应用实时荧光定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测SERPPINE2mRNA在胃癌组织及对应正常胃黏膜组织中的表达情况； 2.为验证其生物学功能,对胃癌细胞SGC7901进行siRNA转染,其转染效率用蛋白质免疫印迹方法(western blot)进行验证。应用细胞增殖实验、软琼脂克隆集成实验、细胞迁移和浸润实验,分别测定SERPINE2对胃癌细胞SGC7901增殖、迁移和浸润能力的影响。 Osimertinib研究购买 3.应用χ2检验或Fisher精确概率法检验SERPINE2mRNA表达与胃癌各临床各病理参数之间的关系；应用Kaplan-Meier法、log-rank分析进行假设检验生存分析,COX比例风险模型用于风险因素的单变量、多变量统计分析方法分析SERPINE2mRNA的表达对胃癌手术患者预后的影响。 结果： 1.Real-time PCR:SERPINE2mRNA在癌旁组织,癌组织以及合并有淋巴结转移的胃癌组织中表达逐步上调。SERPINE2mRNA在胃癌组织、胃癌细胞SGC7901中表达较其在正常组织中的表达分别上调5.09倍、4.18倍,差异具有统计学意义(P=0.0089,0.0015)。与正常组织相比,SERPINE2mRNA在合并有淋巴结转移的胃癌组织中表达上调6.79倍,差异具有统计学意义(P=0.004)。而SERPINE2mRNA在无淋巴结转移的胃癌组织中的表达较其在正常组织中的表达上调2.24倍,差异无统计学意义(P=0.0682)。此外,值得我们注意的是,SERPINE2mRNA在合并有淋巴结转移的胃癌组织中的表达较其在无淋巴结转移的胃癌组织中的表达上调3.02倍,差异具有统计学意义(P=0.023)。

2.SERPINE2mRNA表达水平与胃癌临床参数之间的关系：我们规定SERPINE2mRNA表达上调超过1.25倍认为其在该样本中呈现高表达,反之则为低表达。数据显示,有157例样本呈现高表达(157/243,64.4%),86例样本呈现低表达(86/243,35.6%)。应用Fisher’s精确检验方法分析SERPINE2mRNA表达水平与胃癌各临床病理参数之间的关系,结果显示SERPINE2mRNA高表达与胃癌淋巴结转移(P=0.01)、远处转移(P=0.018)以及UICC分期(P=0.001)显著相关,而与年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤位置、分化程度Lauren分型无显著相关(表1)。

而且 3.SERPINE2mRNA表达水平与胃癌患者预后之间的关系：应用Kaplan-Meier方法绘制胃癌患者的生存曲线,结果显示SERPINE2mRNA表达水平升高的胃癌患者的总体生存时间和无瘤生存时间均显著低于SERPINE2mRNA表达降低的胃癌患者的总体生存时间和无瘤生存时间,差异具有统计学意义(P0.05)。 5.SERPINE2对胃癌细胞SGC7901迁移和浸润的影响：应用侵袭小室实验检测SERPINE2转染后对胃癌细胞SGC7901迁移与侵袭能力的影响。在肿瘤迁移与侵袭实验中,我们发现SERPINE2转染组的肿瘤细胞计数均显著低于对照组中的肿瘤细胞计数,差异具有统计学意义(P=0.0158,0.008)。此外,我们还应用软琼脂集落形成实验测定SERPINE2转染后是否对肿瘤细胞的集落形成能力有影响,实验结果显示SERPINE2转染后的胃癌细胞SGC7901的集落形成能力显著低于对照组的集落形成能力,差异具有统计学意义(P=0.001)。

结论： SERPINE2在胃癌组织中呈现过表达,且与胃癌多个临床病理参数及胃癌手术患者的预后显著相关,提示SERPINE2可能在胃癌发生-发展过程中发挥重要作用,可能是一个新型的胃癌分子标记物。SERPINE2具有促进胃癌细胞SGC7901迁移与浸润以及锚定非依赖生长的作用,提示SERPINE2还可能是一个新型的胃癌治疗靶点,为新型化疗药物的研制提供帮助。 意义： 1.研究了SERPINE2在胃癌组织中的表达,及其与胃癌多个临床病理参数及胃癌手术患者的预后的相关性； 2.研究了SERPINE2在胃癌细胞SGC7901迁移与浸润中的表达,及其相关性； 3.为SERPINE2作为是一个新型的胃癌治疗靶点,为新型化疗药物的研制提供帮助。
研究背景与目的 乳腺癌的发病率在发达国家女性恶性肿瘤中居于第一位。每年全球乳腺癌发病率的上升幅度达0.2-8%,约有140万新发患者。流行病学数据显示,我国女性的乳腺癌发病率和死亡率也在逐年增多,现已成为城市女性发病率最高的恶性肿瘤,并且年轻患者越来越多,而年龄是乳腺癌的预后因素之一,绝经期尤其是
背景 一般 肺癌是全球发病率和致死率皆位居首位的恶性肿瘤。近年来,分子靶向治疗已经成为晚期肺癌患者的一线治疗方案。由于多数患者就诊时已处于晚期,不能获得手术标本,因此患者的临床资料与病理特征等将为评估患者靶向基因突变状态提供依据。 目的 探讨表皮生长因子(epidermal growth factor receptor, EGFR)基因突变患者的临床、病理学特征。 方法 共入组2010年6月至2013年7月就诊于浙江大学医学院附属第一医院(本中心)677名非小细胞肺癌(]non-small cell lung cancer, NSCLC)患者,EGFR基因突变状态通过焦磷酸测序法检测。通过突变状态与临床病理资料对比分析,探讨与EGFR基因突变状态相关的一些因素。数据分析采用SPSS19.0软件包进行,统计结果以P<0.

1μg/ml,0.5μg/ml,1μg/ml,5μg/ml,10μg/ml浓度的LPS作用于小鼠BMMSC48小时。用zymosan, LPS (1μg/ml)分别刺激小鼠BMMSC 48小时。用zymosan, Poly(I:C), LPS (1μg/ml)分别刺激人BMMSC48小时。用封闭实验验证TLRs受体的作用,分别使用TLR2,和TLR4的封闭抗体anti-TLR2和anti-TLR4以2μg/ml的浓度37-C分别作用30分钟,接着分别用TLR2和TLR4的激动剂分别刺激48小时后检测BAFF的表达。用三种TLR4通路的抑制剂PDTC (Pyrrolidinedithiocarbamic acid, NF-κB通路抑制剂),SP600125(JNK通路抑制剂),SB203580(p38 因为 MAPK通路抑制剂),以1μM的浓度37-C分别作用30分钟,接着用LPS作用(1μg/ml)刺激48小时,用real time PCR和western blot检测上述几组细胞的BAFF的表达。用免疫荧光法观察NF-κB通路激活后该蛋白的核转位现象。结果BAFF的表达并不完全是剂量依赖性增高,当LPS的作用浓度为1μg/ml时小鼠BMMSC的BAFF表达最高。小鼠BMMSC的TLR4激活后,BAFF表达上升2-3倍(p0.05)。人BMMSC的TLR4激活后,BAFF表达上升2-3倍(p<0.05),而TLR3和TLR2激动剂作用后只有微量上升,且没有统计学意义。TLR4封闭后BAFF下降了53.2±12.2%(p
单层内皮细胞(endothelial

cells, ECs)构成了血管内皮,ECs排列紧密,在血管内形成了一个光滑腔面,为血液流动创造了良好的动力学环境。血管内皮是一种半选择性通透屏障,其功能是调控血液与周围组织进行物质交换,也是维持血管稳定性的关键结构。炎症、动脉粥样硬化等疾病的主要特征之一正是血管内皮屏障功能障碍。作为维持循环稳态和多种器官正常生理功能的基础,血管内皮通透性的精确调节有重要意义,通透性的增加经常性作为检测血管内皮屏障功能的重要指标。多种刺激都可引起血管内皮通透性升高,许多致炎、成血栓性介质均能对血管内皮屏障功能造成损伤,引发血管内皮通透性增高,血浆蛋白渗出,导致组织缺氧、器官水肿和功能障碍。其中炎症早期释放的肿瘤坏死因子a(Tumor RGFP966 necrosis factor, TNF-a)是引起血管内皮通透性增加的一个重要的细胞因子,对炎症的发生发展起着十分重要的作用。内皮的屏障功能维持主要与细胞骨架收缩产生的向心力和细胞间连接的黏附力两者之间的动态平衡有关。谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-Transferases, GSTs)是体内代谢异源物质的一种同工酶超家族,包括α、μ、π等7种亚型,其中GSTpi (GSTπ)是哺乳动物中含量最为丰富的一种亚型,不仅可以参与细胞内活性氧(Reactive Oxygen

Species, ROS)的清除,还可通过配基结合,影响胞内一系列信号分子的活性。有研究发现,GSTpi作为抗炎因子参与调节了脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和TNF-α引起的炎症反应,并发现了GSTpi在细胞内丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases, MAPKs)通路中有重要的作用。但是,GSTpi在炎症诱导的血管内皮功能障碍方面的作用尚无相关报道。本研究的目的在于探讨GSTpi是否能通过作用于细胞内相关信号分子,减少内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)的内吞,阻断细胞骨架的重塑,从而抑制炎症反应引起的血管内皮通透性的升高。本实验采用Trans

well法检测GSTpi对TNF-a诱导的血管内皮通透性增加的影响；激光扫描共聚焦技术进一步检测GSTpi对TNF-a诱导的ECs骨架重塑(Actin的重构)和膜表面VE-cadheri n重分布的作用；蛋白免疫印迹检测GSTpi对膜表面VE-cadherin内吞的作用和对p38MAPK磷酸化水平的影响。研究结果显示,GSTpi通过减少ECs骨架重塑(Actin的重构)和膜表面VE-cadherin内吞,抑制TNF-a诱导的血管内皮通透性的增加；抑制GSTpi的酶活,促进了TNF-a诱导的血管内皮通透性的增加；GSTpi可通过显著降低细胞内p38MAPK的磷酸化水平而抑制膜表面VE-cadherin内吞和血管内皮通透性的增加。本研究证实GSTpi能显著抑制TNF-a诱导血管内皮通透性的增加,这与GSTpi调控p38MAPK的磷酸化水平有关。GSTpi通过调控p38MAPK的磷酸化水平,调节TNF-α诱导的肌动蛋白细胞骨架(Actin)重构和VE-cadherin的内吞,从而抑制TNF-α诱导的血管内皮通透性的增加。综上所述,GSTpi在抵抗炎症引起的血管内皮屏障功能障碍中发挥着重要作用。
目的：研究美洲大蠊提取物对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)MAPK信号通路中P38、P-P38、ERK1/2、P-ERK1/2、JNK和P-JNK重要信号蛋白分子表达的影响,并探讨阻断P38、ERK1/2、JNK信号通路后对HSC-T6细胞增殖的影响,旨在从信号通路的角度对美洲大蠊物提取物抗肝纤维化的相关分子机制进行阐述。方法：1、体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6),用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度(0.5 很少 mg/mL、lmg/mL、2mg/mL、4 mg/mL、6mg/mL、8 mg/mL、10mg/mL 16mg/mL)的美洲大蠊提取物对HSC-T6细胞作用24h时的增殖情况,研究美洲大蠊提取物对HSC-T6细胞增殖的影响。2、将培养的对数生长期大鼠肝星状细胞(HSC-T6)分为5组：空白对照组；浓度分别为2mg/mL、4mg/mL、6mg/mL、8mg/mL的美洲大蠊提取物实验组；HSC-T6经美洲大蠊提取物作用30分钟后,裂解细胞提取总蛋白,用Western Blot方法检测MAPK信号通路中P38、p-P38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK重要信号蛋白分子表达量的情况。3、体外培养大鼠肝星状细胞(HSC-T6),分别用不同浓度的P38通路特异性阻断剂SB203580 (O.luM,0.5uM,2.5uM)、ERK1/2通路特异性阻断剂PD98059(0.4uM,2uM, 10uM)、JNK通路特异性阻断剂SP600125(0.008uM, 0.04uM,0.2uM)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)进行干预,并设空白对照组,于培养24小时后,用MTT法检测细胞增殖情况,以了解阻断P38、ERK1/2、JNK通路后对HSC-T6细胞增殖的影响。结果：1、MTT法检测结果显示：各浓度的美洲大蠊提取物干预HSC-T6细胞,各实验组HSC-T6细胞的增殖率均低于对照组,差异有统计学意义(P0.

质粒鉴定结果显示在100bp左右扩增出一明亮条带,与理论碱基对吻合,质粒鉴定正确。免疫细胞化学鉴定提示KIM-1表达定位于细胞膜,PCR及Western-Blot提示转染的HK2细胞高表达KIM-1。 2. pcDNA-hKIM-1-HK2细胞具有明显的抗缺氧损伤作用,细胞增殖活力高于对照组,细胞凋亡数量及流式细胞仪检测的缺氧早、中、晚期凋亡指数明显低于对照组(p
第一部分fractalkine对BV-2小胶质细胞胞内钙离子浓度及其胞内效应的影响 目的探讨fractalkine诱导BV-2小胶质细胞胞内钙离子浓度变化的机制及其产生的胞内效应。方法不同浓度fractalkine刺激BV-2小胶质细胞,激光共聚焦显微镜测定[Ca~(2+)]i的变化;10nM

fractalkine孵育BV-2小胶质细胞0、30、60、120、240min,westernblot测定p38MAPK、p-p38MAPK的表达;10nM fractalkine孵育BV-2小胶质细胞0、6、12、24h,RT-PCR及Elisa检测白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因水平及蛋白水平的表达。预先60s给予fractalkine的受体的拮抗剂anti-CX3CR1和IP_3R的拮抗剂2-APB再给予fractalkine,激光共聚焦显微镜测定[Ca~(2+)]i的变化;Westernblot测定p38MAPK、p-p38MAPK的表达;预先60s给予fractalkine的受体的拮抗剂anti-CX3CR1、IP_3R的拮抗剂2-APB和p38MAPK的抑制剂再给予fractalkine,Elisa检测白介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果fractalkine引起BV-2细胞[Ca~(2+)]i增加,p-p38MAPK及其IL-1β、TNF-α表达增加(P<0.05)。结论fractalkine可以通过促发小胶质细胞IP_3钙信号,激活p38MAPK,引起IL-1β和TNF-α蛋白表达,导致热痛觉过敏。
研究背景和目的: SKI-606分子量 骨是由细胞、细胞外基质和无机物组成的特殊结缔组织,是人体承担力学载荷的主要器官,并通过骨组织细胞进行骨塑建和重建。骨重建不仅受到遗传、激素、新陈代谢、年龄等生物学因素的影响,而且还依赖于其所处的力学环境。由Wolff定律可知,力学载荷缺失导致骨量减少,而适度的力学刺激能够促进骨形成。成骨细胞来源于间充质干细胞,是骨生长、重建和修复的关键细胞。成骨细胞以及它的前体细胞对周围生物力学环境的变化非常敏感,可以将感受到的力学信号转变为生物学信号进而调节骨内环境稳定。体内骨组织所处的力学环境非常复杂,附着于骨基质上的成骨细胞会受到多种生物学因素的干扰,因此,体内实验很难准确反映力学刺激对成骨细胞的影响。对体外培养的成骨细胞进行离体力学加载实验可以有效排除体内实验中各种因素的干扰。此外,还可以设计力的加载方式、大小、频率以及作用时间等力学参数准确检测力学刺激对成骨细胞的影响。成骨细胞是骨对力学信号进行响应的效应细胞,但力学刺激对成骨细胞的影响以及成骨细胞的力学信号响应机制仍不明确。本研究拟通过四点弯曲力学加载装置对培养的成骨细胞系MC3T3-E1细胞进行不同强度和不同时间的力学拉伸,研究力学信号对成骨细胞增殖、凋亡、分化和矿化的影响,并深入探讨成骨细胞的力学信号响应机制,为进一步研究力学条件下骨发生、重建的生物学机制提供理论依据。

所以 研究方法: 1.应用四点弯曲力学加载装置对小鼠成骨细胞系MC3T3-E1细胞施加频率为0.5 HZ,不同强度(500με、1000με、2000με、3000με、5000με)的力学拉伸应变,力学拉伸结束后采用MTT实验检测细胞增殖情况、DNA ladder和流式细胞术检测细胞凋亡情况、RT-PCR和Western S3I-201半抑制浓度 Blot检测细胞分化标志基因表达情况、Von Kossa染色检测细胞矿化情况。 2.给MC3T3-E1细胞施加强度为2000με,频率为0.5 HZ不同时间(2h、4h、8h、12h、24h)的力学拉伸应变,拉伸结束后对成骨细胞的增殖、凋亡、分化和矿化情况进行检测。 3.采用RT-PCR和Western Blot方法检测力学拉伸应变对BMPs/Smad信号通路中各个分子表达的影响;采用ELISA方法检测力学拉伸后成骨细胞培养基中BMP-2和BMP-4的含量;采用Western Blot方法检测力学拉伸应变对Smad蛋白的活化以及p-Smad向细胞核转移的影响。 4.力学拉伸前2h以Noggin预处理MC3T3-E1细胞,然后进行8h的力学拉伸,检测阻断BMPs通路对力学拉伸过程中Smad蛋白的活化以及成骨细胞分化标志基因表达的影响;力学拉伸前转染Smad4 siRNA抑制Smad4的表达,然后进行8h的力学拉伸,检测力学拉伸后p-Smad的细胞核转移情况以及成 骨细胞分化标志基因的表达情况。5.采用Western Blot方法检测力学拉伸后p38MAPK和NF-κB通路的活化情况;力学拉伸前以PDTC预处理MC3T3-E1细胞,检测阻断NF-κB通路对力学拉伸过程中BMPs表达的影响;力学拉伸前以Noggin预处理MC3T3-E1细胞,检测力学拉伸过程中p38MAPK的激活与BMPs信号的关系;力学拉伸前以SB203580预处理MC3T3-E1细胞,检测阻断p38MAPK通路对力学拉伸过程中NF-κB通路的激活、BMPs的表达以及成骨细胞分化标志基因表达的影响。

6.采用RT-PCR和Western Blot方法检测力学拉伸应变对Smurf1、Smurf2和CKIP-1表达的影响。 7.力学拉伸前转染Smurf1 siRNA,然后进行8h的力学拉伸,检测抑制Smurf1的表达对力学拉伸过程中Smad、p-Smad以及成骨细胞分化相关基因表达的影响;力学拉伸前以MG132预处理MC3T3-E1细胞,检测抑制蛋白酶体活性对力学拉伸过程中Smad和p-Smad的含量以及成骨细胞分化相关基因表达的影响。 实验结果: 1. 1000με、2000με和3000με的力学拉伸强度能促进成骨细胞分化标志基因的表达,其中2000με的作用最明显,但各个力学拉伸强度均未影响成骨细胞的增殖、凋亡和矿化。 2. 2000με应变强度下,不同时间的力学拉伸对成骨细胞增殖、凋亡和矿化没有明显作用。力学拉伸过程中成骨细胞分化标志基因表达的上调有一定的时间依赖性:ALP的表达在力学拉伸4h时开始显著升高,8h时表达最强,24h后恢复正常水平;OCN的表达在力学拉伸8h时开始显著升高,并持续高表达至24h;而Col I的表达在力学拉伸4h时开始显著上调,24h时表达水平仍高于对照组。 3.力学拉伸应变能够促进BMP-2和BMP-4的表达和分泌。BMPRⅠ、Smad1和Smad5 mRNA表达水平没有明显变化,但它们的蛋白水平在力学拉伸后升高。Smad1和Smad5在力学拉伸过程中被激活,且激活的Smad(p-Smad)在细胞核内的含量升高。 4.

Sm. (TFDF) on osteoblasts (OB)

differentiation and the expression of p38 MAPK and BMP-2/Smads signaling in osteoblasts after treatment by Advanced Glycation End Products (AGEs), so as to explore the action mechanism for preventing and curing osteoporosis of TFDF. [Method] Primary osteoblasts of newborn Sprague-daweley rats were extracted and cultured by the double enzyme digestion method, and its biological characteristics were observed. pNPP, ELISA and Alizarin dyeing were respectively used to test ALP, Type I collagen (Col I), osteocalcin (BGP), BMP-2, and mineralization of osteoblasts after treatment by different concentration of AGEs and after treatment by different concentration of TFDF and AGEs (400 mg/L). Western-blot was

used to detect p38 and 还有 Smad1/5/8 protein phosphorylation after treatment by TFDF and AGEs (400 mg/L). [Result] The levels of ALP, Type I collagen, osteocalcin and mineralization in osteoblasts treated by different concentrations of AGEs (200, 400 and 800 mg/L) were lower than those in the control group. TFDF could increase ALP, Type I collagen, osteocalcin, BMP-2 and mineralization of osteoblasts in a dose-dependent manner after treatment by AGEs (400 mg/L). TFDF (50 mg/L) can increase protein phosphorylation of p38 and Smad1/5/8 in osteoblasts after treatment by AGEs (400 selleck chemical mg/L). [Conclusion] AGEs can decrease 什么 differentiation and mineralization of osteoblasts. TFDF can increase differentiation and mineralization of osteoblasts in a dose-dependent manner after treatment by AGEs, which may be related to p38 and BMP-2/Smads signaling.
本试验旨在研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路抑制剂对断奶仔猪小肠形态和肠通透性的影响。选用体重约为5.8

kg的24头21日龄杜×长×大断奶仔猪,随机分成4组,每组6头。试验组断奶前30 min分别腹腔注射p38 MAPK抑制剂(SB203580,Ⅰ组)、c-Jun N末端激酶(JNK)抑制剂(SP600125,Ⅱ组)和胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)抑制剂(PD98059,Ⅲ组),对照组注射等量的生理盐水。于断奶后36 h屠宰仔猪取样待测。结果表明:Ⅰ组空肠绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度均显著高于对照组(P<0.05),隐窝深度显著低于对照组(P<0.05);与对照组相比,Ⅰ组和Ⅱ组仔猪血浆D-乳酸、二胺氧化酶含量显著降低(P<0.05),而Ⅲ组仔猪血浆D-乳酸含量显著高于对照组(P<0.05);Ⅰ组空肠黏膜促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和干扰素γ(IFN-γ)水平显著低于对照组(P<0.05),与对照组相比,Ⅱ组TNF-α和IL-1β水平显著降低(P<0.05),而Ⅲ组TNF-α水平显著高于对照组(P0.05)。结果提示,在断奶应激致仔猪小肠黏膜屏障受损过程中,抑制p38 MAPK和JNK通路后,肠屏障得到改善,而抑制ERK1/2通路后肠屏障损伤有加重的趋势。
白细胞介素简称白介素,是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的细胞因子,它在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。近期研究发现[1],IL-23/IL-17轴在炎症性疾病的发病机制中可能处于关键地位,并有望成为新的治疗靶标。IL-23
目的探讨我国汉族人群p38βMAPK基因多态性对mRNA表达的影响。方法纳入正常人群98名,经测序分析rs2072878位点AA基因型82名,AG基因型16名。分别选取AA与AG基因型组各14名,提取外周血单核细胞(PBMC),提取RNA与蛋白。p38βMAPK mRNA的测定采用实时荧光定量PCR,p38 MAPK总蛋白表达的检测采用SDS-PAGE电泳-蛋白免疫印迹法。结果 p38βMAPK rs2072878的AA基因型人群mRNA表达水平显著低于AG基因型人群[(0.485±1.143)vs(2.250±2.719),P=0.034]。p38MAPK蛋白表达水平AA基因型组与AG基因型组差异无统计学意义[(1.347±0.309)vs(1.007±0.500),P=0.

95%、71.74%、80.88%，变异系数分别为2.15%、4.33%、6.50%；肺的绝对回收率分别是71.55%、66.02%、93.77%，变异系数分别为11.96%、7.21%、5.82%；肾脏的绝对回收率分别是68.65%、72.52%、68.63%，变异系数分别为7.70%、6.74%、10.01%；脑的绝对回收率分别是55.11%、74.47%、93.70%，变异系数分别为7.62%、3.42%、3.11%。SU2162在血、心、肝、脾、肺、肾、脑的绝对回收率均大于50%，变异系数均小于15%，SU2162在血、心、肝、脾、肺、肾、脑的绝对回收率均符合要求[71]。SU2162高、低浓度氮气吹干的生物样品-20℃放置4天的稳定性分别为98.25%、104.66%；SU2162高、低浓度乙腈复溶后的样品-20℃反复冻融5次(每次间隔24h)的稳定性分别为104.79%、101.48%。该方法简单、灵敏、稳定，适用于SU2162的体内药物分析。 确认细节 本课题对SU2162在大鼠体内的药动学进行研究。静脉注射给予大鼠单剂量的SU2162，高效液相色谱法测定SU2162的血药浓度，应用3P97和kinetica药动学软件对测得的数据进行房室模型拟合。结果表明SU2162在大鼠体内符合以1/c2为权重系数的二室模型。

3P97药动学软件计算得到的房室模型药动学参数如下：分布相混合参数A为6.7873mg/L，消除相混合参数B为2.5753mg/L，分布相混合一级速率常数α为6.50331/h，消除相混合一级速率常数β为0.60781/h，血药浓度与时间关系方程为C=6.7873×e~(-6.5033t)+2.5753×e~(-0.60781t)。表观分布体积Vc为0.5874L/kg，分布半衰期T1/2α为0.1066h，消除相半衰期T1/2β为1.1404h，中央室向周边室转运的速率常数K12为3.1087h-1，从周边室向中央室转运的速率常数K21为2.2294h-1，总消除速率常数K10为1.7729h-1，血药浓度时间曲线下面积AUC为5.2808(mg/L)*h，清除率CL为0.3115L/h。 Kinetica药动学软件计算得到的房室模型药动学参数如下：达峰时间为0h,最大血药浓度为9.3621mg/l，分布相混合参数A为6.7875mg/L，消除相混合参数B为2.5747mg/L，分布相混合一级速率常数α为6.50191/h，消除相混合一级速率常数β为0.60761/h，中央室向周边室转运的速率常数K12为3.1082h-1，从周边室向中央室转运的速率常数K21为2.2286h-1，总消除速率常数K10为1.7728h-1，分布半衰期T1/2α为0.1066h，消除相半衰期T1/2β为1.1404，总消除半衰期T1/2kel为0.3910h，表观分布体积Vc为0.5874L/kg，稳态表观分布体积Vss为1.4066L/kg，血药浓度时间曲线下面积AUC为5.2808(mg/L)*h，清除率CL为0.3115L/h。3P97和Kinetica药动学软件计算得到的药动学参数相似，没有显著性差异。

Kinetica药动学软件计算得到的非房室模型药动学参数如下：最大血药浓度Cmax为7.8157mg/l，达峰时间Tmax为0.05h，血药浓度时间曲线下面积AUC为5.0774(mg/l)*h，末端相的血药浓度消除速率常数Lz为0.74981/h，半衰期T1/2为0.9244h，平均驻留时间MRT为1.1961h，清除率CL为0.3240L/h，稳态表观分布体积Vss为1.2957L/kg，末端相表观分布体积Vz为1.4447L/kg。 http://www.selleckchem.cn/products/sch-900776.html 本课题对SU2162在大鼠体内的组织分布进行研究。给大鼠单剂量静脉注射SU2162后，应用高效液相色谱法测定SU2162在各组织中的浓度，根据不同时间药物分布的特点，以及非房室模型处理的结果，探讨SU2162在大鼠体内的组织分布情况。 非房室模型处理的结果显示脾脏的AUC值最高，为6.7685(mg/l)*h，其次是肝和肾，分别为2.6847(mg/l)*h和2.5829(mg/l)*h。肝的末端相的血药浓度消除速率常数(Lz)最大为1.57291/h，消除最快；最慢的是脾脏，其次是肾脏。肝的消除半衰期最短，为0.4407h；半衰期最长的是脾脏，其次是肾脏。肝的平均驻留时间(MRT)最短，为0.6760h；最长的是脾脏，其次是肾脏。由此可知，SU2162进入脾脏的药量最多，在脾脏的消除速度最慢。加之，0.03h至0.83h时，药物在脾脏的浓度迅速减少；0.83h至1.33h时，脾脏中的药物浓度迅速增加。这些结果显示SU2162会在脾脏中蓄积。SU2162进入肝脏的量次多，在肝脏中的消除半衰期为0.4407h，反映SU2162在肝脏中的代谢最快，说明其在肝脏有靶向作用，证明了我国中医学长期用斑蝥治疗肝癌是有科学依据的。SU2162进入肾脏的量与肝脏相当，但是在肾脏的消除速度是除脾脏外最慢的。肝的稳态表观分布体积和末端相表观分布体积均最小，显示了SU2162在肝中分布最多。
背景：肺癌是严重人类健康和生命的恶性肿瘤,发现多为晚期,预后差。中西医结合治疗肺癌如何进一步改善临床症状,减轻放化疗副作用,提高生存质量等方面仍值得深入研究。

目的：观察肺积复康方在改善非小细胞肺癌(NSCLC)中医证候、生活质量及减轻化疗毒副反应等方面的作用,为NSCLC的中西医结合临床诊治探索新的方法。 方法：采用肺积复康方联合GP方案治疗NSCLC患者20例,设对照组,疗程两个周期,观察治疗前后患者中医证候、生活质量及毒副反应等的变化。 AUY-922半抑制浓度 结果：两组治疗后中医证候积分均有明显改善(P<0.05),但治疗组治疗后改善更为明显(P<0.05),两组中医证候积分总有效率分别为80%和50%,治疗组有显著优势(P<0.05)。治疗组治疗后生活质量评分提高1.70,对照组为-0.50,两组治疗前后相对基线变化比较有非常显著差异(P<0.01)。治疗组治疗后Karnofsky评分提高7.87,对照组提高1.17,两组治疗前后相对基线变化比较有显著差异(P<0.05)。两组毒副反应比较,治疗组白细胞、红细胞减少和恶心呕吐发生率较对照组轻(P0.05)。 结论：肺积复康方联合GP方案治疗NSCLC患者具有改善中医证候、提高生活质量及减轻化疗毒副反应的作用。
In this study, a nonlinear quantitative structure–activity relationship model for the prediction of the IC_(50) of 6-alkenylamides of 4-anilinothieno [2, 3-d] pyrimidine as epidermal growth factor receptor(EGFR) inhibitors was developed by the Gene Expression Programming(GEP). This model is based on…

012)。 结论：miR-34b影响肿瘤细胞的凋亡、增殖、转移,在肿瘤发展过程中发挥抑制肿瘤的作用；HGF-Met信号通路中p53磷酸化并增强转录活性,上调miR-34b,反馈抑制c-Met。由于p53信号通路参与细胞周期抑制与细胞凋亡,并于其中发挥重要作用,因此miR-34基因可能受到抑癌基因p53的调节,而p53可以通过miR34调节一系列的下游蛋白。另外,miR-34又可以反向作用于p53的mRNA,从而避免p53的连续激活。
背景

目前,肺癌的发病率仍呈逐渐升高的趋势,其死亡率居恶性肿瘤的首位。非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的85%,其中约70%的患者确诊时已属晚期,化疗是主要的治疗手段,标准的化疗方案为含铂类的两联方案。其有效率仅为25%-35%左右,中位生存期为8-10个月,已经进入了瓶颈期。近几年来,分子靶向治疗成为了一个新的热点,对于某些特定类型的肺癌(如EGFR突变、EML4-ALK阳性)显示了较好的疗效,但这些药物迟早会发生耐药,如何克服耐药、寻找新的靶点以及研发新的药物,成为目前临床研究的热点。 目的 通过检测非小细胞肺癌(NSCLC)组织中表皮生长因子受体(EGFR)和肝细胞生长因子受体(c-Met)的表达水平,探讨EGFR和c-Met蛋白表达与组织学类型及临床分期的关系。 材料与方法 收集郑州大学第二附属医院2010年2月-2011年8月经手术后病理检查确诊的60例非小细胞肺癌患者肿瘤组织蜡块,应用免疫组化、抗体抗原杂交法检测其组织中EGFR、c-Met的蛋白表达水平。 采用SPSS17.0统计分析软件进行统计学处理,采用χ2检验(检验水准设定为a=0.05),分析EGFR、c-Met免疫组化结果与组织学类型及临床分期的关系。 结果 1.肺鳞癌组织中EGFR的蛋白表达阳性率为12%(3/25),肺腺癌组织中EGFR的蛋白表达阳性率为80%(28/35),鳞癌组织中EGFR蛋白表达阳性率显著低于腺癌,,两者之间的差异性显著(P<0.01),影响c-Met蛋白表达的因素为分化程度、肿瘤大小、组织学类型、淋巴结转移情况以及TNM分期(P0.005)。 一般 结论 1.肺腺癌组织中EGFR和c-Met蛋白表达高于鳞癌 2.Ⅲ+Ⅳ期EGFR和c-Met蛋白表达高于Ⅰ+Ⅱ期 3. EGFR与c-Met双阳性表达越高可能肿瘤组织的恶性程度越高
目的：非小细胞肺癌(NSCLC)是当代世界常见恶性肿瘤之一，已居多数国家癌症死亡原因的首位。近些年来新的分子靶向药物表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKIs）的出现为NSCLC的治疗带来了曙光。吉非替尼是一种口服的有活性、选择性的EGFR-TKIs，目前已成为肺癌分子靶向治疗中较为成熟的药物。临床研究已表明，吉非替尼单药治疗各种类型NSCLC的总有效率仅为10%～20%，因此人们希望与其他药物联合应用以进一步提高抗肿瘤效应。康莱特注射液是一种中药制剂，由中药薏苡仁中提取出的薏苡仁油制成,研究表明其对多种肿瘤细胞均能有较强的杀伤及抑制作用。一些小样本临床研究发现，康莱特联合化疗能显著提高晚期NSCLC的治疗效果。目前已有许多研究证明PI3K/Akt信号通路在NSCLC的发生、发展中起重要作用。约有50%-70%的NSCLC中存在Akt的磷酸化即p-Akt，这表明PI3K/Akt信号通路的激活在NSCLC中很常见。c-Met蛋白是一种由原癌基因c-Met编码、具有酪氨酸激酶活性的生长因子受体,可与肝细胞生长因子(Hepatocyte

以及 Gefitinib Growth Factor,HGF)特异性结合,激活下游一系列信号转导通路,调控细胞的增殖、活力、迁移、血管形成、侵袭以及形态发生等。c-Met信号的改变能促进肿瘤的发生和发展。有研究结果显示在NSCLC中非靶受体c-Met继发性过表达与吉非替尼的继发性耐药有关。本实验应用一系列实验方法，通过检测药物处理后的人肺腺癌A549细胞株中细胞凋亡率、p-Akt及c-Met的mRNA及蛋白等的表达来探索吉非替尼联合康莱特对A549细胞株的作用及其机制。

方法： 1体外培养肺腺癌A549细胞，选取对数生长期细胞进行实验。实验分为空白对照组，吉非替尼组，康莱特组，吉非替尼联合康莱特组；吉非替尼组设置浓度梯度为：0.1、0.5、1、5、10、20、40μmol L，作用时间：24h、48h、72h；康莱特设置浓度梯度为：5、10、20、40、80、100、160μl ml,作用时间：24h、48h、72h；联合用药组：根据康莱特抑制率求IC50，吉非替尼选择本实验中最高作用浓度；应用四甲基偶氮唑蓝（tetrzolium-based colorimetric assay，MTT）法分别测定各药物不同浓度、不同作用时间的抑制率。 2根据MTT结果，康莱特IC50=80μl ml，故联合用药组康莱特取80μl ml，吉非替尼选择本实验中最高作用浓度40μmol L，共同处理48h后，应用流式细胞学检测各处理组中对细胞生长的抑制情况。 3选取对数生长期细胞置入六孔板培养，组别设置同上。倒置显微镜下观察细胞形态学变化。采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（streptavidin-perosidase，SP）染色法检测各组药物处理后细胞内p-Akt、c-Met蛋白含量的变化。 4取对数生长期细胞，组别设置同上。药物作用48h后提取RNA，检测总RNA的量、纯度及完整性，通过逆转录-聚合酶链反应（reversetranscription PCR，RT-PCR）半定量检测药物处理后细胞内c-Met mRNA的表达水平。 5实验数据经SPSS18.0统计处理,采用正态性检验,以P0.

165,P=0.001;t=3.747,P=0.02)。结论 GSK-3的酪氨酸和丝氨酸磷酸化可能参与心肌细胞I/R损伤,姜黄素减少I/R心肌细胞凋亡可能与其通过减少酪氨酸磷酸化、增加丝氨酸磷酸化抑制GSK-3活性有关。
锂剂是Mg2+的竞争性抑制剂,具有抗躁狂、抗抑郁、抗自杀的临床效果。锂剂有众多的直接目标分子,其中,锂剂通过抑制糖原合成酶激酶-3(GSK-3)发挥稳定情绪、改善行为、促进神经生长等作用。已有多项研究报道GSK-3参与神经变性性疾病、脑血管性疾病、神经系统肿瘤等疾病的发生,本文就GSK-3、锂剂和神经精神性疾病作一综述。
LPS刺激巨噬细胞产生IFN-β在抵御外来病原微生物的免疫反应中发挥重要作用。本研究探讨新抗生素S632A3促进LPS诱导巨噬细胞产生IFN-β及其分子机制。采用实时定量PCR检测mRNA含量,ELISA检测细胞因子含量,激酶分析检测GSK-3β活性,Western

BVD-523体外 blotting检测蛋白磷酸化水平。结果表明:S632A3可显著促进LPS诱导的巨噬细胞产生IFN-β,其分子机制是抑制细胞内GSK-3β活性,降低转录因子c-Jun苏氨酸239位点的磷酸化并增加c-Jun稳定性。结果提示,S632A3是一个新的抗炎先导化合物,通过抑制GSK-3β活性促进LPS诱导巨噬细胞产生IFN-β。
Irradiation from diverse sources is ubiquitous and closely associated with human activities. Radiation therapy (RT), an important component of multiple radiation

origins, is a common therapeutic modality for cancer. More importantly, RT provides significant contribution to oncotherapy by killing tumor cells. However, during the course of therapy, irradiation of normal 也许 tissues can result in a wide range of side effects, including self-limited acute toxicities, mild chronic symptoms, or severe organ dysfunction. Although

numerous promising radioprotective agents have emerged, only a few have successfully entered the market because of various limitations. At present, the widely accepted hypothesis for protection against radiation-caused 查找更多 injury involves the Wnt canonical pathway. Activating the Wnt/β-catenin signaling pathway may protect the salivary gland, oral mucosa, and gastrointestinal epithelium from radiation damage. The underlying mechanisms include inhibiting apoptosis and preserving normal tissue functions. However, aberrant Wnt signaling underlies a wide range of pathologies in humans, and its various components contribute to cancer. Moreover, studies have suggested that Wnt/ β-catenin signaling may lead to radioresistance of cancer stem cell. These facts markedly complicate any definition of the exact function of the Wnt pathway.
目的探讨Tau蛋白调控Fyn信号通路在阿尔茨海默病(AD)大鼠发病中的作用机制。方法雄性SD大鼠60只随机分为正常组,模型组及观察组。采用β淀粉样蛋白毒性片段(Aβ25～35)海马注射制备AD大鼠模型。10μmol/L SB216763(Tau蛋白抑制剂)注射至观察组大鼠脑组织。采用SABC法对大鼠脑组织中Tau蛋白进行免疫组化检测,Western印迹检测Fyn和Fak的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠脑组织Tau蛋白含量及Fyn和Fak的表达显著增加(P<0.

85%；8μM6r处理PC3细胞,处于S期的细胞数比例显著增加至22.79%,证明6r可阻滞肿瘤细胞周期于S期。Western blotting结果显示,6r对SW620细胞及肿瘤组织中GSTπ的表达无明显影响,8μM6r可显著增加抑制PC3细胞中EGFR/PI3K/Akt及Cyclin D1的表达水平。 体内实验结果：裸鼠移植瘤实验中,与阴性对照组比较,以8mg/kg剂量尾静脉注射给药3周后,6r对结肠癌SW620皮下移植瘤生长抑制率为44.17%；给药3周后,6r对前列腺癌PC3皮下移植瘤的生长抑制率为63.3%；给药4周后,对原位前列腺癌PC-3M细胞移植瘤抑制率为60.5%,且无明显副作用。动物实验结果证明6r具有较强的体内抗肿瘤活性。Western

bolotting结果显示,6r对SW620肿瘤组织中GSTπ的表达无明显影响。6r可显著增加裸鼠肿瘤组织中cleaved-caspase-3的表达水平,促进线粒体内细胞色素C的释放,增加Bax的表达而下调bcl-2的表达,使两者比例降低,抑制EGFR/PI3K/Akt蛋白的表达。 结论 化合物6r具有较强的体内外抗肿瘤活性,其可能的作用机制是通过靶向EGFR,抑制EGFR的表达及PI3K/Akt信号通路,通过bcl-2/Bax-Cyt-C-caspase-3线粒体介导的凋亡通路诱导肿瘤细胞凋亡。同时,6r通过下调周期蛋白Cyclin D1的表达,阻滞肿瘤细胞周期于S期,抑制肿瘤细胞的增殖。因此,6r有潜力成为抗癌的候选药物之一。
介绍了2014年第1季度面市或获批以及分别进入Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ期临床试验的最具前景的各5个代表性药物,旨在为新药研发工作者提供参考。
目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中抗表皮生长因子受体(EGFR)融合基因和棘皮动物微管查关蛋白样-4与间变性淋巴激酶融合基因(EML4-ALK)基因临床病理特征的相关性。方法应用即时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测NSCLC中EML4-ALK、EGFR,并对其临床病理特征进行相关性分析。结果 mTOR抑制剂 160例NSCLC中60例(37.5%)存在EGFR基因突变,腺癌高于非腺癌;不吸烟患者高于吸烟患者;女性患者高于男性患者;差异均有统计学意义(均0.05)。结论 NSCLC患者中,EGFR及EML4-ALK阳性患者在临床病理上有一些相同或相似的特征,即女性、非吸烟、腺癌患者中较为多见,但也有一些不同的特征:EML4-ALK阳性患者中,腺癌中多伴有黏液产生的腺泡样结构,不同时合并EGFR突变。
Cluster of differentiation 74(CD74) performs multiple roles in B cells,T

cells,and antigen-presenting cells within the immune system; it also participates in major histocompatibility complex class Ⅱ-restricted 因为 antigen presentation and inflammation. Recently,a role for CD74 in carcinogenesis has been described. CD74 promotes cell proliferation and motility and prevents cell death in a macrophage migration inhibitory

factordependent manner. Its roles as an accessory signal receptor on the cell surface and the ability to interact with other signaling molecules make CD74 an attractive therapeutic target for the treatment of cancer. This review focuses on the original role of CD74 in the immune system and its emerging tumor-related functions. First,the structure of CD74 will be summarized. Second,the current understandings about the expression,cellular localization,molecular mechanisms and signaling pathways of CD74 in immunity and cancerwill be reviewed. Third,the examples that suggest CD74 is a promising molecular therapeutic target are reviewed and discussed. Although the safety and efficacy of CD74-targeted strategies are under development,deeply understanding of the regulation of AZD2281体外 CD74 will hold promise for the use of CD74 as a therapeutic target and may develop the CD74-targeted therapeutic agents such as neutralized antibody and compounds.
脑是非小细胞肺癌常见的转移部位,手术和放疗是以往脑转移治疗的基石,但近年来随着对肿瘤发生发展机制的认识深化,靶向治疗在脑转移治疗中开始崭露头角。本文主要针对一些相关热点问题如脑转移治疗手段等(手术、放疗、化疗、靶向治疗)进行简要述评。
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Lung cancer, is the most common cause of cancer death in men and second only to breast cancer in women. Currently, the first line therapy of choice is platinumbased combination chemotherapy. A therapeutic plateau has been reached with the prognosis for patients with advanced non-small cell lung cancer(NSCLC) remaining poor.

0统计软件进行相关分析,多组间比较采用方差分析,两组之间的比较采用T检验,P0.05)。NiS能明显激活细胞P-JNK的表达(P0.05),阴性对照组细胞中P-ERK1表达值为0.210,NiS浓度分别为1、2、4.0μmol/L,染镍组细胞中P-ERK1表达值分别为0.216、0.219、0.226,FJD低、中、高剂量含药血清组和P-ERK1抑制剂对磷酸化P-ERK1的表达无明显影响(P>0.05)。4.NiS能明显激活NF-κB和NF-κB

很少 P65的表达(P
糖尿病是一种慢性、全身性、代谢性疾病,主要是由于体内胰岛素分泌绝对或相对不足引起,表现为血糖升高,伴以脂肪、蛋白质、水、电解质代谢紊乱。糖尿病发病机制复杂,能引发多种血管并发症。目前市场上的药物不能完全有效地达到治疗目的,且治疗费用昂贵,存在一定的副作用。研究人员试图寻找有效的天然产物以改善糖尿病症状,同时达到减少副作用,降低治疗费用的目的。 蜂胶是蜜蜂采集的一种树脂类混合物,其成分复杂,目前已知蜂胶所含成分超过300种,主要包括黄酮类、酚类、芳香族类、有机酸类、酯类、醛类、醇类、烯烃类、萜类和挥发性成分等。蜂胶具有免疫调节、抗氧化、抗炎、护肝、抗肿瘤、抑制病原微生物等多种生物学活性。我们先前的研究也证明蜂胶能有效降低糖尿病模型大鼠血糖,改善氧化应激。 蜂胶的生物学活性受植物来源、采集地点、采集蜂种和提取方法等多种因素影响,但是化学成分的差异是造成蜂胶活性变化的主要原因。巴西蜂胶(绿蜂胶)主要胶源植物是Baccharis dracunculifolia DC,其主要的活性成分是异戊二烯-对-香豆酸及其衍生物,而中国蜂胶(杨树型蜂胶)的主要活性成分为黄酮类化合物。巴西蜂胶和中国蜂胶成分的差异可能导致两种蜂胶对糖尿病症状的改善效果存在差异。

在本研究中,我们利用链脲霉素构建1型糖尿病(T1DM)大鼠模型,链脲霉素+高脂饲料构建2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,通过研究大鼠尿液、血液和肝肾生化指标及肝肾组织病理变化,比较中国蜂胶和巴西蜂胶改善糖尿病大鼠糖代谢、脂质代谢、蛋白质代谢、氧化应激和肝肾功能的效果。同时测定T2DM大鼠肾组织内促炎细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α及MCP-1 mRNA表达,测定PKCmRNA表达以及TGF-β1表达,测定大鼠肾脏血流动力学指标,探讨蜂胶改善糖尿病肾病可能的作用机理。实验结果如下： 1.蜂胶改善T1DM大鼠的效果 以拜糖平为阳性药(1mg/100g,每天两次),观察中国蜂胶和巴西蜂胶(设定高、低剂量组,分别为10mg/100g和5mg/100g,每天两次)改善T1DM模型大鼠的效果。正常组和模型组大鼠给予生理盐水(1mg/100g,每天两次)。实验持续8周。 1)体重和糖代谢：中国蜂胶和巴西蜂胶均能明显减缓T1DM大鼠体重下降以及血糖升高,呈现剂量效应。在相同剂量下,中国蜂胶效果略优于巴西蜂胶；中国蜂胶能显著降低T1DM大鼠血清HbAlc水平,呈现剂量效应,巴西蜂胶效果不明显；2)脂质代谢：与正常组大鼠相比,模型组大鼠血清TG和TC含量显著增加。高剂量中国蜂胶能明显降低T1DM大鼠血清TC水平；3)血液氧化应激：与正常组大鼠相比,模型组大鼠血清MDA、NO和NOS含量明显增加,而SOD和CAT含量明显下降。中国蜂胶和巴西蜂胶能改善T1DM大鼠氧化损伤。与模型组相比,高剂量中国蜂胶能显著降低大鼠血清MDA含量,低剂量中国蜂胶能有效提升血清SOD含量；巴西蜂胶能明显增加血清SOD含量,且低剂量巴西蜂胶能显著降低血清MDA含量。巴西蜂胶还能有效降低血清NOS含量；4)肝功能和氧化应激：与正常组相比,模型组大鼠血清ALT和AST含量显著增加,并出现氧化应激现象。中国蜂胶和巴西蜂胶能显著降低血清ALT和AST含量,而阳性药效果不显著。中国蜂胶显著提升肝脏GSH-px,但对肝脏MDA含量影响不显著,而巴西蜂胶能全面恢复肝脏各类抗氧化酶含量,抑制MDA产生。肝脏组织切片HE染色结果表明,与正常组大鼠相比,模型组大鼠肝脏病变程度并不严重,而各给药组大鼠肝组织形态基本维持正常；5)肾功能和氧化应激：与正常组相比,模型组大鼠BUN、尿液总蛋白、尿液白蛋白含量显著增加,而肾脏病理组织HE染色结果显示模型组大鼠肾脏肾小管上皮细胞空泡化,出现肾小管上皮管型,这表示糖尿病大鼠开始出现肾病症状。中国蜂胶和巴西蜂胶均能降低尿液中白蛋白含量,同时巴西蜂胶能抑制BUN和尿液总蛋白升高。观察蜂胶组大鼠肾脏组织切片发现,蜂胶能减少肾小管上皮细胞空泡化现象。对肾脏组织氧化应激水平检测发现,两种蜂胶均能有效提升肾脏CAT,抑制肾脏脂质过氧化并降低GSH-px含量。

Regorafenib体内 2.蜂胶改善T2DM大鼠的效果 也许 以卡司平为阳性药(1mg/100g,每天两次),观察中国蜂胶和巴西蜂胶(单剂量,5mg/100g大鼠体重,每天两次)改善T2DM模型大鼠的效果。正常组和模型组大鼠给予生理盐水(1mg/100g,每天两次)。实验维持8周。 1)体重：中国蜂胶和巴西蜂胶均能减缓T2DM大鼠体重下降,但效果不显著,中国蜂胶在实验第8周能明显抑制实验大鼠体重下降；2)糖代谢和胰岛素：巴西蜂胶能降低糖尿病大鼠血糖含量,但效果不明显；中国蜂胶在实验前4周能显著降低血糖含量,而在实验后4周则不能显著降低血糖含量：阳性药卡司平在第2周能显著降低血糖含量,但在第8周却促进血糖升高。尿糖检测结果发现,蜂胶和阳性药在整个实验周期能有效降低尿糖含量。从HbAlc分析发现,阳性药能降低糖尿病大鼠HbAlc含量,但效果不明显：A组大鼠(饲喂中国蜂胶)和B组大鼠(饲喂巴西蜂胶)HbAlc含量在第4周比模型组大鼠分别低8.6%和10.2%,效果显著；实验第8周A组大鼠(饲喂中国蜂胶)HbAlc含量比模型组大鼠低5.

05)。 2.HE染色观察缺血区脑细胞形态变化：假手术组细胞形态完整,结构清晰核膜完整,核仁清晰；模型组细胞间隙增宽,神经元数量减少,排列紊乱,核膜与周围分界不清,核仁固缩；电针组、阻滞剂组及电针+阻滞剂组神经组织损伤较模型组轻,细胞排列较整齐,结构较完整,胞体轻中度肿胀,存活神经元较多。 那个 3.TTC染色观察脑组织大体形态学改变：假手术组大鼠脑组织被染成均匀一致的红色,其余组大鼠造模后,脑组织出现大小不一的苍白色区域,差异具有统计学意义(P<0.01),随着时间的延长,梗死面积逐渐增加。与模型组比较,电针组、阻滞剂组、电针+阻滞剂组梗死面积不同程度的缩小,再灌注6h后,各组大鼠面积缩小具有统计学意义(p<0.05)。3d及1w时,阻滞剂组梗死面积较电针组、电针+阻滞剂组大(p<0.05),电针+阻滞剂组梗死面积较电针组小(p<0.01)。模型组大鼠阳性细胞数呈时间依赖性,1d时达高峰,3d减少最多,与模型组比较,电针组、阻滞剂组、电针+阻滞剂组凋亡指数均下降,多数组与模型组比较有较明显下降(p<0.05或p<0.01)。阻滞剂与电针刺激合用时,凋亡指数下降明显,与单独使用时比较,1d时间点差异具有统计学意义(p0.05)。

5.脑组织p-p38MAPK表达比较：与假手术组相比,其余四组大鼠脑组织酸化p38MAPK蛋白含量提高(p<0.05)。模型组磷酸化p38于再灌注后2h开始升高,1d显著升高,3d达到峰值,此后逐渐下降,1周时阳性细胞率仍高于假手术组。与模型组相比,电针组、阻滞剂组、电针+阻滞剂组各时段阳性率均有所下降,部分亚组差异具有显著性(p<0.05或p0.05)。

结论： 1.电针“合谷、尺泽”和“足三里、三阴交”两组穴位,能明显改善脑缺血／再灌注损伤大鼠的神经缺损症状及脑组织病理形态学变化,能显著降低缺血区神经细胞凋亡指数,提示电针“合谷、尺泽”和“足三里、三阴交”两组穴位对脑组织的缺血损伤具有一定的保护作用。 2.电针“合谷、尺泽”和“足三里、三阴交”能抑制磷酸化p38MAPK蛋白的表达,提示电针“合谷、尺泽”和“足三里、三阴交”对脑缺血损伤的保护作用可能是通过抑制p38MAPK信号通路的表达来完成的。 3.电针“合谷、尺泽”和“足三里、三阴交”对脑缺血／再灌注大鼠的神经功能缺损、脑组织病理形态、缺血区神经细胞凋亡指数及p-p38MAPK的改善在再灌注后3天时较明显,说明该时间点可能为促进脑缺血神经修复的较好治疗时间窗。 4.实验结果提示：“电针刺激-启动p38MAPK信号调控-拮抗细胞凋亡”是针刺治疗脑缺血损伤的可能作用机制之一。
目的：通过观察温阳振衰颗粒对慢性充血性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)模型兔的作用,探讨抑制剂SB203580对于在体动物的使用,进一步研究SB203580的有效使用剂量方法,且根据血清NT-proBNP、p38总蛋白和p38磷酸化蛋白、p38mRNA水平表达和电镜下心肌细胞的影响,探讨温阳振衰颗粒其治疗CHF的作用机制。

NVP-BGJ398分子重量 确认细节 方法： 第一阶段：将40只健康普通级新西兰兔随机抽取为正常对照组、模型对照组、P3840ug组、P3820ug组、P38空白组、DMSO阿霉素组、DMSO空白组、依那普利组。每组实验兔5只。连续药物处理4周后,取心脏组织,并采用Western-blot和检测P38总蛋白、P38磷酸化的表达水平和P38mRNA。 第二阶段：从第一阶段所得结论,将56只兔子,将实验兔随机分为8组,每组7只实验兔。分别为：正常对照组、模型对照组、温阳振衰组、依那普利组、P38抑制剂+阿霉素组、P38抑制剂40u1组、DMSO组、DMSO组+阿霉素组。8周后,取实验兔心脏,检验实验兔血清NT-proBNP、心肌细胞凋亡、P38总蛋白、P38磷酸化蛋白、p38mRNA水平,以及电镜下心肌细胞形态结构。 结果： 第一阶段： 造模4周后各组间P38比较,经过SB和药物干预后,心肌P38均不同程度上升,其中以模型对照组上升最为明显(P<0.05)。SB低、高剂组和阳性对照组心肌P38水平上升较模型对照组缓慢(P<0.05),其中SB高剂组心肌P38水平升高最为缓慢(P0.05)。 第二阶段： 1.各组血清NT-proBNP:造模8周后,各组血清NT-proBNP均不同程度上调,各实验组均高于正常对照组、DMSO组、SB空白组,差异具有统计学意义(P<0.05),阿霉素对照组最高(P<0.05)。SB抑制剂组、依那普利对照组、温阳振衰组血清NT-proBNP水平均有升高。(P<0.05),其中以温阳振衰血清NT-proBNP水平升高最为缓慢(P<0.05),其中以阿霉素DMSO组上调最为明显(P<0.05)。温阳振衰组、依那普利对照组、SB抑制剂组心肌细胞凋亡指数水平上调较阿霉素DMSO组缓慢(P<0.05),其中以SB抑制剂组心肌细胞凋亡指数升高最为缓慢(P0.05)。 4.各组P-P38变化：各组P38磷酸化的蛋白水平均不同程度上调,与正常对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05),其中以阿霉素组上调最为明显(P0.05)。实验各组心肌细胞P38磷酸化的蛋白水平相比差异无显著性意义(P>0.05)。SB抑制剂组和依那普利对照组、温阳振衰组P38磷酸化的蛋白水平上调较模型对照组缓慢(P<0.