、动物实验动物分为对照组、模型组及治疗组,每组10只。采用皮下注射野百合碱建立肺动脉高压模型。正常对照组注射同等剂量生理盐水,L-精氨酸治疗组在野百合碱皮下注射后第2天开始给药,按100mg/kg剂量每日腹腔注射。每周监测尾动脉压,四周后颈外静脉插管检测肺动脉压力及右心室功能,并检测肺动脉舒张功能。高效液相色谱法检测血浆ADMA浓度；硝酸还原酶法测定血浆中NO浓度；RT-PCR法检测肺组织DDAH2mRNA的表达；免疫组化法检测肺动脉DDAH2蛋白的表达。 结果1、肺心病患者血浆ADMA浓度显著高于正常对照组(0.41±0.09vs 0.22±0.07μM,P<0.05);右心室肥厚明显(右心室／左心室+室间隔质量比(41.7%±6.6%vs26.3%±4.8%,P<0.05),血浆NO含量显著降低(23.4±3.5vs31.2±2.1)。L-精氨酸治疗后血浆ADMA浓度降低(0.28±0.08vs0.41±1.0μM,P<0.05)；血浆NO水平升高(29.1±3.1vs23.4±3.5μM,P
神经节苷脂(Gangliosides)是一类含唾液酸的鞘糖脂，存在于细胞膜的外表面。在胚胎形成、细胞分化、细胞增殖、转化和细胞转移等生理现象中发挥着重要作用。本文阐述了神经节苷脂GD1a的一种新的功能即诱导FBJ病毒感染的小鼠骨肉瘤细胞产生凋亡。在无血清培养条件下，富含GD1a的FBJ-S1细胞趋向死亡，而缺乏GD1a的FBJ-LL细胞却却未见明显影响。通过流式细胞仪对细胞进行膜联蛋白V异硫氰酸荧光素(FITC-AnnexinV)和碘化丙啶(PI)双染检测和细胞周期分析发现FBJ-S1细胞在无血清条件下趋向死亡是因凋亡而引起的。因此，我们推测GD1a可诱导FBJ细胞凋亡。为了验证这一推论，外源性GD1a在无血清培养条件下处理FBJ-LL细胞，发现FBJ-LL细胞出现死亡。FBJ-S1细胞通过加入葡萄糖苷神经酰胺合成酶抑制剂(D-PDMP)处理和转染入唾液酸转移酶(st3ga15)的siRNA的来抑制GD1a的合成，发现在无血清条件下经D-PDMP处理后FBJ-S1细胞抵抗死亡，且转染siRNA到FBJ-S1细胞后得到的单克隆细胞也同样抵抗死亡。另外，很多文章报道神经酰胺和神经节苷脂GD3可诱导凋亡，但在发生凋亡的FBJ细胞中神经酰胺的表达含量并没有变化，而GD3并未见在FBJ细胞中表达，这说明神经酰胺和GD3不是引起FBJ细胞凋亡的因素。

selleck公司 GW786034分子重量 窖蛋白1(caveolin-1，亦译为小窝蛋白1)是一种肿瘤抑制蛋白。本文研究发现，窖蛋白1参与了GD1a诱导的FBJ细胞凋亡并起着关键作用。FBJ-S1细胞在无血清条件下趋向死亡，而FBJ-LL细胞并未出现此现象，逆转录PCR法检测发现FBJ-S1细胞中窖蛋白1的表达量是FBJ-LL细胞的5倍。FBJ-LL细胞在外源性GD1a处理后促进其趋向死亡，免疫印迹法(Western blot)发现窖蛋白1的表达量也明显增加。另外，利用siRNA技术沉降FBJ-S1细胞中窖蛋白1的表达量，无血清培养条件下，结果使其存活。数据表明窖蛋白1可促进FBJ细胞的凋亡。存活蛋白(survivin，亦译为生存蛋白或生存素)是一种凋亡抑制蛋白，研究发现窖蛋白1可以调节存活蛋白，且存活蛋白也参与了GD1a诱导的FBJ细胞凋亡。生长因子。因此我们随机检测了FBJ-LL和FBJ-S1细胞中一些生长因子的mRNA水平表达，发现FBJ-LL细胞中生长因子如PDGFα，TNFα和VEGFβ的表达量是FBJ-S1细胞中的数倍，且FBJ-S1细胞在无血清培养基中加入PDGFα或TNFα培养后使其存活。数据表明内源性GDla可调节生长因子的表达同时也可诱导凋亡。另外，通过信号传导抑制剂和细胞内吞抑制剂来研究GDla诱导FBJ细胞凋亡的机制，发现p38MAPK途径和细胞内吞途径对GDla诱导的细胞凋亡发挥着重要作用。
目的建立小鼠内毒素(即脂多糖,LPS)急性肺损伤(ALI)模型,动态观察槐定碱对小鼠内毒素性肺损伤模型的治疗作用,研究槐定碱对LPS信号转导途径中的识别受体-LBP、CD14、TLR4、胞内p38MAPK信号分子、核转录因子AP-1及主要炎症介质TNF-α、NO四个层次的影响,以探讨其抗内毒素的药理机制。 方法BALB/c小鼠随机分为6组,即正常对照组、内毒素肺损伤模型组、槐定碱治疗组[槐定碱高(12mg/kg)、中(6mg/kg)、低(3mg/kg)三个剂量]、槐定碱药物对照组(12mg/kg)。每组小鼠再分为2h、6h、12h、24h四个时相。以尾静脉注射内毒素7mg/kg制备急性肺损伤小鼠模型。各组小鼠分别在给予LPS或槐定碱后相应时间点,即2h、6h、12h、24h时记录一般状况并取材,肉眼及光镜观察肺组织的病理变化;以肺湿/干重(W/D)比值检测肺水含量;硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(NO)含量;放射免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织中LBP、CD14、TLR4、c-jun、c-fos及TNF-α的mRNA表达水平;免疫组化SP法与免疫印迹法(Western-blot)检测肺组织中总p38MAPK、磷酸化p38

因为 MAPK、TLR4蛋白的表达水平。 结果(1)内毒素肺损伤模型组小鼠在给予LPS后30分钟即有症状出现,至24h未见缓解;肉眼与光镜观察肺脏病理改变,发现6h起肺脏病理改变明显可见并逐渐加重,延至24h亦未见减轻;模型鼠肺组织W/D值显著升高;血清TNF-α和NO值均在给予LPS后2h即显著升高,并分别在6h和12h达到高峰,直至24h仍明显高于正常对照组(P <0.01)。模型组肺组织LBPmRNA、CD14mRNA与TLR4mRNA表达均在2h开始上调,于6h达高峰,至24h仍维持高水平。TLR4蛋白表达趋势与TLR4mRNA大致相似。免疫组化检测模型组各时相点的p38阳性细胞主要分布在气道黏膜上皮细胞、浸润的炎细胞和血管内皮细胞的胞浆中;磷酸化p38在上述细胞的胞浆与胞核中均呈强阳性表达,阳性细胞数和阳性信号均较正常对照组明显增多和增强,各时相点记分值均显著高于同时相点正常对照组(P<0.01或P<0.

0统计软件包进行分析,实验结果以均数±标准差(X±SD)表示。经正态和方差齐性检验后,组间及组内均数的比较采用重复测量设计方差分析及单因素方差分析(One-Way ANOVA);两两比较采用LSD分析,以P0.05)。免疫组化及ELISA结果显示均D组脑啡呔表达较B组和C组升高,B组和C组比较无统计学差异。术后14天在大鼠脊髓组织中仍可检测BrdU标记的hMSC细胞。免疫荧光检测鞘内注入hMSC细胞的C组和D组星形胶质细胞及神经元表达上调,部分细胞可分化为神经元及星形胶质细胞。 2静脉给药组,与术前比较,B组、C组、D组术后各时点热痛阈降低(P<0.05)。与A组比较,B组、C组、D组热痛阈降低。与B组和C组比较,D组热痛阈升高(P
研究背景：先天性免疫是免疫系统的重要组成部分,是第一道防线,是人体对抗微生物入侵的屏障。固有免疫通过识别病原微生物的某些共同的特征性结构与受体结合从而激活发挥作用。这些被固有免疫系统识别的靶位称为分子模式,与分子模式结合的受体称为模式识别受体,模式识别受体主要表达与固有免疫细胞表面。模式识别受体由胚系基因编码,由于胚系基因编码的受体有限,所以固有免疫只区别不同类别的微生物,且固有免疫仅识别某一类微生物的共同结构,如病毒的双链RNA、细菌的未甲基化CpG

和 DNA序列、以甲酰甲硫氨酸肽起始的细菌蛋白质、革兰氏阴性菌的LPS、革兰氏阳性菌的磷壁酸、富含甘露糖的微生物低聚糖等,这些分子模式是病原体生命活动所必须的结构成分,不同类型的微生物表达不同的分子模式,被不同的模式识别受体识别,进而激活细胞反应应对外来微生物的入侵。女性生殖系统由于是一个与外界相同的系统,并受体内性激素水平的变化而有所反应,其正常情况下子宫内膜的周期性出血以及阴道与外界相通,都有接触外界致病微生物的机会,因而女性生殖系统的免疫功能的稳定对维持女性生殖系统的健康相当重要。本研究主要是探索先天性免疫系统的一个重要的受体家族Toll样受体的三个亚型TLR-2、TLR-3、TLR-4在人类子宫内膜和妊娠期内膜即蜕膜中的表达情况,来探讨其可能发挥的作用以及与其他相关因素如性激素的潜在联系。

目的：1、观察人类子宫内膜各个时期的生理变化。2、研究妊娠时期子宫内膜的生理学改变。3、研究生殖系统局部免疫的功能的变化。 方法：收集不孕症患者月经周期不同时期内的子宫内膜组织(增生期和分泌期)以及早期妊娠期蜕膜组织,进行石蜡包埋处理。其中增生期内膜18例,分泌期内膜20例。另收集孕早期正常蜕膜组织石蜡包埋30例。应用免疫组织化学方法来观察TLR-2、TLR-3、TLR-4三个免疫受体在局部子宫内膜的表达水平和表达位置。 selleck好不好 结果：本试验所研究的三个受体亚型TLR-2、TLR-3、TLR-4在人类子宫内膜的增生期、分泌期和蜕膜组织均检测到阳性表达。三个分子表达水平均为增生期内膜较低,分泌期内膜稍高,蜕膜最高。 结论：TLR-2、3、4亚型在子宫内膜增生期、分泌期和蜕膜表达水平的逐步上调,提示子宫内膜局部由TLR介导的先天性免疫功能的增强,有利于内膜局部的抗感染侵袭,维护妊娠的正常进行。
目的 菊苣别名蓝菊,来源于菊科菊苣属中的多年生草本植物毛菊苣(Cichorium glandulosum Boiss. et Huet.)口菊苣(Cichorium

intybus L.)。地上部分、根和种子入药。在欧洲、亚洲等有广泛分布。在欧洲菊苣作为蔬菜和咖啡代用品食用,也有民间将其作为保肝药使用。在印度将菊苣种子作为通经药使用。在我国主要是内蒙和新疆等少数民族地区作为保肝、健胃药用。 现代研究表明,菊苣中含有三萜、倍半萜、香豆素、糖类等多种成分。具有保肝、降脂、促进消化等多种作用。为了更加明确其保肝作用的活性部位,本文对菊苣的化学成分和保护肝损伤活性进行了研究。 AZD6738临床实验 肝脏氧化损伤是动物和人体所面临的一个非常常见和严重的损伤,可引起动物和人体的衰老和其他疾病的发生,加重机体的衰老和病变。目前,市场上有许多抗肝脏氧化损伤的物质,但是大多数都有不易提取获得、纯度不高、有效成分不明确、价格高等缺点,给应用带来了很大的困难。开发一种来源广纯度高、成分明确、效果好、安全无毒无害的抗肝脏氧化损伤的物质非常的迫切且具有重大的意义。 方法 1.模型建立：采用CC14诱发大鼠肝纤维化模型,应用菊苣全草对CC14诱发的肝纤维化大鼠进行药物干预,运用生化、病理等手段,来观察菊苣全草对肝脏的保护作用。 2.实验动物分组及给药：将复制CCl4肝纤维化模型而存活的大鼠60只,按体重随机分为5组,分别为模型组、复方鳖甲软肝片阳性对照组、菊苣低剂量组、菊苣中剂量组、菊苣高剂量组。各组均从第五周开始继续腹腔注射1mL/kg40% CC14-植物油溶液,每周2次。除模型组外,其余各组腹腔注射的同时灌胃给药,每日1次,共4周。剂量分别为：溶剂对照组灌胃10mL/kg生理盐水、阳性对照组复方鳖甲软肝片750 mg/kg、菊苣低剂量组2.

目的探讨c-Met在结直肠癌细胞株中的表达以及其配体肝细胞生长因子(HGF)对结肠癌SW480细胞系增殖、侵袭能力的影响。方法应用RT-PCR及Western blot技术检测HGF受体c-Met在不同结直肠癌细胞中的表达,筛选出c-Met高表达细胞系;用不同浓度(0、20、40、70 ng/m L)的HGF作用SW480细胞48 h,分别用MTT法、Transwell法检测其对SW480细胞增殖、侵袭能力的影响。结果 1 RT-PCR及Western blot检测结果均表明,c-Met在不同结直肠癌细胞系中均有表达,其中体外培养的结肠癌细胞系SW480中存在c-Met和蛋白高表达。2 MTT实验结果显示,HGF可增强SW480细胞的增殖能力,且在一定范围内随浓度增高作用增强,呈剂量依赖性关系。3

Transwell实验结果显示,HGF处理后的SW480细胞侵袭能力增强。结论 c-Met在结肠癌SW480细胞中存在高表达,HGF可促进结直肠癌细胞的增殖及增加其体外侵袭能力。
Chemotherapy has become the global standard treatment for patients with metastatic or unresectable gastric cancer(GC),although outcomes remain unfavorable.Many molecular-targeted therapies inhibiting selleck chemicals signaling pathways of various tyrosine kinase receptors have been developed,and monoclonal antibodies targeting human epidermal growth factor receptor 2 or vascular endothelial growth factor receptor 2 have become

standard therapy for GC.Hepatocyte growth factor and its receptor,c-MET(MET),play key roles in tumor growth through activated signaling pathways from receptor in GC cells.Genomic MS-275购买 amplification of MET leads to the aberrant activation found in GC tumors and is related to survival in patients with GC.This review discusses the clinical significance of MET in GC and examines MET as a potential therapeutic target in patients with GC.Preclinical studies in animal models have shown that MET antibodies or smallmolecule MET inhibitors suppress tumor-cell proliferation and tumor progression in MET-amplified GC cells.These drugs are now being evaluated in clinical

trials as treatments for metastatic or unresectable GC.
摘要目的通过一个动物模型确定在射频消融后对凝固性坏死局部区域的先天性免疫及肝脏反应的动力学表现,以及这种反应的细胞因子谱和它对整个器官的局部和整体影响。材料与方法本研究经动物管理委员会批准,采用标准的射频消融治疗剂量(70℃,5 min)消融91只C57BL6型小鼠超过7%的肝脏。在消融后24 h、72 h、7 d及14 d后(细胞
RON(recepteur d’origine nantais)属于受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)原癌基因家族中c-Met亚家族的一员,其配体是巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulating protein,MSP)。受体酪氨酸激酶RON过度表达、变异体的产生以及点突变,将激活RON信号通路,从而促进癌细胞增殖、侵袭,有利于血管生长以及提高细胞耐药性。大量研究表明,RON及其变异体与人体某些上皮源性肿瘤的发生和发展有密切关系。全文重点综述RON在恶性肿瘤发生发展中的作用机制以及在上皮源性肿瘤靶向治疗中的潜在可能性。
原发性肝癌是指发生于肝细胞与肝内胆管细胞的癌肿,是临床常见的肿瘤之一,具有恶性程度高,病情进展快,生存期短,难以治愈的特点。原发性肝癌是严重危害人类生命健康的重大疾病之一,据统计,每年全球肝癌发病率位居恶性肿瘤发病率的第5位,而其中55%的病例发生在中国。原发性肝癌被认为是当今世界上最主要的恶性肿瘤之一,是全球肿瘤死亡率第三的恶性肿瘤。手术切除、经肝动脉插管栓塞化疗、经皮无水乙醇注射、射频消融、肝移植等
目的:观察Ad-NK4能否增强RPMI Nutlin-3 8226细胞对硼替佐米(BOR)的化疗敏感性。方法:细胞-基质粘附实验和RPMI 8226细胞-ECV 304细胞粘附实验检测Ad-NK4对RPMI 8226细胞粘附的影响;Western blot检测粘附和侵袭相关蛋白MMP2、MMP3、MMP7、VEGF表达的变化;MTT法检测Ad-NK4对细胞增殖的影响;PI流式细胞术检测Ad-NK4对细胞凋亡的影响;Western Blot检测Cleaved caspase-3、BAX和BCL-2蛋白表达水平的变化。结果:两种细胞粘附实验均显示Ad-NK4可显著抑制RPMI 8226细胞粘附,且与Erk信号通路和JAK/STAT信号通路显著相关(P0.05)。Ad-NK4和BOR联用的细胞抑制率和诱导凋亡比例均显著高于单用Ad-NK4或BOR。同样,Ad-NK4和BOR联用组Cleaved caspase-3和BAX蛋白水平均明显高于单独作用组,而BCL-2蛋白水平却相反,同时在联用组BAX/BCL-2比率增加。结论:通过活化Caspase-3和上调BAX/BCL-2比率的途径,Ad-NK4可增强BOR体外抗骨髓瘤RPM I 8226细胞作用。
[目的]研究c-Met抑制剂PHA665752联合5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人结肠癌细胞SW620生长的抑制作用及机制。[方法]选取48只4周龄的雄性裸鼠皮下接种人结肠癌细胞SW620,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(2.

7和腹腔巨噬细胞,观察在不同氧浓度状态下p38 MAPK的活性和TNF-α分泌水平的改变,同时应用p38抑制剂SB203580进行干预,证实低氧在TNF-α合成中的重要地位。在内毒素血症小鼠模型应用p38抑制剂SB203580治疗,观察小鼠血清TNF-α水平和肺组织HIF-1α蛋白的表达,阐明低氧和HIF-1α在调节脓毒症TNF-α产生的作用机制及其与p38 Ipatasertib订单 MAPK通路的关系。 研究方法 1.SB203580对小鼠巨噬细胞系TNF-α产生的抑制效应与低氧和p38 MAPK活性的关系 (1)正常氧状态下SB203580抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞TNF-α产生的剂量关系实验 RAW264.7细胞分别用25μM和10μM SB203580预处理2 h,然后加入LPS10、100及1000 ng/ml,另外一组RAW264.7细胞分别用1-20μM SB203580预处理2h,然后加入LPS 1ng/ml或者用0.2-2μM SB203580预处理2 h,然后加入LPS 0.1ng/ml,正常氧状态下细胞继续孵育18 h,收集上清液。 (2)SB203580在正常和低氧浓度环境下对TNF-α产生的抑制效应实验

RAW264.7细胞培养液加入10μM SB203580培养2 h后加入LPS 1 ng/ml,细胞分别在正常氧、低氧(0.5%O_2)和氯化钴(100μM)模拟低氧环境孵育18 h,收集上清液。 (3)SB203580在正常和低氧浓度环境下对TNF-αmRNA转录活性及mRNA稳定性的影响实验 RAW264.7细胞处理同上,加入LPS培养2 selleck化学药品液面控制 h后,用Trizol方法提取细胞RNA。 另设实验组在加入LPS

2 h后再加入2μg/ml转录抑制剂Actinomycin D,加入Actinomycin D的时间点为0时,在10、30和60 min时间点用Trizol收集细胞RNA。 (4)正常和低氧浓度环境下SB203580抑制效应的动态监测实验 RAW264.7细胞用10μM SB203580预处理2 h,在正常氧和氯化钴(100μM)模拟低氧环境下向细胞培养液中加入LPS 1ng/ml,加入LPS的时间点记为0时,在加入LPS后1、2、4、6、8h收集上清液。 (5)低氧对p38 MAPK及其底物MAPKAPK2活性影响实验 RAW264.7细胞经10μM SB203580预处理2 h后,在正常氧浓度和低氧模拟环境接受LPS 1ng/ml刺激,LPS加入的时间点记为0时,在10、30、60 min收集细胞蛋白质。 2.低氧影响SB203580抑制小鼠腹腔巨噬细胞TNF-α产生作用的实验 向原代培养的小鼠腹腔巨噬细胞培养液中加入20μM或10μM SB203580,2 h后加入LPS 1ng/ml或10 ng/ml,细胞在正常氧及氯化钴(100μM)模拟低氧环境下孵育18 h,收集上清液。 以上细胞实验均设无SB203580预处理对照组和溶剂对照组。 3.动物模型实验 (1)正常氧环境下不同剂量LPS对小鼠血清TNF-α水平的影响 小鼠接受腹腔注射0.5-3.5 mg/kg

LPS 90 min后处死,留取标本。 (2)正常氧环境和低氧环境下SB203580对内毒素血症小鼠血清TNF-α水平的影响 小鼠接受静脉注射SB203580 15、25 mg/kg,2 h后腹腔注射LPS 并且 0.5 mg/kg,将小鼠置于正常氧环境下或者低氧坏境(10%O_2),注射LPS后90 min处死小鼠,留取标本。 (3)SB203580对内毒素血症小鼠血清TNF-α水平及肺HIF-1α表达的影响 小鼠经静脉注射SB203580 15 mg/kg,2h后腹腔注射LPS 0.5 mg/kg,在注射LPS后90 min和240 min处死,留取血清和肺组织标本。 以上动物实验均设溶剂对照组和生理盐水对照组,每组3只小鼠。 3.实验标本处理方法 (1)酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培上清液和小鼠血清TNF-α水平; (2)Real-time PCR定量检测TNF-αmRNA转录水平; (3)Western blot检测p38 MAPK活性和下游底物MAPKAPK2蛋白表达; (6)RT-PCR和Real-time PCR检测小鼠肺组织HIF-1αmRNA的表达; (7)Western blot检测小鼠肺组织HIF-1α蛋白的表达; (8)免疫组织化学染色(IHC)检测小鼠HIF-1α蛋白在肺组织中的表达及分布情况。 研究结果 1.正常氧状态下RAW264.7对LPS的刺激非常敏感。0.1 ng/ml低剂量至1000ng/ml高剂量LPS均可使RAW264.7细胞产生大量的TNF-α,比未经处理的RAW264.7细胞中TNF-α基本值增加10倍以上。SB203580对LPS诱导RAW264.7细胞产生的TNF-α具有非常明显的抑制效果,可以抑制90%以上TNF-α的产生,并且呈剂量依赖方式,高于SB203580 10μM或1μM的剂量均能有效抑制LPS1 ng/ml或0.

绵马素PB对多种肿瘤细胞株具有良好的增殖抑制作用。其中对HepG2细胞的抑制作用最强,IC50值是10.59±0.67μM,进一步检测结果表明,绵马素PB对HepG2细胞的增殖抑制作用是呈时间和浓度依赖的。然而,正常的小鼠单核巨噬细胞Raw264.7和小鼠胚胎成骨细胞MC3T3-E1的IC50值分别是42.50±0.54μM和38.19±0.92μM,远远大于HepG2细胞,说明绵马素PB对正常细胞株的毒性较小。另外,使用激光共聚焦显微镜从形态学角度观察绵马素PB作用于人肝癌HepG2细胞后的变化,可以看出其细胞染色质凝集并固缩,细胞核膜核仁碎裂成小片段形成凋亡小体。

2.绵马素PB能够诱导HepG2细胞发生凋亡。首先,使用罗丹明123染色法检测绵马素PB作用于人肝癌HepG2细胞后线粒体跨膜电位的变化,结果呈现明显地下降趋势。其次,采用琼脂糖凝胶电泳检测梯状条带(DNA EPZ-6438化学结构 Ladder)的产生,可以看出加入绵马素PB后的HepG2细胞的泳道内均有明显的DNA Ladder出现。最后,利用AnnexinV-FITC/PI双染试剂盒检测细胞凋亡百分率,结果显示绵马素PB作用于HepG2细胞48h后,细胞的凋亡百分率显著升高,并且呈浓度依赖的方式。 3.绵马素PB通过调节PI3K/Akt/GSK-3β信号通路从而引起HepG2肝癌细胞凋亡(1)绵马素PB可以抑制PI3K的表达,抑制Ser473Akt的磷酸化,抑制Ser9GSK-3β的表达,随后上调NAG-1的表达。相似地,加入PI3K抑制剂渥曼青霉素后,各蛋白的表达效果和绵马素PB作用一致。该结果说明PI3K/Akt/GSK-3β信号通路可能是绵马素PB作用于HepG2肝癌细胞的主要分子机制之一。 Palbociclib数据表 (2)绵马素PB诱发了caspase-3的激活和PARP的裂解。用广谱caspase抑制剂Z-VAD-FMK预处理HepG2细胞2h后,可明显地抑制二者的变化。这说明绵马素PB诱导的HepG2细胞凋亡是通过caspase所依赖的途径。 综上所述,绵马素PB在不影响正常细胞生长的状况下,可以有效地抑制HepG2肝癌细胞的增殖,这种增殖抑制作用与其诱导的细胞凋亡密切相关。绵马素PB通过caspase所依赖的途径诱导HepG2肝癌细胞发生凋亡,其中PI3K/Akt/GSK-3β/NAG-1信号通路可能作为最主要的分子机制之一。上述研究结果将对绵马素PB进一步的研究并开发为新药提供良好的理论基础。
世界范围内，乳腺癌发病率与死亡率高，是影响女性健康的重要疾病。其中HER-2(Human

epidermal growth factor receptor-2)蛋白过表达乳腺癌，传统检测易误诊、漏诊，在治疗过程中易产生副作用及引发不良预后。随着纳米科技理论的进步及纳米颗粒制备工艺的改善，因金纳米颗粒独特的理化特性，将其引入肿瘤医学领域，对乳腺癌的检测与治疗有创新意义。 目的 通过金纳米颗粒制备及曲妥珠金纳米探针合成，探讨颗粒毒性、探针暗场应用及处理乳腺癌细胞实验效果，为乳腺癌纳米医学诊断与治疗研究提供依据。 因为 方法 以柠檬酸盐还原法制备金纳米颗粒(Gold nanoparticles,GNPs)，对颗粒进行透射镜(TEM)表征及紫外吸收光谱检测，通过静置检测金纳米颗粒时间稳定性；GNPs通过静电作用吸附曲妥珠单抗(Herceptin)，进而合成曲妥珠金纳米探针(GNP@Herceptin)，表征及稳定性检测方法同GNPs；中科院上海细胞库购买人乳腺癌细胞株MCF-7、SK-BR-3，免疫组化检测细胞HER-2蛋白表达；利用扫描电镜(SEM)，检测定位于细胞膜表面GNP@Herceptin，并在暗场环境下观察细胞膜上GNP@Herceptin；设置0-400mg/mL7浓度梯度GNPs，并设置培养液空白组，细胞增殖抑制剂盒检测GNPs细胞毒性；设置0-200ng/mL7浓度梯度GNPs、Herceptin和GNP@Herceptin，并设置培养液空白组，细胞增殖抑制试剂盒检测MCF-7与SK-BR-3细胞增殖抑制效果；设置0-1.0μg/mL4浓度梯度Herceptin、GNP@Herceptin，细胞凋亡试剂盒检测SK-BR-3细胞凋亡，细胞周期试剂盒检测SK-BR-3细胞周期阻滞；运用SPSS21.0对同种细胞不同浓度颗粒毒性、抗体与探针增殖抑制、细胞凋亡及周期阻滞数据进行单因素方差分析，同一浓度两种细胞颗粒毒性数据及抗体与探针最佳处理剂量采用两组独立样本t检验，检验水平α为0.05。

结果 金纳米颗粒近似圆形，粒径大小(14.11±1.13) nm，并可与曲妥珠单抗成功吸附，溶液澄清透亮，稳定性好；GNPs与Herceptin结合率为2.25：1，结合效果好；通过SEM检测，可发现定位于细胞膜表面的GNPs@Herceptin，并且在暗场环境下，可看到SK-BR-3细胞周围的橘黄色生物探针；GNPs浓度在400μg/mL时，MCF-7细胞存活率减少至43.9%(t=39.709，P=0.001)，在100μg/mL时，SK-BR-3细胞存活率为65.1%(t=6.796，P=0.002)，均有明显细胞毒性效果，但金纳米颗粒浓度下降至50μg/mL时，SK-BR-3与MCF-7细胞生存率分别为82.8%(t=1.979，P=0.119)、99.3%(t=0.177，P=0.868)，且未显示出细胞增殖抑制效果，说明低浓度GNPs有良好的生物相容性。Herceptin处理SK-BR-3细胞后，最佳用药剂量为7.143ng/1×104细胞，GNP@Herceptin处理细胞后最佳用药量从50ng/mL降低至25ng/mL，且差异具有统计学意义(t=14.

05),大鼠精子密度和精子活率以及快速前向运动精子率(A级)、满速前向运动精子率(B级)显著上升(P<0.05),睾丸CYP19水平均显著升高(P0.05);与模型组相比,正常+阻滞组和模型+阻滞剂组TGF-β1均有降低(P0.05)。结论:TGF-βR1在睾丸表达异常与肾阳虚不育模型大鼠精子质量提高和血清性激素水平改变有关。
Multiple MK-1775分子重量 myeloma is a hematological malignancy inwhich clonal plasma cells proliferate and accumulate within the bone marrow. The presence of osteolytic le-sions due to increased osteoclast(OC)

activity and sup-pressed osteoblast(OB) function is characteristic of the disease. The bone marrow mesenchymal stromal cells(MSCs) play a critical role in multiple myeloma patho-physiology, greatly promoting the growth, survival, drug resistance and migration of myeloma cells. Here, we specifically discuss on the relative contribution of MSCs to the pathophysiology of osteolytic lesions in light of the current knowledge of the biology of my-eloma bone disease(MBD), together with the reported genomic, functional Lumacaftor供应商 and gene expression differences between MSCs derived from myeloma patients(pMSCs) and their healthy counterparts(dMSCs). Being MSCs the progenitors of OBs, pMSCs primarily contribute to the pathogenesis of MBD because of their reduced osteogenic potential consequence of multiple OB inhibi-tory factors and direct interactions with myeloma cells in the bone marrow. Importantly, pMSCs also readily contribute

to MBD by promoting OC formation and ac-tivity at various levels(i.e., increasing RANKL to OPG expression,

augmenting secretion of activin A, uncou-pling ephrinB2-EphB4 signaling, and through augment-ed production of Wnt5a), thus further contributing to OB/OC uncoupling in osteolytic lesions. In this review, we also look over main signaling pathways involved in the osteogenic differentiation of MSCs and/or OB activity, highlighting amenable therapeutic targets; in parallel, the reported activity ROCK 抑制剂 of bone-anabolic agents(at preclinical or clinical stage) targeting those signaling pathways is commented.
目的研究黄芪甲苷(As-IV)对高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)损伤的保护作用及其机制。方法用HMC为目的细胞,实验分为正常对照组、甘露醇对照组、高糖组、Tempol(100μmol/L)组、转化生长因子-β(TGF-β)阻断剂SB431542(10μmol/L)组与As-IV(25、50、100μmol/L)组。各组细胞培养48 h后,用MTT法检测HMC增殖状况,二氢二氯荧光素(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)含量,ELISA法检测细胞上清液中IV型胶原(ColⅣ)的表达,Western blot法检测细胞中转化生长因子-β1(TGF-β1)、pSmad2/3、NADPH氧化酶4(NOX4)、瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)蛋白的表达。结果与高糖组比较,Tempol组、SB431542组、As-IV 25、50、100μmol/L组均能显著抑制高糖诱导的细胞增殖,减少细胞内ROS及上清液中ColⅣ的含量,降低高糖诱导细胞内TGF-β1、p-Smad2/3、NOX4蛋白的高表达,并提高TRPC6蛋白的表达(P<0.05,P
Pancreatic cancer has become the fourth leading cause of cancer death in the last two decades. Only 3%-15% of patients diagnosed with pancreatic cancer had 5 year survival rate. Drug resistance, high metastasis, poor prognosis and tumour relapse contributed to the malignancies and difficulties in treating pancreatic cancer.

5%乙醇溶液。在实验期间每天定时观察各组小鼠进食、饮水、毛色、活动及大便性状，称量体重，观察大便隐血情况，并进行疾病活动指数评分（DAI），至造模第8天全部小鼠均处死，收集小鼠结肠组织，一部分用于石蜡包埋切片，HE染色，并观察组织病理学损伤情况,行组织学评分；另取两份组织保存于液氮中备用。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测结肠黏膜组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、髓过氧化物酶(MPO)的表达；应用免疫组织化学染色观察结肠组织p-p38MAPK的表达情况及逆转录转氨酶链聚合反应（RT-PCR）方法检测结肠组织内p38MAPKmRNA的表达。结果：1.B组小鼠症状、组织学检查均符合UC诊断标准，且DAI及组织学评明显高于A组，经过地塞米松和姜黄素干预后，C组、D组、E组和F组DAI及组织学评分有不同程度的降低。2.ELISA结果：

Ibrutinib购买 B组结肠黏膜中TNF-α、 MPO的含量分别为（382.26±21.82、339.31±13.61）明显高于C组（257.42±19.04、238.95±11.17）、D组（333.67±17.72、298.93±9.94）、E组（287.89±19.57、258.60±13.07）和F组（271.10±13.25、248.52±9.24），有统计学差异（P均＜0.01），C组的含量显著低于D组、E组的含量，有统计学差异（P＜0.05），C组同F组相比差异无统计学意义（P＞0.05）；E组、F组较D组含量低，差异有统计学意义（P＜0.05），F组较E组降低，但差异无统计学意义（P＞0.05）。3.免疫组织化学法结果：B组小鼠结肠黏膜p-p38MAPK表达（6.80±0.77）明显高于A组（0.52±0.32），差异有统计学意义(P＜0.01)，经地塞米松及姜黄素低、中、高剂量干预后,C组(2.50±0.82)、D组（4.36±1.02）、E组（3.62±0.79）、F组（3.12±0.63）均较B组有显著降低，有统计学差异（P＜0.01），C组表达明显低于D组、E组，差异有统计学意义（P＜0.05），D组较E组、F组升高（P值均＜0.05），E组与F组差异无统计学意义（P＞0.05）。4.RT-PCR结果：B组结肠组织内p38MAPK mRNA明显高于A组，C组、D组、E组和F组均较B组有不同程度的降低，其中以F组表达最低。结论：姜黄素对DSS诱导的小鼠急性期UC有一定治疗作用，可能是通过抑p38MAPK信号通路，减少TNF-α等促炎因子的释放，减轻中性粒细胞的浸润，从而减轻UC小鼠肠粘膜炎症损伤而发挥治疗UC作用。
目的：我们的前期实验证实ANP32A在心肌细胞中有表达。敲减ANP32A在心肌细胞中的表达可抑制多柔比星诱导的心肌细胞凋亡。MAPKs在多柔比星诱导的心肌细胞凋亡中起重要作用。我们假设：敲减ANP32A经MAPKs通路抑制多柔比星诱导的凋亡。

没有 方法：原代心肌细胞培养并运用肌钙蛋白I（cTnI）对其进行鉴定。实验分组：正常心肌细胞组（CMs组）、多柔比星（DOX）组、空载病毒（NC-LV）组、空载病毒+多柔比星（NC-LV+DOX）组、目的基因病毒（Anp）组、目的基因+多柔比星（Anp+DOX）组。将构建的lentivirus-scrRNAi和lentivirus-ANP32A/GV115-RNAi载体分别转染入NC-LV组、NC-LV+DOX组和Anp组、Anp+DOX组。转染72h后应用免疫荧光法检测其转染心肌细胞的效率，并于DOX组、NC-LV+DOX组和Anp+DOX组加入多柔比星（1μmol/L）作用12h建立心肌细胞凋亡模型，应用AnnexinV-FITC法检测6组心肌细胞凋亡率，以心肌细胞凋亡率作为心肌细胞凋亡的观察指标，观察敲减ANP32A对多柔比星诱导的心肌细胞凋亡的影响。运用Westernblot法检测CMs组、DOX组、Anp组和Anp+DOX组的ERK1/2、p-ERK1/2、JNK、p-JNK、P38MAPKs、p-P38MAPKs蛋白表达水平。数据运用SPSS13.0统计软件包进行多组间单因素方差分析和组间t检验。

selleck screening library 结果：体外原代培养的心肌细胞，呈多边形、梭形等，部分细胞聚集成细胞簇，呈放射状排列的同心圆状，搏动呈同步性，搏动频率多为60-100次/分。对细胞进行cTnI鉴定显示95%以上细胞呈阳性表达，符合心肌细胞特征。转染NC-LV和ANP32A敲减重组慢病毒心肌细胞72h后，荧光显微镜观察分别发现90%和80%以上的心肌细胞表达绿色荧光蛋白。分析AnnexinV-FITC法测定DOX组和CMs组心肌细胞凋亡率[（31.94±1.24）%vs（3.62±0.53）%,（p0.05）]、[（33.14±1.57）%vs（31.94±1.24）%,（p>0.05）]，提示慢病毒对心肌细胞的毒性不影响结果分析；分析Anp+DOX组与DOX组凋亡率[（16.62±2.07）%vs（31.94±1.24）%,（p0.05），说明多柔比星未引起ERK1/2活性的变化；DOX组与CMs组p-JNK/JNK比值高了1.5倍，差异有统计学意义（p
目的： 1.观察TNF-α对RAFLS的Ras-p38MAPK信号通路活化水平的影响。 2.观察不同浓度的ATO对TNF-α诱导的Ras-p38MAPK信号通路活化水平的影响。 方法： 1.从RA患者的膝关节腔积液中获取标本进行原代培养RA FLS细胞。培养至第3代即获得纯化的RA FLS细胞。 2.使用10μg/L的TNF-α与第3代RA FLS共孵育30min，运用Western-blot检测其与空白对照组的Ras、p-p38的表达水平。 3.将三种不同浓度的ATO（0.5μmol/L、5μmol/L、25μmol/L）与RAFLS细胞共孵育24h，然后终止反应，将10μg/L TNF-α与之共孵育30min，终止反应进行Western blot检测每个组的Ras、p-p38的表达水平。 结果： 1.原代培养有较多的巨噬细胞，随着传代的进行，其逐渐被去除。到第三代培养的细胞基本上都是RA FLS细胞。 2.TNF-α刺激后的RAFLS，通过Western blot检测表明Ras, p-p38表达水平明显升高。（p
目的： 研究天麻素对谷氨酸损伤的PC12细胞的保护作用及其相关机制。 方法： 采用谷氨酸建立PC12细胞损伤模型，MTT比色法测定细胞活力并确立谷氨酸最佳造模浓度。采用倒置显微镜观察细胞形态变化；MTT法检测细胞活力；AO/EB双染法和Hoechst荧光染色法观察细胞凋亡形态；流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）的变化以及Annexin V/PI染色后细胞凋亡率；罗丹明123染色法检测线粒体跨膜电位；Western blotting法分析p-p38，p-ERK1/2及caspase-3蛋白的表达。 结果： 1.

明确RSG对颅骨成骨细胞分化的影响极其机制。2.明确明确RSG对颅骨成骨细胞增殖的影响及其机制； 本论文的第二个部分在成骨样细胞MG-63上进行。雌激素对于绝经后骨质疏松的治疗，效果显著。但同时又存在易诱发乳腺癌、子宫内膜癌等潜在危险因素。近年来，植物雌激素作为一种天然的选择性雌激素受体调节剂（SERM），在骨质疏松的防治中日益受到关注。大豆异黄酮是其中最具代表性的一类。大豆异黄酮(soybeanisoflavone)，属植物黄酮类，主要来源于豆科蝶形花亚科植物，是一类具有广泛营养学价值，健康保护和治疗学意义的非固醇类物质。大豆异黄酮的结构与雌激素相似，能够与雌激素受体(ERs)结合，进而发挥转录调节的作用。ER分为α和β两种亚型，雌激素与ER结合后，除了通过经典的ERE途径调节基因转录外；也有大量的文献报道，雌激素还可以通过蛋白-蛋白间的相互作用，调节CRE介导的基因转录。异黄酮类植物雌激素是否也能像雌激素一样，对ERE和CRE介导的基因转录都具有调节作用呢？有关这方面的报道，结论不一。因此，我们在MG63细胞上，主要进行了两方面的研究：1.比较大豆异黄酮与雌激素在雌激素经典作用途径中的作用异同，即两者对ERE报告基因的转录调节作用有何差别；2.比较大豆异黄酮与雌激素在雌激素非经典作用途径中的作用异同，即两者对CRE报告基因的转录调节作用有何差别。

无 主要实验结果如下： 一、罗格列酮对颅骨成骨细胞增殖及分化的调节作用 （一） RSG抑制颅骨成骨细胞分化的作用及其机制 1、在原代培养的小鼠颅骨细胞上，利用β-磷酸甘油和L-抗坏血酸共同诱导其成骨细胞的成熟，给予不同浓度的RSG（10-9～10-6M）连续处理10天。RSG能剂量依赖性的抑制碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、1型胶原蛋白（type1collagen，Col1）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor2，Runx2）、骨钙素（osteocalcin，OC）等成骨相关基因的mRNA表达。 2、在诱导条件培养基培养，并给予不同浓度的RSG（10-9～10-6M）连续处理21天，利用茜素红染色以及碱性磷酸酶活性检测，观察RSG对骨钙结节形成的影响。结果显示，RSG能显著抑制钙结节的形成，抑制碱性磷酸酶的活性，其抑制效应呈现剂量依赖性。

3、 Wnt/β-catenin通路已知在促进成骨细胞分化成熟过程中发挥主要作用。作为调节Wnt信号通道中最关键的事件之一，β-catenin在胞内的水平可受到GSK-3β的调节。当GSK3β被激活能促进β-catenin的降解，降低其在胞内的表达水平，从而抑制骨形成。为明确RSG抑制成骨细胞的分化是否是通过激活GSK3β实现的。我们选取GSK3β的特异性阻断剂SB216763（2*10-5M）与RSG（10-6M）共同处理成骨细胞。SB216763能完全逆转RSG抑制Col1，ALP，Runx2，OC等成骨相关基因的mRNA表达。 4、用SB216763（2*10-5M）与RSG（10-6M）共同处理成骨细胞21天，SB216763能完全逆转RSG对制钙结节形成以及碱性磷酸酶活性的抑制作用。以上结果提示，RSG抑制成骨细胞的分化是通过激活GSK3β实现的。

5、为进一步探讨RSG作用的受体机制，我们联合使用PPARγ特异性阻断剂GW9662（10-6M）与RSG（10-6M），分别观察成骨相关基因，骨钙形成以及碱性磷酸酶活性的变化，以明确RSG抑制成骨细胞的分化是否通过PPARγ。结果显示，GW9662只能部分逆转RSG对上述观察项目的抑制效应。进一步利用siRNA干扰技术，敲低细胞内的PPARγ，所得结果与使用GW9662的作用一致。以上结果提示RSG激活GSK3β的作用仅部分通过PPARγ实现。 所以 6、有文献报道，RSG在骨细胞上可以不依赖于PPARγ，而是通过膜受体GPR40发挥作用。为明确在成骨细胞上，RSG是否也存在同样的作用机制，我们使用GPR40的激动剂GW9508（10-5M）单独处理细胞，未观察到其对成骨基因mRNA表达的影响。接着，又利用siRNA技术敲低细胞内的GPR40，再用RSG（10-6M）处理，分别观察成骨基因的表达，骨钙形成以及碱性磷酸酶活性等指标。结果显示，敲低GPR40后，也只能部分逆转RSG对上述指标的抑制作用。同时，我们还观察了RSG对PPARγ以及GPR40蛋白表达的影响。结果显示，在不给诱导条件时，细胞内PPARγ处于极低的水平，而GPR40水平较高。给予诱导条件后，PPARγ表达增多，而GPR40的表达显著降低。在RSG处理后，PPARγ和GPR40都剂量依赖的表达增多。提示GPR40在成骨诱导过程中维持低表达，RSG可促进GPR40表达，后者由此介导了部分RSG作用。 Regorafenib体外 7、我们还观察了诱导成骨细胞成熟过程中，SHP-1的mRNA和蛋白表达的变化。发现随诱导时程的延长，SHP-1mRNA和蛋白表达呈现时间依赖性增加。给予不同浓度的SHP-1的特异性拮抗剂NSC87877处理。NSC87877对上述成骨基因mRNA的表达以及β-catenin的蛋白表达均有显著的抑制作用，并呈剂量依赖性。进一步，利用siRNA技术敲低细胞内的SHP-1或是过表达无催化活性的SHP-1突变质粒，均能显著抑制成骨基因的表达。提示SHP-1具有促进成骨细胞成熟的作用。 8、给予GSK3β特异性阻断剂SB216763与NSC87877共同作用，SB216763能逆转NSC87877抑制β-catenin蛋白表达的作用，提示，SHP-1促进成骨的作用是通过抑制GSK3β的激活实现的。 9、给予RSG处理，成骨细胞中SHP-1的mRNA表达显著下降，提示RSG抑制成骨细胞中SHP-1的mRNA表达。 （二） RSG抑制颅骨成骨细胞增殖的作用及其机制 1.

SQDG具有明显的抗肝纤维化作用,其机制与改善肝纤维化大鼠肝脏的氧应激状态、抑制炎性细胞因子的生成、抑制HSC增殖等有关。 2. rrPDGF-BB刺激可引起COX-2表达量持续增加,选择性的COX-2抑制剂NS-398可以明显抑制rrPDGF-BB诱导的HSC-T6增殖。SQDG主要成分Pae可以明显抑制rrPDGF-BB引起的HSC-T6 COX-2表达增加,抑制COX-2的表达可能是Pae抑制HSC-T6增殖的作用机制之一。 3.rrPDGF-BB刺激HSC-T6可引起ERK1/2的迅速磷酸化。Pae(25, selleck抑制剂 50, 100 mg·L~(-1))可以抑制rrPDGF-BB引起的HSC-T6 ERK1/2的激活,降低p-ERK1/2水平。MEK抑制剂U0126可以抑制rrPDGF-BB引起的HSC-T6 COX-2表达增加。提示Pae可能通过抑制rrPDGF-BB刺激的HSC-T6 ERK1/2信号通路的活化,减少COX-2的表达发挥其抑制HSC-T6增殖的作用。

4. rrPDGF-BB可以明显促进Gαi~(-1)和Gαi-2蛋白表达水平,降低细胞内cAMP水平和PKA活性,Pae可明显抑制rrPDGF-BB引起的Gαi~(-1)、Gαi-2的表达升高,且Pae抑制rrPDGF-BB刺激的HSC-T6增殖反应与其提高HSC-T6细胞内cAMP水平密切相关。Pae可能通过下调HSC-T6 Gαi蛋白偶联的信号通路抑制rrPDGF-BB刺激的HSC-T6过度增殖。 5. Gi特异性的抑制剂PT可抑制rrPDGF-BB诱导的HSC-T6的增殖及p-ERK1/2的表达,MEK1/2特异性的抑制剂U0126对Gαi~(-1)和Gαi-2蛋白表达水平及细胞内降低的cAMP水平、PKA活性没有明显的影响。提示在HSC上,PT敏感的Gi蛋白可促进ERK1/2的激活。Pae可能通过下调Gαi的表达,抑制ERK1/2的激活,降低p-ERK1/2水平,发挥其抑制rrPDGF-BB刺激HSC-T6过度增殖的作用。
间充质干细胞移植对缺血缺氧性和神经退行性等中枢神经系统疾病的治疗发挥了积极的作用。研究发现,移植入体内的间充质干细胞可以向病变部位迁移,并可在局部微环境的诱导下向组织损伤修复所急需的组织细胞分化,还可以分泌多种细胞因子,通过旁分泌的作用对受损组织发挥营养和保护作用。但是,移植后向病变部位迁移的间充质干细胞的比例较低,在一定程度上限制了细胞移植的作用。因此,在间充质干细胞移植的同时,应用药物等辅助手段促进细胞的迁移和增殖,提高病变局部的移植细胞数量,有可能提高细胞移植的治疗效果。 selleck中国 在具有神经保护作用的药物中,中药活性单体成分单一、结构明确、易于其作用机制的深入分析。在这些单体中找到具有促进间充质干细胞增殖和迁移作用的成分,辅助应用于中枢神经系统疾病的间充质干细胞移植治疗,可以在提高病变部位移植细胞数量的同时,发挥其对受损神经的保护作用,从而提高疾病治疗的综合效果。但是,具有神经保护作用的中药活性单体成分对间充质干细胞增殖和迁移的影响的研究尚未见报道。因此,在前期筛选工作的基础上,本文深入研究了具有神经保护作用的中药活性单体—原儿茶酸,对人脂肪干细胞体外增殖能力和体外迁移能力的影响,并对其相关机制进行了初步的探讨。

原儿茶酸处理后,人脂肪干细胞的形态没有显著变化,而且仍表达细胞表面抗原标志CD29、CD13和CD44,不表达CD34、CD45和HLADR。各表面抗原标记的表达量与对照组相比没有显著差异:经体外诱导分化实验证明,原儿茶酸处理后,人脂肪干细胞向成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和神经细胞分化的能力没有显著变化;酶联免疫吸附实验结果显示,原儿茶酸处理没有影响人脂肪干细胞细胞因子IL-6和生长因子IGF-Ⅰ的分泌能力。因此,原儿茶酸处理后,人脂肪干细胞仍保持其多向分化潜能、细胞因子和生长因子分泌等生物学特性。

所以 应用WST-8法检测了原儿茶酸对人脂肪干细胞的体外增殖的影响,发现原儿茶酸能够促进人脂肪干细胞的体外增殖能力,其作用呈现明显的剂量依赖性。0.5 mM,1.0mM和1.5 mM的原儿茶酸处理48小时后,人脂肪干细胞增殖能力分别提高51%,78%和103%。原儿茶酸发挥作用的最小浓度为0.5 mM,适宜浓度为1.5 mM。同时,1.5 mM原儿茶酸对人脂肪干细胞的体外增殖的促进作用呈现明显的时间依赖性,其发挥作用的最短时间是24小时,使细胞增殖能力提高66%;适宜作用时间是96小时,提高细胞增殖能力124%。此外,原儿茶酸对人脂肪干细胞的细胞凋亡没有明显的影响。 进一步通过DNA含量的检测分析了原儿茶酸对人脂肪干细胞细胞周期的影响,发现原儿茶酸能够促进人脂肪干细胞的细胞周期G0/G1期向S期的转换。在0.5 mM-1.5mM的浓度范围内,人脂肪干细胞的S期和G2/M期的细胞所占比例随原儿茶酸浓度的增加而呈明显上升趋势,处于G0/G1期的细胞所占比例随原儿茶酸浓度的增加呈相应的下降趋势。其中,1.5 mM原儿茶酸的作用最为明显,使S期细胞比例增加2倍。免疫蛋白印迹检测发现,原儿茶酸处理明显提高了细胞周期素D1的蛋白水平。为了进一步证明原儿茶酸对脂肪干细胞体外增殖的促进作用是否与细胞周期素D1蛋白表达的变化有关,本文应用RNA干扰技术对人脂肪干细胞的细胞周期素D1进行了转录后水平的基因沉默,结果显示,细胞周期素D1的siRNA干扰使原儿茶酸处理组人脂肪干细胞的体外增殖下降45%,与对照组细胞体外增殖的下降比例(26%)相比具有显著性差异,表明细胞周期素D1的siRNA干扰显著抑制了原儿茶酸对人脂肪干细胞体外增殖的促进作用,证实原儿茶酸通过对细胞周期素D1表达的调控促进了人脂肪干细胞的体外增殖能力。 应用明胶包被的双层细胞培养板,观察原儿茶酸对人脂肪干细胞体外迁移能力的影响。在0.5 mM-1.8 mM的浓度范围内,原儿茶酸处理人脂肪干细胞48小时能够显著提高其体外迁移能力,其作用呈现明显的剂量依赖性。0.5 mM,1.0 mM和1.5 mM的原儿茶酸处理的细胞迁移率分别提高35%,63%和82%。0.5 mM原儿茶酸是发挥其促进迁移作用的最小浓度,原儿茶酸发挥最大作用的浓度是1.5 mM。同时,原儿茶酸促进人脂肪干细胞迁移的作用具有时间依赖性。在1.

METHODS: We conducted 更多 a search in Pub Med, Web of Science, and the Cochrane Library covering all published papers up to July 2014. Only studies assessing survival in colorectal cancer by c-Met status were included. This meta-analysis was performed by using STATA11.0.RESULTS: Ultimately, 11 studies were included in this analysis. Meta-analysis of the hazard ratios(HR)indicated

that patients with high c-Met expression have a significantly poorer overall survival(OR)(HR = 1.33, 95%CI: 1.06-1.59) and progression-free survival(PFS)(HR = 1.47, 95%CI: 1.03-1.91). Subgroup analysis showed a significant Sorafenib association between high c-Met expression and poorer overall survival in the hazard ratio reported(HR = 1.41, 95%CI: 1.08-1.74).CONCLUSION: The present meta-analysis indicated that high c-Met expression was associated with poor prognosis in patients with colorectal cancer.
目的:探讨c-Met抑制剂PHA-665752对人鼻咽癌细胞的生长抑制作用,为c-Met抑制剂在鼻咽癌中的应用提供实验依据。方法:Western blot法检测鼻咽癌细胞经HGF和(或)PHA-665752处理前后CNE-1细胞中相关信号分子的磷酸化状态变化。MTT法检测肝细胞生长因子(HGF)的促鼻咽癌细胞CNE-1的增殖作用。同时检测PHA-665752对CNE-1细胞的生长抑制作用。流式分析PHA-665752对鼻咽癌细胞CNE-1凋亡的影响。结果

:HGF可促进CNE-1细胞的增殖。而PHA-665752抑制了CNE-1细胞的增殖,并增强细胞凋亡。PHA-665752抑制c-Met磷酸化,同时降低下游信号分子Akt、Erk1/2和STAT3的磷酸化。结论:PHA-665752显著抑制鼻咽癌细胞CNE-1增殖,诱导细胞凋亡,其机制与调节下游MAPK、PI3K和STAT通路有关。
胃癌在全球最常见的恶性肿瘤中排第四位,发病率较前有所下降,但在世界范围内胃癌病例发生数中我国占42%,位居东亚地区常见癌症的首位[1]。目前,胃癌病人多能选择化学治疗及行手术治疗,但其5年生存率仍位于50%左右,导致其死亡的主要原因之一是癌组织的浸润和转移[2]。可见,了解胃癌的发生、浸润和转移相关的分子调控机制并对其进行早期预测及早期干预,对于制定治疗方案、改善患者预后是十分有益的。研究发现,成熟的胃癌细胞高表达趋化因子受体CXCR4,在趋化因子SDF-1的作用下促进激活胃癌细胞内PI3K/Akt途径,以促进胃癌细胞的抗凋亡作用。本文对高表达趋化因子受体CXCR4及其趋化因子CXCL12组成的信号轴对胃癌细胞中PI3K/Akt途径的影响及表达情况做一简要综述。
食管癌是人类较常见的消化道恶性肿瘤之一。中国是世界上食管癌高发国家,也是世界上食管癌高死亡率的国家之一,年平均死亡率为1.3~90.9/10万。食管癌的确切病因目前尚不清楚。其发生与长期食用过热食物、烟酒、化学因素、生物因素、缺乏某些微量元素和维生素以及遗传因素等有关。食管癌的各种组织学类型中90%以上为鳞状细胞癌,其次为腺癌,其他少见组织学类型如腺棘细胞癌、黏液表皮样癌、腺样囊性癌、
近年来,以表皮生长因子受体(EGFR)为靶点的酪氨酸激酶抑制剂(TKI)分子靶向治疗,给用于非小细胞肺癌(NSCLC)患者带来了新希望和新选择的治疗,其对NSCLC敏感人群的近期疗效令人非常满意,但与其他抗肿瘤药一样存在TKI也面临着部分患者对治疗不敏感或最终产生耐药的情况。本文对TKI耐药发生的机制和耐药后应对策略的相关研究进行了综述。
目的探讨Akt1信号通路在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RT-PCR和Western

无 blot技术分别检测60例胃癌组织及25例正常胃组织中Akt1 mRNA及蛋白的表达情况。结果 Akt1 mRNA和蛋白在胃癌组织中的相对表达量均显著高于正常胃组织(P0.