01）；KM＋LA组小鼠ABR阈移虽然在用药后也有增大，但较KM组明显减小（P＜0.01）。

2．对照组耳蜗外毛细胞、螺旋神经节及血管纹中均可见p-p38MAPK和p-JNK表达，其阳性免疫反应产物呈棕黄色，分布于胞浆及胞核内。KM组、KM＋LA组和LA组小鼠耳蜗中p-p38MAPK和p-JNK阳性反应产物的分布与对照组大致相同，但KM组的阳性染色比对照组明显加深；而KM＋LA组的阳性染色则较KM组明显减弱。显微图像分析结果显示，KM组小鼠耳蜗p-p38MAPK和p-JNK表达较对照组明显增强（P＜0.01）；而KM＋LA组小鼠耳蜗p-p38MAPK和p-JNK的表达则明显弱于KM组（P＜0.01）。 3．蛋白质印迹检测结果显示，对照组小鼠耳蜗p-p38MAPK和p-JNK的电泳条带较弱，而KM组小鼠耳蜗p-p38MAPK和p-JNK的电泳条带均明显强于对照组，KM＋LA组小鼠耳蜗p-p38MAPK和p-JNK的电泳条带则较KM组明显减弱。半定量分析结果显示，KM组小鼠耳蜗p-p38MAPK和p-JNK的蛋白表达水平均较对照组明显增高（P＜0.01）；而KM＋LA组小鼠耳蜗p-p38MAPK/β-actin比值和p-JNK/β-actin比值则均较KM组明显减小，即p-p38MAPK和p-JNK的蛋白表达水平表达较KM组明显降低。 时间 结论 p38MAPK和JNK介导了KM对BALB/c小鼠的耳毒性损伤，LA可通过显著抑制KM所致p-p38MAPK和p-JNK的高表达，从而有效防护KM的耳毒性，这可能是LA发挥防护作用的机制之一。
减数分裂是遗传学的基础,它保证了有性生殖生物个体世代之间染色体数目的稳定性,为有性生殖过程中创造变异提供了遗传的物质基础。小鼠卵母细胞的减数分裂是极端的不对称分裂,分裂过程中排出非常小的不具有生物学功能的极体和含有大部分母源物质的卵细胞,为后期的受精和早期胚胎发育做准备。 丝氨酸/苏氨酸相似激酶(ste-20like kinase)是在进化上是非常保守的微管相关蛋白,并且是Rho-GTPase Cdc42/Rac主要的下游靶蛋白,参与许多重要细胞活动,例如细胞迁移,细胞骨架重组以及诱导细胞凋亡和影响细胞周期进程等,是细胞有丝分裂所必需的。 首先,本文针对SLK在小鼠卵母细胞减数分裂过程中四个典型时期GV期,GVBD期,MI期,MII期,即培养小鼠卵母细胞Oh,2h,8h和16h的RNA水平表达量进行研究,通过RT-PCR的方法检测。验证了SLK在各个时期的RNA水平表达量很高,并且随着减数分裂进程的推进,逐渐增加。

ARN509 其次,主要针对SLK在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的表达和定位进行了研究。检测了小鼠卵母细胞体外培养的Oh,2h,8h和16h,即相应的小鼠卵母细胞成熟的GV期,GVBD期,MI期,MII期SLK的表达和定位情况。证实了SLK在小鼠卵母细胞减数分裂过程中各时期表达均衡全过程。通过免疫荧光染色方法,发现SLK特异性地定位于减数分裂各期的染色体着丝粒上。 同时,通过NOCO对卵母细胞进行处理后,利用染色体扩展方法对SLK在卵母细胞染色体上的定位与表达进行了研究。实验显示在小鼠卵母细胞减数分裂过程MI和MII时期,经过NOCO处理,SLK的定位和表达明显强于对照组,实验结果说明经过NOCO处理将微管蛋白和染体色着丝粒之间的连接破坏之后,SLK的表达明显增强。该结果显示SLK与微管相关。对于纺锤体与染色体连接是非常重要的。

然后,主要针对SLK与Crest在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的定位关系进行了研究。本文中采用染色体扩展的试验方法对二者进行了研究。实验显示,SLK在小鼠卵母细胞减数分裂全程都有定位,在Pro-MI,MI和MII主要定位在染色体着丝粒上,并且SLK与Crest共染实验显示二者共定位于染色体着丝粒上。实验结果说明SLK与检验点蛋白相关,为了研究SLK与检验点蛋白有着怎样的关系,我们设计了下一个实验进行进一步研究。 为了验证SLK与检验点蛋白的相互关系,本文对SLK与Mad1在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的定位关关系进行了研究。使用染色体扩展的试验方法对二者的定位进行了研究,实验结果显示SLK和Mad1在小鼠卵母细胞Pro-MI期共定位于染色体的着丝粒上。但是,在卵母细胞分裂中期(MI),MAD1离开着丝粒,同时SLK依然存在于着丝粒上。当NOCO处理以后Mad1在分裂后期又回到着丝粒上与SLK相重合。实验结果说明SLK与检验点蛋白Mad1有着密切的关系。 最后,为了研究SLK在小鼠卵母细胞中的功能,利用显微注射方法对小鼠卵母细胞注射Si-RNA和Morphlinor,对SLK进行敲降,来观察研究SLK对于减数分裂进程的影响,实验结果显示,SLK对小鼠卵母细胞减数分裂进程时间以及成熟率影响不显著。 selleck产品 通过以上研究表明,SLK对于小鼠卵母细胞减数分裂过程是十分重要的。因此对于SLK的研究同时也是十分必要的。本文中就针对SLK小鼠卵母细胞减数分裂进程中进行了详细的研究。
目的：建立哮喘小鼠模型并观察小鼠气道炎症及气道黏液分泌的情况。 方法：清洁级BALB/c雄性小鼠20只随机分为两组：生理盐水对照组(NS组)和哮喘组(AS组),各10只。AS组于第1、13天腹腔注射卵清白蛋白(OVA)致敏,第19天开始雾化吸入5%OVA溶液30min,连续激发5天,制备哮喘小鼠模型,NS组以生理盐水代替OVA,处理方法同AS组。测定各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数和白细胞分类计数,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BALF中IL-5和IL-32水平,阿尔辛蓝—过碘酸雪夫(AB-PAS)染色观察气道杯状细胞及气道分泌黏液,HE染色和VG染色观察肺组织病理学改变,RT-PCR、免疫组织化学(IHC)及免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中黏蛋白Muc5ac mRNA及蛋白水平的表达。 结果：AS组小鼠BALF中的细胞总数、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及中性粒细胞计数、IL-5和IL-32水平、肺组织AB-PAS阳染面积、Muc5ac mRNA和蛋白表达均高于NS组,差异均有统计学意义(均P0.05)；地塞米松和U0126可以抑制ERK1/2的磷酸化,且二者差异无统计学意义；各组小鼠Muc5ac mRNA和蛋白表达与ERK1/2的磷酸化水平呈高度正相关(r值分别为0.983、0.

01)。Bevacizumab单药处理，即使增大药物浓度至320μg/ml，对细胞增殖仍无抑制(P＞0.05)。Cetuximab单药处理，即使增大药物浓度至80μg/ml，对细胞增殖仍无抑制(P＞0.05)。 (2)PHA-665752联合Bevacizumab对结肠癌细胞HCT-116增殖的抑制强于对照组及Bevacizumab单药组(P＜0.01)，但与PHA-665752单药组比较无差异(P＞0.05)。 (3)PHA-665752联合Cetuximab对结肠癌细胞HCT-116增殖的抑制强于对照组、Cetuximab单药组和PHA-665752单药组(P＜0.01)。 3流式细胞术： (1)细胞周期：对照组细胞的G0/G1期百分比为(47.33±0.45)%；Cetuximab单药组细胞的G0/G1期百分比为(43.83±0.35)%，少于对照组(P＜0.01)；PHA-665752单药组细胞的G0/G1期百分比为(71.90±0.26)%，多于对照组(P＜0.01)；PHA-665752联合Cetuximab组细胞的G0/G1期百分比为(60.00±0.70)%，多于对照组和Cetuximab单药组(P＜0.01)，但少于PHA-665752单药组(P＜0.01)。 (2)细胞凋亡：对照组细胞凋亡率为(6.04±0.06)%，Cetuximab单药组细胞凋亡率为(5.99±0.13)%，两组无统计学差异(P＞0.05)；PHA-665752单药组细胞凋亡率为(10.35±0.02)%，多于对照组(P＜0.01)；PHA-665752联合Cetuximab组细胞凋亡率(13.55±0.08)%，均多于对照组、Cetuximab单药组和PHA-665752单药组(P＜0.01)。

Seliciclib 结论： 1结肠癌细胞HCT-116的KRAS基因状态为13密码子突变。

2HCT-116对c-Met抑制剂PHA-665752敏感，对Bevacizumab、Cetuximab均不敏感。 3c-Met抑制剂PHA-665752可以增加结肠癌细胞HCT-116对Cetuximab的敏感性，但不能增加HCT-116对Bevacizumab的敏感性。
背景：结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率在我国呈快速上升的趋势。大多数患者确诊时已属于中晚期。传统的治疗方法有手术、化疗、放疗。近年来，靶向药物应运而生，已用于临床的有VEGF拮抗剂贝伐单抗（Bevacizumab)、EGFR拮抗剂西妥昔单抗（Cetuximab）和帕尼单抗（Panitumimab）。但无论是化疗（5-FU、CDDP等）还是靶向药物均可能产生耐药，且有一定的毒副作用。因此，寻找新的结直肠癌治疗策略就成了当前的一个研究热点。 c-Met是由原癌基因c-met编码的一类重要的酪氨酸激酶受体，在结直肠癌细胞中高表达，与肿瘤增殖、侵袭、血管形成及淋巴结、肝转移密切相关。研究发现，高表达c-Met的肿瘤对放、化疗、EGFR TKIs靶向药物产生抵抗。目前，c-Met抑制剂在非小细胞肺癌等实体肿瘤的临床试验中显示了较好的疗效。c-Met抑制剂也极有可能用于结直肠的治疗。但c-Met抑制剂联合传统的化疗对结直肠癌生长的影响未见报道。 在前期体外实验中，我们建立了稳定可调控c-Met表达的人结肠癌SW620细胞系；适当敲除c-Met表达能够抑制SW620增殖，并且敲除c-Met表达后能够增敏5-FU对SW620增殖的抑制作用。本研究旨在：检测c-Met抑制剂联合5-FU、CDDP对SW620移植瘤生长的影响，并探讨可能的机制。 www.selleckchem.cn/products/MLN9708.html 目的：探讨c-Met抑制剂联合5-FU、CDDP对SW620移植瘤生长的影响及相关机制。 方法： 1、培养人结肠癌细胞SW620，皮下接种建立SW620裸鼠（BALB/c-nu，5周龄，雄性）移植瘤模型。 2、实验分为6组，每组8只：对照组（DMSO组），2.5%DMSO稀释液隔日用药；单纯氟尿嘧啶组（5-FU组），40mg/kg每隔3日用药；单纯顺铂组（CDDP组），3mg/kg每隔3日用药；单纯c-Met抑制剂组（PHA-665752组），25mg/kg隔日用药；氟尿嘧啶+c-Met抑制剂组（5-FU+PHA-665752组），同单纯组用药；顺铂+c-Met抑制剂组（CDDP+PHA-665752组），同单纯组用药。所有组连续用药3周，均为腹腔注射。实验期间观察裸鼠生理状态情况及移植瘤体积变化情况。

NVP-BEZ235 花费 3、将各组移植瘤标本石蜡包埋切片，行HE染色观察SW620细胞形态变化；应用免疫组织化学检测各组移植瘤E-cadherin蛋白、Vimentin蛋白及Ki-67蛋白的表达情况；应用原位末端转移酶标记技术（TUNEL）检测各组移植瘤凋亡情况。 结果： 1、裸鼠生理状态情况：除单用CDDP组外，各组裸鼠用药前后生理状态良好，未见明显变化。CDDP可以对裸鼠产生毒副反应，CDDP联合PHA能够降低CDDP对裸鼠的毒副反应；5-FU对裸鼠未产生明显毒副反应，5-FU联合PHA未增加对裸鼠的毒副反应。 2、各组移植瘤生长情况：实验组与DMSO组相比较，SW620移植瘤平均体积小于DMSO组，差异均有统计学意义（P<0.01）。5-FU+PHA组平均体积小于5-FU组体积（P<0.01）；CDDP+PHA组平均体积小于CDDP组体积（P<0.01），5-FU+PHA组高于5-FU组（P<0.01），CDDP+PHA组高于CDDP组（P<0.01）；而Vimentin蛋白表达量降低，其中，CDDP组低于DMSO组（P<0.05），其它实验组均低于DMSO组（P<0.01），5-FU+PHA组低于5-FU组（P<0.01），CDDP+PHA组低于CDDP组（P<0.01）；Ki-67蛋白表达量显著降低（P<0.01），5-FU+PHA组低于5-FU组（P<0.01），CDDP+PHA组低于CDDP组（P<0.01）；5-FU+PHA组均高于5-FU组、PHA组（P<0.

05或P<0.01)，HF组小鼠肝脏组织P-JNK、P-P38MAPK、P-ERK的表达水平均明显高于NC组（P<0.05或P<0.01），然而IKBα蛋白表达低于NC组(P<0.05)；其次，与HF组小鼠相比，HJ组小鼠肝脏组织JAZF1mRNA及蛋白表达均增高（P<0.01），而TNF-α、MCP-1及IL-8的表达显著降低（P<0.05或P<0.01），且P-JNK及P-P38MAPK的表达水平明显降低(P<0.05)，IKBα蛋白表达明显升高（P0.05)。

结论： JAZF1基因表达上调能够抑制高脂喂养小鼠肝脏组织炎症因子TNF-α、MCP-1及IL-8的表达，其调控机制可能与JNK、P38MAPK及NF-κB信号通路的激活抑制密切相关。
目的：观察雷奈酸锶对钴铬钼颗粒（Co-Cr-Mo）诱导小鼠颅骨骨溶解的影响，探讨其在骨代谢中的作用，为防治人工关节松动提供理论依据。 方法：取8周龄雄性ICR小鼠52只，体重25±2g。随机取13只作为空白对照组（A组），假手术后仅给予生理盐水。余下39只构建颅骨骨溶解模型，随机分成三组并给予不同处理：颗粒对照组（B组）给予Co-Cr-Mo颗粒+生理盐水；低剂量治疗组（C组）给予Co-Cr-Mo颗粒+生理盐水+低剂量雷奈酸锶；高剂量治疗组（D组）给予Co-Cr-Mo颗粒+生理盐水+高剂量雷奈酸锶。于术后28天取小鼠颅盖骨行HE染色、ELISA及qRT-PCR检测。 什么 结果：各组小鼠均存活至实验完成。HE染色见：B组较A组骨溶解严重，C组和D组骨溶解较B组减轻，尤以D组减轻最为明显。蛋白检测发现：B组TNF-α和RANKL含量均较A组明显增加（P<0.05）；C组TNF-α和RANKL含量高于A组（P<0.05），但低于B组（P<0.05），D组与A组含量差异无统计学意义（P＞0.05），且D组较C组比值偏低（P
目的探讨阻断迷走神经对犬急性坏死性胰腺炎(ANP)血清细胞因子及胰腺病理学的影响。 方法健康杂种雄性犬26只，随机分为假手术组(SG)、ANP对照组(CG)、迷走神经切断+ANP组(VG)。用5%牛黄胆酸钠和胰酶混合液进行逆行胰管注射法建立ANP模型；分别测定3组不同时段血清中淀粉酶(AMY)、超敏C反应蛋白(High sensitivity C-reactive Protein, HCRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素10(IL-10)的含量变化；7天后将所有实验犬统一处死，取胰腺组织进行病理观察，并进行病理学评分；实验中途死亡犬进行统计，做死亡原因分析，放弃中途死亡犬各细胞因子检测结果及各生化指标结果的统计。 结果手术前AMY、HCRP、TNF-α、IL-1β、IL-10的血清含量在各组之间均无明显差异(P均>0.05)；手术后CG较SG以上各项血清含量指标都明显升高，具有统计学意义(P均﹤0.05)，而VG的HCRP、TNF-α血清含量又较CG都明显升高，具有统计学意义(P均=0.001),VG的IL-1β血清含量较CG升高，有统计学意义(P=0.022)，VG的IL-10血清含量又较CG降低，有统计学意义(P=0.023)，VG的AMY血清含量与CG相比无明显差异，无统计学意义(P=0.158)；胰腺组织病理学在SG为正常胰腺组织，VG胰腺病理评分与CG相比明显升高，有统计学意义(P=0.03)；SG实验中途无死亡，CG死亡2只，VG死亡4只。

结论1.迷走神经切断后对犬急性坏死性胰腺炎血清中AMY的活性无明显影响，而血清中HCRP的血清浓度明显升高；2.迷走神经切断后使犬急性坏死性胰腺炎血清中促炎因子TNF-α、IL-1β的浓度明显升高，而血清中抗炎因子IL-10的浓度明显降低；3.迷走神经切断后使犬急性坏死性胰腺炎胰腺病理病变加重；4.迷走神经切断后急性坏死性胰腺炎犬的病情明显恶化，说明迷走神经对犬急性坏死性胰腺炎起着非常重要的调控作用。
【目的】研究阿托伐他汀（ATO）对在无血清和缺氧条件下对比剂（CM）诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响，以及氧化应激在该过程中的可能作用机制。 microtubule assay Canertinib体内 【方法】以人肾小管上皮细胞（HKC）为研究对象，进行培养，在无血清、缺氧条件下,分别与不同浓度（100、120、150、200mgI/mL）碘海醇孵育12h；碘海醇（120mgI/mL）分别处理细胞2、6、9、12h；不同浓度ATO（10-11、10-10、10-9、10-8、10-7、10-6、10-5mol/L）先与细胞孵育24h，同一浓度ATO（10-7mol/L）先处理细胞6、12、24、36、48h，二者分别再与碘海醇（120mgI/mL）在无血清、缺氧条件下共刺激12h；不同浓度ATO（10-10、10-9、10-8、10-7mol/L）与细胞共孵育24h后，再与碘海醇（120mgI/mL）在无血清、缺氧条件下共刺激12h。采用CCK-8法检测细胞增殖能力；

TUNEL法观察细胞凋亡情况；采用化学法检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性； Western blot检测gp91phox、P22phox、bax及bcl-2等蛋白表达。 【结果】 CCK-8法示与正常组(6.06±0.18)%相比，各组细胞增殖能力均受不同程度抑制，其中CM+缺氧组受影响最明显[（57.86±0.28）%, P
目的:采用Meta分析的方法客观评价肾移植术后应用环孢素A（Cyclosporine A，CsA）与他克莫司（Tacrolimus，Tac）在抑制免疫排斥反应发生、移植肾功能、人/肾存活率、血糖变化、心血管疾病相关危险因素（高血压、高血脂）、肝毒性及血红蛋白等方面有效性及安全性的差异。方法:采用电子和手工两种检索方式对相关文献初检。电子检索数据库有Medline database(1994.1-2014.1)、中国期刊全文数据库（CNKI：1994.1-2014.1）、中国生物医学文献数据库（CBM：1994.1-2014.1）、中国循证医学/Cochrane中心数据库（CEBM/CCD）、Cochrane Library。手工检索近期《中华肾脏病杂志》、《中华器官移植杂志》等5种杂志。纳入关于肾移植术后应用CsA与Tac评价有效性及安全性的随机对照试验，所纳入文献数据由两名研究员独立提取并进行文献质量评价，如果出现分歧，则双方讨论或者与第三人协商决定。纳入研究的方法学质量采用Jadad量表评分，应用Cochrane协作网提供的RevMan5.2软件进行统计数据分析。结果:文献初检，中文文献499篇，英文文献343篇，最终纳入28篇RCT(英文22篇,中文6篇)有关肾移植术后应用CsA与Tac治疗的有效性和安全性的对照统计。 ●术后6个月及12个月随访，应用CsA组急性排斥反应发生率均高于Tac组，差异有统计学意义。 ●术后6个月及12个月随访，应用CsA组人存活率均高于Tac组，但P＞0.05，差异无统计学意义。 ●术后6个月随访，CsA组肾存活率低于Tac组，但P＞0.

Y27632调控小鼠胚胎干细胞自我更新的miRNA芯片数据分析 目的：更全面地了解YES细胞体系与常规ES细胞的差异,并从中提取更多的转录后调控分子信息,以期发现新的全能性相关分子事件。 结果：将本研究发现的Y-ES细胞与ES细胞的差异表达miRNA与文献报道的ES细胞与epiS细胞的miRNA差异表达谱进行比对发现,两组差异表达谱重叠较少,在27条差异表达miRNA中仅有5条与之相同,提示Y-ES细胞处于不同于原始态全能性和始发态全能性的中间状态。对Y-ES细胞中上调的miRNA进行功能分析发现,8条常规分子通路可能受到潜在调控,其中包括粘着斑信号,Wnt信号通路和ErbB信号通路等。继而,对Y-ES细胞,ES细胞和EB的差异表达miRNA进行的分类比对分析发现,6条miRNA在Y-ES细胞和ES细胞维持高表达而在分化的EB样本中显著下调,另外16条miRNA在Y-ES细胞和ES细胞中低表达而在EB中高表达。这些miRNA作为全能性和分化相关的靶点,用定量RT-PCR进行表达验证,确定了全能性样本中高表达的5条miRNA及分化样本高表达的3条miRNA具有超过两倍的差异。对两组miRNA进行功能分析,分别发现13条和5条常规分子信号通路可能受到这些miRNA调控的信号通路,其中粘着斑(Focaladhesion)和ErbB信号通路具有较大相关性和研究价值。采用蛋白相互作用数据库分别对这两条通路与全能性核心转录因子网络进行相互作用预测,选取预测的关节节点进行蛋白表达验证,结果发现Y27632抑制了β-GSK3和β-ERK水平,维持了β-catenin的表达,并上调了c-Myc表达,提示这些信号信号在Y27632维持ES细胞自我更新过程中具有重要作用。

确认细节 结论：Y-ES细胞可能处于与ES细胞及epiS细胞均不同的全能性状态。Y27632通过上调c-Myc作用参与ES细胞全能性调控网络；β-GSK3, p-ERK和β-catenin也可能参与了Y27632维持ES细胞自我更新的作用。
本研究利用microarray和RNA-seq等手段，对从国内外不同实验室来源的猪iPS细胞株进行了测定分析，获得了多维度的基因表达数据,并通过系统生物学整合分析深入探讨了猪iPS细胞多能性维持的分子机理。 利用基因芯片初步鉴定重编程完成情况，同时与已报道建系猪iPS基因表达谱比较，探讨猪iPS细胞多能性维持的调控网络。结果表明完全重编程的iPS细胞比部分重编程的iPS细胞高表达EPCAM，该基因可作为诱导猪多能性细胞的标记物。通过比较JAK-STAT,

NOTCH, TGFB1, WNT和VEGF通路相关基因在猪、人和小鼠多能性细胞中的表达情况，解析了猪多能性和自我更新维持的特性。na http://www.selleck.cn/btk.html ve状态特异的标记基因KLF2/4/5和TBX3在猪iPS中没有上调，但primed状态的标记基因OTX2和FABP7在猪iPS中上调。同时， DLK1-DIO3相关基因在猪iPS中异常表达，这能够解释目前较少有嵌合猪产生的报道。这些结果表明目前诱导和培养体系下得到的猪iPS接近于人，而区分于小鼠多能性维持状态。 利用通过RNA-seq比较了猪iPS细胞和成体细胞的基因表达谱，同时分析了不同生长因子依赖的猪iPS细胞基因表达谱的差异，这些差异基因可能为鉴定猪iPS细胞多能性维持的关键转录因子提供参考。对分析出的差异基因进行功能富集分析，从而揭示与猪多能性维持相关的重要细胞信号通路和代谢活动。分析结果表明猪iPS上调基因富集与“核糖体”，“染色质重塑”以及“细胞周期”等通路。我们的分析表明RNA剪接对于调控猪细胞的多能性具有关键作用，推算出了猪iPS细胞和成体细胞中出现的可变剪切体。我们以多能性维持核心转录因子SALL4为例说明了其可变剪切的模式，并通过RT-PCT和定量PCR进行了验证。本文最后分析了猪iPS中上调基因在猪早期胚胎发育过程中动态表达的情况。由此，建立了猪多能性维持的基因表达图谱，以上分析对于建立Na

ve状态的猪iPS细胞系具有参考意义。
胚胎干细胞（embryonic stem cell，ES细胞）是从早期囊胚内细胞团分离而出的多能性细胞。这些细胞能够体外培养无限增殖，维持自我更新，并且在特定条件下可以分化成为机体几乎所有类型的细胞。因此，ES细胞被认为是研究早期胚胎发育最重要的模型。对ES细胞的多能性维持和定向分化的研究能够为胚胎发育，再生医学和器官移植等临床医学研究提供重要的理论指导。 通常 在ES细胞中，多能性和定向分化的平衡被严格调控并处于一个相对稳定的状态。而这种平衡的维持，既需要转录因子及其构成的信号调控网络的调控，也有着来自表观遗传方面的调节，而microRNA（miRNA）作为一种重要的表观调控机制在ES细胞的多能性维持和分化调节中发挥着重要的作用。 研究发现，强烈的外部刺激，例如瞬间的低pH值胁迫，低氧胁迫等，均有利于诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPS细胞）的形成。5-氨基咪唑-4-甲酰胺-呋喃核糖苷（5-Aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide，AICAR）是一种膜通透性的AMP-激活的蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）的激活剂。它可以作为AMP的类似物，在不影响ATP，ADP和AMP水平的条件下激活能量代谢调控的关键蛋白激酶AMPK，从而抑制合成代谢，使细胞处于能量胁迫状态，影响ES细胞的多能性维持，但是其在ES细胞干性维持中的作用尚不清楚。本研究对AICAR处理及未处理的J1小鼠ES细胞进行研究，旨在揭示AICAR在ES细胞干性维持中的作用。主要的研究内容及结果如下： 1.

5、1和2Hz,加载时间为24h,以未加载张应变的VSMC为对照组。采用Real-time RT-PCR、western blot等技术检测不同频率张应变对fibronectin、collagen Ⅰ和collagenⅢ表达的影响,以及可能参与调节的蛋白激酶p38的活性变化。结果显示:①张应变频率可以明显影响细胞外基质Fibronectin、collagenⅠ和collagenⅢ的mRNA的表达,其影响效果与频率大小是一种非线性关系;②蛋白激酶p38参与调节了一定频率张应变诱导的ECM的表达变化。结果表明不同频率的张应变可以影响VSMC细胞外基质表达的变化,提示频率的改变可能参与调节细胞外基质的合成与分泌;在应力引起的血管重建中频率的改变可能起着重要的作用。
目的探讨IL-6、IL-8促进卵巢癌细胞增殖的分子机制。方法在以往工作的基础上,选择兼有IL-6、IL-8受体及雄激素受体(androgen receptor,AR)表达的卵巢癌细胞系SKOV-3和OVCAR-3作为研究模型,观察AR阻断剂氟他胺(flutamide,Flu)对IL-6、IL-8诱导的促卵巢癌细胞增殖作用的影响,在此基础上进一步探讨两种细胞因子对AR表达的调节作用及相关信号传导通路。结果①AR阻断剂Flu不能阻断反而增强IL-6、IL-8诱导的促卵巢癌细胞增殖效应。②在无雄激素的条件下,IL-6、IL-8不仅能增加AR表达而且还能活化AR基因启动子,后者可被Flu完全阻断。③IL-6诱导的AR水平增加可被p38

已经 MAPK、MEK1/2及ErbB2 MAPK阻断剂阻断,而IL-8诱导的AR水平增加则可被Src阻断剂阻断。结论IL-6、IL-8很可能通过提高AR水平和AR活性从而增强卵巢癌细胞对雄激素的敏感性,由此通过产生的放大信号通路促进卵巢癌的生长和发展。IL-6、IL-8的上述活性分别依赖MAPK途径和Src活化。
目的:探讨血管生成素-1(Ang-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg2+]i)的调节机制。方法:我们采用荧光指示剂mag-fura-2,运用PTi阳离子测定系统动态测HUVECs的[Mg2+]i。结果:Ang-1诱导的[Mg2+]i增加与细胞外Mg2+浓度无关。Ang-1诱导的[Mg2+]i增加与细胞内Ca2+浓度无关。经酪氨酸激酶阻断剂(tyrphostin

A23和genistein),磷脂酰3激酶阻断剂(wortmannin和LY294002)预处理,均显著阻断Ang-1诱导的[Mg2+]i增加。但经活化丝裂原激活激酶阻断剂(SB202190和PD98059)预处理,不能阻断Ang-1诱导的[Mg2+]i增加。结论:Ang-1通过酪氨酸激酶/磷脂酰3激酶信号传递途径使细胞内的Mg2+库释放Mg2+,从而增加HUVECs的[Mg2+]i。
目的:研究p38 BKM120体内 MAPK信号途径在急性机械牵张致大鼠离体灌流心脏TREK-1通道表达改变中的作用。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分成3组,即对照组、机械牵张组和SB202190(p38 MAPK特异性抑制剂)组,每组10只。利用Langendorff灌流装置等建立离体灌流急性机械牵张的心脏模型;通过Western

blotting方法检测各组大鼠左室的p38 MAPK、p-p38 MAPK及TREK-1通道的蛋白表达。结果:各组大鼠左室的p38 MAPK表达无明显差异(P>0.05);机械牵张组左室p-p38 MAPK及TREK-1通道的蛋白表达均明显高于对照组(P0.05)且低于机械牵张组。结论:离体灌流心脏受机械刺激时p38 MAPK信号途径的激活可能介导了TREK-1通道的表达上调。心脏可能通过这种方式来改变自身电活动,从而减少心律失常发生,起到自身保护作用。
AIM: To analyze the ability of nine different potentially probiotic bacteria to induce maturation and cytokine 时间 production in human monocyte-derived dendritic cells (moDCs). METHODS: Cytokine production and maturation of moDCs in response to bacterial stimulation was analyzed with enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and flow cytometric analysis (FACS), respectively. The kinetics of mRNA expression of cytokine genes was determined by Northern blotting. The involvement of different signaling pathways in cytokine gene expression was studied using specific pharmacological signaling inhibitors. RESULTS: All studied bacteria induced the maturation of moDCs in a dose-dependent manner. More detailed analysis with S. thermophilus THS, B. breve Bb99, and L. lactis subsp.

FGFR2功能持续增强使BMSCs信号通路p38，Erk1/2磷酸化增强，对其使用相应阻断剂后发现相应基因表达上调。FGFR2通过p38信号通路可能调控软骨内成骨多个环节，而Erk1/2主要调控软骨细胞终末分化成骨过程。 7.利用体外培养技术再次验证p38，Erk1/2通路阻断剂对FGFR2功能增强所致骨发育迟缓有挽救作用，且使用p38通路阻滞剂后骨增长明显。 结论： 综上所述，本研究结果表明新建立的Fgfr2+/S252W突变小鼠是研究Apert综合征的良好动物模型之一。模型动物提示FGFR2功能持续增强对软骨内成骨也有重要作用，阻碍软骨内成骨过程，致模型动物肢体长度缩短、骨密度减弱。进一步观察发现FGFR2功能增强引起长骨骺端生长板组织形态异常是导致骨发育异常的关键。体外模拟BMSCs软骨内成骨过程发现，FGFR2功能持续增强抑制BMSCs增殖及成软骨分化能力，但增强成骨细胞相关基因表达，但抑制成骨细胞进一步矿化成骨。对软骨内成骨相关信号通路的研究发现FGFR2下游p38及Erk1/2通路对软骨内成骨影响巨大，且p38对成软骨、成骨过程均有影响，其信号通路阻滞剂对软骨内成骨发育障碍有救治作用。
顺铂(Cisplatin, DDP)是一种疗效显著的抗肿瘤药物,对多种实体瘤均具有较好的临床疗效,因此被广泛应用于癌症的化疗。然而,肿瘤细胞极易对顺铂产生耐药,常导致化疗失败,限制了顺铂的应用。本实验旨在研究新城疫病毒(Newcastle

以及 disease virus, NDV)对人耐顺铂肺癌细胞(A549/DDP)的体内外溶瘤作用及其信号转导机制。研究发现,NDV能特异而高效地在A549/DDP和A549细胞中增殖,且在A549/DDP细胞中的增殖能力更强,但不能在正常细胞中复制。NDV通过激活caspase依赖的细胞凋亡通路、MAPK通路和Akt通路诱导体外培养的A549/DDP细胞凋亡,且对A549/DDP荷瘤裸鼠具有显著的溶瘤效果。本实验首次研究了NDV对耐药肺癌细胞的溶瘤机制,结果表明溶瘤新城疫病毒在临床治疗顺铂耐药肺癌中具有重要的应用前景。取得的研究结果如下： 1.采用TCID50法测定病毒滴度,结果表明NDV(FMW株)能特异而高效地在人耐顺铂肺癌细胞(A549/DDP)中增殖,且较在其亲本肺癌细胞(A549)中的增殖能力更强,但不能在MRC-5人胚肺成纤维细胞中增殖。 2. FACS (Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡,结果表明FMW感染能够诱导A549/DDP细胞凋亡,该凋亡过程对于FMW感染具有时间依赖性。 3. Hoechst33258染色观察细胞核形态,发现对照组细胞核均呈弥散均匀的椭圆状。FMW感染组部分细胞核切割成大小不等的致密浓染碎块,呈现典型的细胞凋亡形态学特征,进一步显示FMW感染引起A549/DDP细胞凋亡。

4. selleck产品 Western Blot检测凋亡相关通路的活化,结果表明FMW感染激活caspase通路,其中caspase-8介导的外源性凋亡通路起主要作用,此外,MAPK通路和Akt通路也被激活。 5.采用pan-caspase抑制剂Z-VAD-FMK(50μM)预处理A549/DDP细胞后再感染FMW, FACS (Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡,发现细胞凋亡被明显抑制,表明FMW诱导的A549/DDP细胞凋亡依赖于caspase的激活。 6.分别用Erk1/2、Jnk、p38和Akt通路特异性抑制剂PD98059(20μM)、SP600125(10μM)、SB203580(10或LY294002(10μM)预处理细胞后再感染FMW, MTT法分析细胞杀伤率。结果显示,抑制MAPK和Akt通路均能抑制FMW诱导的A549/DDP细胞凋亡,表明MAPK和Akt通路参与该凋亡过程。 7.H&E染色、TUNEL法分析荷瘤裸鼠肿瘤石蜡切片,发现未感染组细胞基本未见凋亡而FMW感染组细胞呈现典型的凋亡特征,表明FMW能诱导A549/DDP或A549荷瘤裸鼠肿瘤细胞凋亡

8.采用QRT-PCR分析FMW M基因表达并以TCID50法测定病毒滴度,研究FMW在荷瘤裸鼠瘤内复制能力。结果表明FMW能在A549/DDP或A549荷瘤裸鼠瘤内特异地高效复制,且在A549/DDP移植瘤中复制能力更强。 9.测量并计算荷瘤裸鼠肿瘤体积,采用SPSS软件进行数据分析,结果显示,FMW显著抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长,对A549/DDP及A549移植瘤的抑瘤效果相近,且能够延长荷瘤裸鼠生存期。 本实验首次研究了NDV对耐药肺癌细胞的溶瘤作用,证明NDV通过激活caspase通路、MAPK通路和Akt通路而有效诱导耐顺铂肺癌细胞凋亡,较好地克服了顺铂耐药导致的凋亡下调,对体外培养的A549/DDP细胞和A549/DDP荷瘤裸鼠均具有显著的溶瘤效果。本实验从全新的角度研究了NDV的溶瘤机制,表明NDV有望成为一种治疗顺铂耐药肺癌的理想制剂。
目的观察在高糖环境下不同浓度的全长脂联素(f-APN)对结肠癌细胞株SW480增殖和凋亡的影响；探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路以及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活化在f-APN诱导结肠癌细胞凋亡过程中的作用。 方法应用不同浓度（0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml）的全长脂联素（f-APN）干预在高糖培养基（葡萄糖含量为4.5g/L的DEME培养基）中培养的结肠癌细胞株SW48024h、48h，分为高糖不加f-APN（APN0组）、高糖+10μg/ml selleck激酶抑制剂 f-APN组（APN10组）、高糖+20μg/ml f-APN组（APN20组）、高糖+30μg/ml f-APN组（APN30组）以及高糖+30μg/ml f-APN+p38MAPK阻滞剂SB203580(10μmol/L)组（APN30+SB组)，同时采用低糖培养基（葡萄糖含量为1.0g/L的DEME培养基）培养SW480细胞作为对照组（NC组）。分别应用MTT法以及流式细胞仪检测细胞的增殖、凋亡率；应用Western blot检测活性p-p38MAPK以及Caspase-3蛋白表达情况。 结果(1) f-APN干预SW480细胞24h后， APN30组细胞吸光度值(OD值)较APN0组、APN10组、APN20组均显著降低（P＜0.05)；干预48h后，APN10组、APN20组以及APN30组OD值均较APN0组显著降低（P＜0.01~0.05)，且APN10组、APN20组、APN30组三组间OD值逐渐降低（P＜0.05)。 (2) f-APN干预SW480细胞24h后，APN0、APN10组、APN20组、APN30组细胞凋亡率分别为：3.89%、4.94%、7.43%、8.67%；干预48h后，上述四组细胞凋亡率分别为3.96%、6.21%、8.86%、9.47%。其中，24小时后APN30组细胞凋亡率显著高于APN0、APN10组、APN20组（P＜0.

Declining in incidence in western countries, it continues to be a significant public health problem in the

far east. Targeted treatments are novel therapies PARP抑制剂 introduced in the clinical therapeutic armamentarium of oncology in the last 10-15 years. They represent a rational way of treating various cancers based on their molecular lesions. Although no such agent has been approved so far for the treatment of esophageal squamous cell carcinomas (ESCC), several are in clinical trials and several others have displayed pre-clinical activity that would justify the efforts and risks of pursuing their clinical development in this disease. This paper discusses some of these targeted agents in more advanced development in metastatic ESCC, as well as some promising drugs with LEE011体内 pre-clinical or initial clinical data in the disease.
目的:探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶2(dual-specificity

tyrosine phosphorylation-regulated kinase2,DYRK2)在胰腺癌中的表达及其临床意义.方法:应用实时荧光定量PCR、Western blot及免疫组织化学技术检测40例胰腺癌及其癌旁正常组织标本中DYRK2mRNA和蛋白的表达量,并结合免疫组织化学结果及胰腺癌患者的临床病理资料进行统计学分析.结果:实时荧光定量PCR检测显示,DYRK2m R N A在胰腺癌及其癌旁组织中均有表达,但后者的表达水平明显高于前者(P<0.05).结论:DYRK2在胰腺癌组织中表达下调,可能与胰腺癌的发生发展和淋巴结转移等恶性生物学行为相关.
vismodegib是一种具有选择性Hedgehog信号通路抑制活性的新型药物。临床研究证实vis-modegib对基底细胞癌(BCC)有效,美国食品药品管理局(FDA)2012年1月批准了vismodegib用于治疗局部进展期和转移性的BCC。文中就BCC的Hedgehog信号通路机制、vismodegib药理作用、药动学以及临床研究做一综述。
小细胞肺癌(small 确认细节 cell lung cancer,SCLC)大约占到原发肺癌的15%,药物治疗近30年没有大的变化。尽管几十年来有大量的生物学和临床研究,但是目前已经确立的小细胞肺癌的治疗方法是存在着公认的不足的。虽然一些已完成的随机研究进一步确定了有效的治疗策略,如最佳的治疗药物或治疗时间,最合适的剂量和放射治疗的时机,以及为临床实践提供更可靠的询证医学证据,不幸的是这些试验的结论多数是相反的,所以需要对这些试验进行Meta分析以求对个别情况给出清晰的临床治疗策略。本文对目前已有的主要Meta分析结果进行综述。
髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)是一种高度恶性的中枢神经系统肿瘤,好发于儿童,预后极差。MB的标准的治疗方案包括手术切除和/或联合放化疗,患者生存率有所提高,但放化疗后遗症大大降低了存活者的生活质量。近年来,分子生物学研究技术快速发展,基于基因组模式的分型方式对MB有了全新的认识视角。目前普遍认为MB可分为4个独立的分子类型,即WNT型(WNT

subtype)、SHH型(SHH subtype)、3型(Group 3)和4型(Group 4)。各个亚型之间在临床特征、病理分型、分子生物学、预后等方面均具有显著区别。深化MB分子生物学研究,探索各亚型特有的发病机制,优化危险分层标准及个体化治疗方案,以期找到新的高效、低毒副作用的药物,提高患者生存率、减低治疗后遗症将成为MB研究的新焦点。
Epithelial ovarian carcinoma (EOC) is the most common form of ovarian malignancies and the most lethal gynecologic malignancy in the United States. To date, in spite of treatment to it with the extensive surgical debulking and chemotherapy, the prognosis of EOC remains dismal.

05),6h后活化量明显减少,血浆和肾脏组织TNF-α含量在伤后6h开始增加,12h达峰值(与对照组比较,P<0.05),24h仍较高、未恢复正常,SB组上述指标要比烫伤组显著减少(P<0.05)。结论大鼠严重烫伤后1h肾组织p38MAPK活化明显增加、3h活化水平达峰值,从伤后6h开始血浆和肾脏组织TNF-α的含量水平增加明显、12h为最高,说明p38的活化在肾脏损伤中起到十分重要的作用。
丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和NFκB介导了炎症细胞转录活性的信号转导过程.转化生长因子β激活性激酶(TGFβ-activated kinase1,TAK1)是这些转导通路的上游激酶.通过在胶质细胞株中瞬时转染TAK1和它的结合蛋白因子(TAK1-binding protein1TAB1)基因,或与iNOS(可诱导型氧化氮合酶基因)启动子报告基因(iNOS-Luc)质粒共转染,探讨中枢两类胶质细胞在炎症反应过程中TAK1诱导iNOS和细胞因子表达的作用机制.结果显示,TAK1明显激活iNOS和细胞因子(TNFα、IL-1、IL-6)的表达活性.而且当使用它的下游激酶p38MAPK、JNK和NFκB的抑制剂(SB203580、SP620125和CAPE)后,这些表达活性明显被抑制.用IκBα的磷酸化突变体质粒(IκBαM)共转染胶质细胞株,能完全抑制iNOS的表达活性.研究结果提示:在胶质细胞内的p38MAPK、JNK和NFκB信号介导的iNOS和细胞因子的转录表达过程中,TAK1起着非常重要的调节作用.
利用乙烯雌酚(DES)处理23日龄SD大鼠,分离卵巢颗粒细胞(GC)进行无血清培养。结果表明,FSH(50ng/m1)处理GC,可迅速激活有丝分裂原蛋白激酶(p38MAPK),FSH处理5min便可观察到磷酸化的p38MAPK;FSH处理30min,磷酸化的p38MAPK水平达到最高;向培养液中加入H89(蛋白激酶A抑制剂,10μM),则显著抑制了FSH对p38MAPK的激活作用,提示这种激活作用依赖于蛋白激酶A(PKA)。用SB203580(p38MAPK抑制剂,20μM)抑制p38MAPK激活,则进一步提高了FSH对孕酮和甾体生成快速调节蛋白(StAR)的诱导作用,同时降低了FSH对雌激素生成的促进作用(p<0.01)。RT-PCR结果显示:抑制p38MAPK活性后,FSH对StARmRNA刺激作用明显增强,但对细胞色素P450芳香化酶(P450arom)mRNA的诱导作用却减弱了(p<0.05)。激光共聚焦和蛋白印迹结果显示:在GC中,StAR蛋白主要分布在线粒体中;与对照组相比,FSH显著提高了StAR的荧光强度和蛋白水平;抑制p38MAPK活性则增强了FSH对StAR蛋白表达的诱导作用。
Objective

http://www.selleckchem.cn/products/ci994-tacedinaline.html AT7519溶解度 To investigate the ability of once and twice isoflurane preconditioning

against oxygen and glucose deprivation(OGD) injury in rats brain in vitro.Methods Rat hippocampal slices were exposed to 1vol%,2vol% and 3vol% isoflurane for 30 min under normoxic condition(95% O_2/5% CO_2) once and twice(n=12 for each group) respectively before OGD.At the end of each exposure,the slices were set with a 15-min washout period interspersed,then slices were exposed to 13-min OGD period(95% N2/5%CO_2,glucose-free) followed by 30min reoxygenation.The amplitude CA1 population spikes(PS,neuronal function) GSK2118436体外 was measured and used to quantify the degree of recovery of neuronal function at post OGD period.To assess the role of the mitogen-activated protein kinases(MAPKs) in preconditioning,U0126,an inhibitor of extracellular signal-regulated protein kinase(MEK-ERK1/2),and SB203580,an inhibitor of p38 MAPK,were used during isoflurane exposure.Results Isoflurane-preconditioning with 1vol%,2vol% and 3vol% once increased the degree of recovery from 4.8%±1.4%(control) to 41.9%±9.2%,55.1%±11.0% and 63.2%±10.