±0.63）均较B组有显著降低，有统计学差异（P＜0.01），C组表达明显低于D组、E组，差异有统计学意义（P＜0.05），D组较E组、F组升高（P值均＜0.05），E组与F组差异无统计学意义（P＞0.05）。4.RT-PCR结果：B组结肠组织内p38MAPK mRNA明显高于A组，C组、D组、E组和F组均较B组有不同程度的降低，其中以F组表达最低。结论：姜黄素对DSS诱导的小鼠急性期UC有一定治疗作用，可能是通过抑p38MAPK信号通路，减少TNF-α等促炎因子的释放，减轻中性粒细胞的浸润，从而减轻UC小鼠肠粘膜炎症损伤而发挥治疗UC作用。
目的：我们的前期实验证实ANP32A在心肌细胞中有表达。敲减ANP32A在心肌细胞中的表达可抑制多柔比星诱导的心肌细胞凋亡。MAPKs在多柔比星诱导的心肌细胞凋亡中起重要作用。我们假设：敲减ANP32A经MAPKs通路抑制多柔比星诱导的凋亡。

没有 方法：原代心肌细胞培养并运用肌钙蛋白I（cTnI）对其进行鉴定。实验分组：正常心肌细胞组（CMs组）、多柔比星（DOX）组、空载病毒（NC-LV）组、空载病毒+多柔比星（NC-LV+DOX）组、目的基因病毒（Anp）组、目的基因+多柔比星（Anp+DOX）组。将构建的lentivirus-scrRNAi和lentivirus-ANP32A/GV115-RNAi载体分别转染入NC-LV组、NC-LV+DOX组和Anp组、Anp+DOX组。转染72h后应用免疫荧光法检测其转染心肌细胞的效率，并于DOX组、NC-LV+DOX组和Anp+DOX组加入多柔比星（1μmol/L）作用12h建立心肌细胞凋亡模型，应用AnnexinV-FITC法检测6组心肌细胞凋亡率，以心肌细胞凋亡率作为心肌细胞凋亡的观察指标，观察敲减ANP32A对多柔比星诱导的心肌细胞凋亡的影响。运用Westernblot法检测CMs组、DOX组、Anp组和Anp+DOX组的ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、P38MAPKs、p-P38MAPKs蛋白表达水平。数据运用SPSS13.0统计软件包进行多组间单因素方差分析和组间t检验。

selleck screening library 结果：体外原代培养的心肌细胞，呈多边形、梭形等，部分细胞聚集成细胞簇，呈放射状排列的同心圆状，搏动呈同步性，搏动频率多为60-100次/分。对细胞进行cTnI鉴定显示95%以上细胞呈阳性表达，符合心肌细胞特征。转染NC-LV和ANP32A敲减重组慢病毒心肌细胞72h后，荧光显微镜观察分别发现90%和80%以上的心肌细胞表达绿色荧光蛋白。分析AnnexinV-FITC法测定DOX组和CMs组心肌细胞凋亡率[（31.94±1.24）%vs（3.62±0.53）%,（p0.05）]、[（33.14±1.57）%vs（31.94±1.24）%,（p>0.05）]，提示慢病毒对心肌细胞的毒性不影响结果分析；分析Anp+DOX组与DOX组凋亡率[（16.62±2.07）%vs（31.94±1.24）%,（p0.05），说明多柔比星未引起ERK1/2活性的变化；DOX组与CMs组p-JNK/JNK比值高了1.5倍，差异有统计学意义（p
目的： 1.观察TNF-α对RAFLS的Ras-p38MAPK信号通路活化水平的影响。 2.观察不同浓度的ATO对TNF-α诱导的Ras-p38MAPK信号通路活化水平的影响。 方法： 1.从RA患者的膝关节腔积液中获取标本进行原代培养RA FLS细胞。培养至第3代即获得纯化的RA FLS细胞。 2.使用10μg/L的TNF-α与第3代RA FLS共孵育30min，运用Western-blot检测其与空白对照组的Ras、p-p38的表达水平。 3.将三种不同浓度的ATO（0.5μmol/L、5μmol/L、25μmol/L）与RAFLS细胞共孵育24h，然后终止反应，将10μg/L TNF-α与之共孵育30min，终止反应进行Western blot检测每个组的Ras、p-p38的表达水平。 结果： 1.原代培养有较多的巨噬细胞，随着传代的进行，其逐渐被去除。到第三代培养的细胞基本上都是RA FLS细胞。 2.TNF-α刺激后的RAFLS，通过Western blot检测表明Ras, p-p38表达水平明显升高。（p
目的： 研究天麻素对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用及其相关机制。 方法： 采用谷氨酸建立PC12细胞损伤模型，MTT比色法测定细胞活力并确立谷氨酸最佳造模浓度。采用倒置显微镜观察细胞形态变化；MTT法检测细胞活力；AO/EB双染法和Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡形态；流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的变化以及Annexin V/PI染色后细胞凋亡率；罗丹明123染色法检测线粒体跨膜电位；Western blotting法分析p-p38，p-ERK1/2及caspase-3蛋白的表达。 结果： 1.