KRAs,HER2和BRAF突变、ALK、RET、RoS1融合基因情况以及患者临床病理特征。对研究中发现的FGFR融合基因突变标本与野生FGFR对照标本(连续收集自2011年7月至2012年12月的肺鳞癌样本),以免疫组织化学法(immunohi stochemical, IHC)检测FGFR1，FGFR2,FGFR3表达。研究发现,1328例非小细胞肺癌中有17例FGFR融合基因,其中15例为FGFR3-TACC3,2例为BAG4-FGFR1,并且与其他基因突变/融合不共存。有吸烟史(P3cm (P<0.001)患者更易出现FGFR基因融合,腺癌FGFR融合基因样本中多含实体亚型。FGFR融合基因状态与免疫组织化学表达呈正相关,FGFR基因融合与患者的总生存时间以及无复发生存时间无明显相关性。本课题的研究成果表明,中国人群中1.3%的非小细胞肺癌、3.50%的肺鳞癌中存在FGFR基因融合。肿瘤最大径大于3厘米的吸烟鳞癌患者更易出现FGFR融合基因。本课题的研究结果可以对临床肺癌癌基因驱动基因突变／融合筛选提供参考,有利于FGFR靶向药患者选择及判断预后,具有临床实用性。
研究背景：乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一。近年来我国乳腺癌的发病率上升趋势明显,高居女性恶性肿瘤发病率的第一位。尽管手术治疗和术后多种辅助化疗对患者的预后有明显的改善,但是乳腺癌仍具有较高的复发率和死亡率。研究表明,乳腺癌的增殖及耐药是导致患者死亡的主要原因。因此,明确乳腺癌的发生发展机制,寻找有效的治疗靶点是延长乳腺癌患者生存时间的关键。分子靶向治疗是当今乳腺癌药物治疗的最新发展方向,目前已有分子靶向相关药物应用于临床。最近研究表明,与单靶向治疗相比,多靶点药物联合应用显示出更有效的治疗作用。NVP-BEZ235是PI3K/mTOR双靶点抑制剂,可有效抑制多种肿瘤的增殖；曲古霉素(TSA)为组蛋白去乙酰化酶抑制剂,是新型的抗肿瘤药物。有关BEZ235与TSA联合应用在非小细胞肺癌及胰腺癌中的研究已有报道,但在乳腺癌中的作用及机制尚不清楚。前期研究发现,PI3K通路及蛋白乙酰化修饰在乳腺癌的发生发展中起重要的作用,因此,深入研究BEZ235与TSA两种抑制剂联合应用对乳腺癌的抑制作用及其分子机制有重要的临床指导意义。研究目的：本研究通过体外细胞学实验检测BEZ235和TSA联合用药对乳腺癌细胞生物学行为的影响,并探讨其协同抑制肿瘤增殖的作用及可能的分子机制,为乳腺癌靶向治疗提供新的药物选择方案。材料和方法：通过MTT法观察BEZ235、TSA单独或联合用药对不同乳腺癌细胞系T47D,

http://www.selleckchem.cn/products/AZD8931.html 可能 SKBR3, MDA-MB-231, MCF-7, MDA-MB-468, MDA-MB-453增殖情况的影响,分析BEZ235与TSA联合用药的协同作用；通过平板克隆形成实验检测联合用药对乳腺癌细胞增殖的抑制作用；通过划痕实验观察联合用药对细胞迁移能力的影响；通过基因芯片筛查发现单独用药与联合用药组乳腺癌细胞的差异基因表达谱,初步明确联合用药的可能作用机理；采用流式细胞术及Hoechst33342细胞核染色法检测药物处理后的乳腺癌细胞凋亡率的变化；Western Smoothened antagonist blot方法检测BEZ235及TSA处理后PI3K/Akt信号通路及HDAC相关蛋白的改变,并进一步分析联合用药诱导乳腺癌细胞凋亡与自噬相关因子的变化。结果：MTT结果显示,BEZ235与TSA可协同抑制乳腺癌细胞株MCF-7、T47D细胞的增殖；平板克隆实验显示联合用药后,MCF-7、T47D细胞克隆形成能力明显下降；划痕实验结果表明联合用药可明显抑制MCF-7和T47D细胞的迁移能力；联合基因芯片检测结果表明联合用药可明显改变乳腺癌细胞MCF-7生存及死亡信号通路相关mRNA表达情况；Hoechst33342染色结果显示联合用药可诱导乳腺癌细胞MCF-7、T47D的凋亡,同时流式细胞术检测结果表明联合用药主要促进乳腺癌细胞的晚期凋亡；Western

blot结果显示BEZ235及TSA联合用药可进一步下调PBK/Akt/mTOR信号通路蛋白,上调PARP蛋白的表达及降低Bcl-2/bax比值,通过促进caspase-3、8、9蛋白的活化诱导凋亡；同时,联合用药可增加自噬标志蛋白LC3B、Beclin1的表达,经过自噬抑制剂3-MA处理30分钟后,联合用药组的LC3B表达下降,而caspase3和PARP的表达明显增强。结论：1)BEZ235与TSA联合用药可协同抑制乳腺癌细胞的增殖、克隆形成及迁移能力：2)BEZ235与TSA联合用药对乳腺癌细胞的协同抑制作用与PI3K/Akt/mTOR通路进一步抑制有关；3)BEZ235与TSA联合用药协同抑制乳腺癌的作用与依赖caspase途径诱导凋亡和促进自噬形成均密切相关。
研究背景肾细胞癌(renal cell carcinoma, RCC)是泌尿系统常见的恶性肿瘤,近年来发病率呈持续上升趋势,严重威胁人类生命健康。肾细胞癌常发病隐匿,约30%肾细胞癌在初次诊断时已发生转移。肾细胞癌对放化疗不敏感,根治性手术切除是其唯一有效的治疗方式,但是术后肿瘤复发转移率仍较高。肾细胞癌转移(metastatic renal cell carcinoma, mRCC)预后不良,5年生存率<0.001,P<0.

Despite significantadvances in therapy over the last decade CLL remains incurable. Current front-line therapy often consists of chemoimmunotherapy-based regimens,

most commonly the fludarabine, cyclophosphamide plus rituximab combination, but rates of relapse and refractory disease are high among these patients. Several key signaling pathways are now known to mediate the survival and proliferation of CLL cells selleck化学 in vivo, the most notable of which are the pathways mediated by the B-cell receptor(BCR) and cytokine receptors. A better understanding of the pathogenesis of the disease, the underlying biology of the CLL-cell and the roles of the tumour microenvironment has provided the rationale

for trials of a range of novel, more targeted therapeutic agents. In particular, clinical trials of ibrutinib and idelalisib, which target the Brutons tyrosine kinase and the delta isoform of phosphoinositol-3 kinase components of the BCR signaling pathway respectively, have shown extremely promising results. Here we review the current literature on the key signaling pathways and interactions of CLL cells that mediate the survival and proliferation of the leukemic 确认细节 cells. For each we describe the results of the recent clinical trials and in vitro studies of novel therapeutic agents.
蛋白激酶B(AKT),在细胞存活、代谢、迁移和侵袭等信号通路中起着重要的调控作用。细胞信号转导抑制因子3(SOCS3)主要参与酪氨酸蛋白激酶(JAK)/信号传导子和转录激活子3(STAT3)传导途径的负反馈调节,可能参与AKT的磷酸化,进而调控肿瘤的发生。根据SOCS3蛋白的生物学特性和AKT信号通路的激活途径,综述了SOCS3在AKT信号通路中的调控作用,以期针对SOCS3靶向AKT信号通路进行抗肿瘤研究,为肿瘤的治疗提供一种新的思路。
目的:探讨蛋白激酶B(protein

已经 kinase B,Akt)抑制剂MK-2206对胃癌细胞SGC-7901DNA损伤的影响。方法:不同浓度的MK-2206作用于SGC-7901细胞后,免疫荧光检测细胞内DNA损伤标记分子磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)焦点的生成,Western blot检测DNA损伤相关蛋白的表达水平,同时观察MK-2206对自噬标志蛋白LC3-II表达量的影响,用以确定MK-2206是否促进细胞发生自噬。结果:MK-2206能够诱导SGC-7901细胞发生DNA损伤,促进细胞内γ-H2AX焦点生成,并且激活DNA损伤相关蛋白的表达;MK-2206作用细胞后,LC3-II的生成增加;抑制细胞的自噬显著增强了MK-2206诱导的H2AX磷酸化水平。结论:Akt抑制剂MK-2206能够诱导细胞发生DNA损伤和自噬,抑制自噬促进了MK-2206诱导的DNA损伤。
目的探讨PI3K-AKT信号通路靶向抑制剂AKTiⅣ对慢性粒细胞白血病(CML)急变期细胞K562的影响及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法取处于对数生长期的K562细胞,分别加入0、2.5、5、10μmol/L的AKTiⅣ进行处理,采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,甲基纤维素克隆形成实验检测细胞的克隆形成能力,Western blotting检测K562细胞中p AKT(Thr308)、p GSK-3β(Ser9)蛋白表达情况,荧光定量PCR和Western blotting检测β-catenin及其下游靶基因c-myc、cyclin D1 m RNA和蛋白表达情况。结果 AKTiⅣ作用6、10、16h后,K562细胞的增殖能力以及克隆形成能力明显受抑,且作用10h时抑制效果最好。2.

免疫组织化学染色分析检测结果 ICAM-1及VCAM-1:土黄色区域为阳性信号,主要分布于主动脉内膜,而中膜也有少量表达。NC组主动脉ICAM-1及VCAM-1蛋白表达很低;MS组ICAM-1及VCAM-1表达明显增强;HLJDT组ICAM-1及VCAM-1表达较MS组明显减弱。 以各视野IOD值作为反应ICAM-1及VCAM-1蛋白表达的定量指标结果:与NC组比较,MS组主动脉ICAM-1及VCAM-1表达升高(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组ICAM-1及VCAM.1表达降低(P＜0.01)。 5.实时定量RT-PCR检测结果 与NC组比较,MS组主动脉MMP-2、ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达明显升高(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组MMP-2、ICAM-1、VCAM-1、IL-6、TNF-αmRNA表达降低(P＜0.01～0.05)。 6.三组大鼠磷酸化p38MAPK、ATF-2及MMP-2蛋白表达水平检测结果 与NC组比较,MS组主动脉磷酸化p38MAPK、磷酸化ATF-2及MMP-2蛋白表达明显升高(P＜0.01);与MS组比较,HLJDT组磷酸化p38MAPK、磷酸化ATF-2及MMP-2蛋白表达明显降低(P＜0.01～0.05)。 结论 1.MS大鼠存在主动脉肥厚性重构,且主动脉炎症反应增强,这可能是MS血管并发症发生率较高的基础。

2.炎症通过激活p38MAPK,上调MMP-2表达,加速MS大鼠血管重构的发生发展。 3.黄连解毒汤通过抗炎抑制p38MAPK激活,进而减少ATF-2及MMP-2的表达,起到干预MS大鼠主动脉重构的作用。
ADAM 一般 (A Disintegrin And Metalloproteinase)是一类含有七个功能结构域并在细胞间相互识别和相互作用中发挥重要作用的跨膜糖蛋白家族。ADAM15作为该家族唯一在去整合素结构域(disintegrin)含有RGD(Arg-Gly-Asp)基序的成员,在细胞外基质降解、细胞粘附、细胞内信号转导和肿瘤的病理变化等过程中发挥重要作用,但是其抗肿瘤机理需进一步阐释。本文在成功获取高表达水平的重组人ADAM15去整合素结构域蛋白片段(rhddADAM15)的基础上,以小鼠黑色素瘤细胞(B16)为研究模型,研究rhddADAM15对B16细胞体外增殖、粘附和迁移等细胞行为的影响,通过筛选rhddADAM15特异结合的12肽以及rhddADAM15在B16细胞上相互作用的靶点蛋白,探讨rhddADAM15干预肿瘤细胞行为的生理机制。主要研究结果如下: 哪里 1)为获得大量具有生物活性的rhddADAM15蛋白,在详尽分析目标蛋白的cDNA序列的基础上,(1)选择能为大肠杆菌稀有密码子提供额外tRNA的大肠杆菌Escherichia coli Rosetta(DE3)作为宿主菌,将目标蛋白以GST(Glutathione-S-transferase)融合蛋白形式表达,在最佳诱导表达条件下融合蛋白GST-ADAM15浓度为298 mg/L,最佳凝血酶酶切条件下,rhddADAM15浓度为42 mg/L; (2)采用PCR体外定点突变技术将凝血酶识别序列附近稀有密码子GGA(Gly)替换为GGC,同时消除Pro-Glu-Phe残基,构建突变表达质粒,提高凝血酶酶切效率。在相同的表达和酶切条件下获得GST-△-ADAM15和rhddADAM15蛋白浓度分别为326

mg/L和68mg/L,比野生型分别提高9.4%和61.9%。这一结果表明,在充分认识目标蛋白特性的基础上定向选择表达宿主并改造表达质粒能实现外源蛋白高水平表达; 2)采用MTT法测定rhddADAM15对B16、MCF-7/W以及HMEC-1细胞体外增殖的作用,采用创伤愈合实验、Matrigel基质胶以及Transwell侵袭小室法观察rhddADAM15对B16细胞体外迁移、粘附和侵袭的影响;采用台盼蓝染色法分析细胞活力、流式细胞仪检测rhddADAM15对B16细胞周期的影响。结果表明rhddADAM15对肿瘤细胞和正常内皮细胞生长均有一定的抑制作用(其IC50分别为9.5、11.8和14.9μg/mL),且明显抑制B16细胞的体外增殖、迁移、粘附和侵袭。台盼蓝染色法表明低剂量的rhddADAM15并不能导致B16细胞出现坏死,且rhddADAM15并不导致B16细胞出现典型的凋亡峰,而是将细胞阻滞于G2/ M期,并且这种作用呈剂量依赖关系; 3)采用亲和甄别磁珠技术筛选rhddADAM15在B16细胞上的结合蛋白。将rhddADAM15采用蛋白生物素化方法标记生物素,借助生物素-亲和素系统,将生物素化的rhddADAM15固定于亲和素标记的免疫磁珠。从B16细胞裂解液中钓出与之相互作用的蛋白,经浓缩富集后,采用双向电泳分离技术分离获得主要的结合蛋白点,然后对这些蛋白点进行电喷雾串联质谱技术(ESI-MS)分析,在蛋白数据库中检索,共鉴定了8个蛋白质,按功能可分为如下三类:(1)临床应用的肿瘤标志物(苹果酸脱氢酶、磷酸甘油醛脱氢酶和谷氨酸脱氢酶);(2)能量代谢相关蛋白(烯醇酶、磷酸丙糖异构酶、原肌球蛋白和血红蛋白);(3)信号转导通路成员(p38MAPK激酶)等。在此基础上通过分子对接软件molsoft

ICM模拟计算获得rhddADAM15与p38激酶相互作用的最佳模式和重要的结合位点; 4)采用噬菌体展示技术筛选与rhddADAM15特异性相互作用的多肽序列。采用噬菌体随机十二肽库对固定有rhddADAM15的亲和磁珠系统进行生物淘洗,获得4条与rhddADAM15特异结合的12肽。将获得的12肽与蛋白质库进行序列比对,发现细胞周期相关蛋白如Cdc25和p53,信号通路相关蛋白/受体,如整合素αvβ3的胞外区,丝裂原活化蛋白激酶p38α等与所获得的4条12肽具有高度同源性; Sirtuin 抑制剂 5)基于上述研究所获得的rhddADAM15在B16细胞上潜在的靶点蛋白,进一步研究rhddADAM15与p38MAPK激酶的体外相互作用,结合rhddADAM15对B16细胞行为的抑制作用,采用蛋白点杂交和激酶活性测定方法分析rhddADAM15在体外与重组p38激酶蛋白的结合情况,同时研究不同剂量rhddADAM15对B16细胞中p38MAPK激酶磷酸化水平的影响,并观察rhddADAM15对p38激酶活性受到部分抑制的B16细胞的增殖和细胞周期抑制作用的变化。发现:(1)rhddADAM15在离体低温条件下能够和重组p38激酶蛋白结合,但rhddADAM15(0-10μg/mL)在体外对p38MAPK激酶活性没有影响;(2)同样剂量的rhddADAM15作用于B16细胞24 h后,细胞中p38MAPK激酶的磷酸化水平提高(被激活);(3)p38激酶的特异性抑制剂SB203580(0.5 mmol/L)预处理B16细胞30 min后,rhddADAM15对细胞增殖的抑制作用减弱(IC50由未经处理的9.5μg/mL增加到11.4μg/mL),对细胞周期的阻滞作用也减弱(G2/M期细胞比率从未经处理的的28.

1 mg·L~(-1))和高剂量(1.0 mg·L~(-1))LPS处理24 h,检测LDH和SOD活性。在LPS处理前45 min,分别加入p38抑制剂SB203580和ERK抑制剂U0126处理IMR-32细胞,观察MAPK信号系统对神经元CYP2E1表达的影响。采用具有多巴胺能神经元特征的SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞系建立高表达CYP2E1细胞系,并与正常SH-SY5Y细胞同时给予低剂量(0.1

mg·L~(-1))和高剂量(1.0 mg·L~(-1))LPS处理24 h后检测LDH和SOD活性。结果与对照组相比,高剂量LPS处理IMR-32细胞,SOD的活力下降15.0%(P<0.01),LDH上升1.38倍(P<0.01),蛋白水平升高1.19倍(P<0.05)。p38和ERK抑制剂可拮抗高剂量LPS对CYP2E1的诱导作用。低剂量LPS处理CYP2E1高表达SH-SY5Y细胞,LDH的升高幅度较非高表达的对照组上升了1.28倍(P<0.01),SOD活力下降幅度增加了3.53倍(P<0.01);高剂量LPS使得CYP2E1高表达SH-SY5Y细胞LDH的升高幅度较非高表达的对照组上升了1.54倍(P<0.01),SOD活力下降幅度增加了2.17倍(P
目的探索钙卫蛋白(S100A8/A9)、Toll样受体4(TLR-4)及丝裂原活性的蛋白激酶(MAPK)信号传导途径在动脉血栓中的表达及与环氧化酶-2(COX-2)的关系。方法

并且 24只SD大鼠分为实验组和对照组,实验组利用FeCl_3溶液建立颈动脉血栓大鼠模型,对照组注射等量生理盐水。分别于造模后第1、3、7、14日分批处死2组大鼠,每次每组3只。利用ELISA检测大鼠外周血S100A8/A9水平。采用Western blotting对SD大鼠外周血白细胞中COX-2、p-p38 MAPK、TLR-4水平进行检测,并分析各因子水平之间的相关性。利用MAPK抑制剂SB203580对模型大鼠进行干预,观察对COX-2蛋白水平的影响。结果实验组大鼠外周血S100A8/A9水平在造模后第7日达到最高值,第14日回落,且均显著高于对照组相应时间点水平(P
P38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(MAPKS,mitogen-activated 什么 kinase)的一个亚类,有关P38MAPK信号通路在肾缺血/再灌注损伤中与细胞凋亡关系的研究国内外很少。本研究通过检测肾缺血/再灌注不同时间点细胞凋亡及P38MAPK的变化,来揭示肾缺血/再灌注损伤的病理机制。 一、材料和方法 1.实验材料:P38MAPKinase磷酸化抗体、P38MAPKinase特异性抑制剂SB203580、HRP抗体购于Calbiochem公司。TUNEL试剂盒购于博士德生物工程有限公司。60只180g～200g雄性SD大鼠由山西医科大学实验动物中心提供。
目的 探讨丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对转化生长因子(TGF)β1致人腹膜间皮细胞(HPMC)高表达纤连蛋白(FN)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI)1的调控作用。方法 采用胰蛋白酶消化法从人腹膜组织中分离间皮细胞,建立稳定的体外培养模型。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)评估TGF-β1和细胞外信号调节激素(ERK)及p38阻断剂对HPMC的增殖作用。采用酶联免疫双抗夹心法检测HPMC培养液中FN、PAI-1的蛋白质水平。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HPMC细胞内FN、PAI-1mRNA的表达。结果 (1)TGF-β1能刺激HPMC增殖(P<0.05),且呈剂量时间依赖性,加ERK阻断剂组或p38阻断剂组较TGF-β1组有明显抑制作用(P<0.01);加ERK阻断剂组或p38阻断剂组能使上述高表达受到抑制(P
目的:探讨p38信号转导途径在幽门螺杆菌(Hp)诱导胃上皮细胞株MKN45(来源于低分化腺癌)IL-8蛋白分泌中的作用。方法:以特异性p38有丝分裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated

protein kinase,MAPK)抑制剂SB203580与MKN 45作用2 h,Hp标准菌株CCUG17874与MKN 45共同孵育24 h,ELISA法检测IL-8表达产物的量。结果:Hp显著增加了IL-8在胃上皮细胞株MKN 时间 45的分泌,以细菌细胞数比为100时分泌量最高,作用24 h时IL-8量达峰值;经终浓度为0.3、1、3、10μmol/L的SB203580作用后,Hp诱导的胃上皮细胞IL-8蛋白的分泌分别减少了28％、49％、60％、76％。结论:Hp诱导胃上皮细胞株MKN45分泌IL-8,MAPK抑制剂明显地抑制该分泌作用,提示该分泌作用可能依赖于p38信号转导途径。
目的:研究p38激酶在绿茶提取物中的表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-Epigallocatechin-3-gallate,EGCG]抗晶状体上皮细胞增殖机制中的作用。 方法:用噻唑蓝比色法(MTT比色法)研究p38的特异性抑制剂SB203580对EGCG抑制晶状体上皮细胞增殖作用的影响;用Western Blot法研究EGCG对p38激酶的磷酸化和非磷酸化水平的影响。 结果:(1)预先加入25μmol/L,50μmol/L的SB203580孵育1h后,100μmol/L EGCG对晶状体上皮细胞增殖的抑制率低于对照组,但这种差别没有统计学上的意义(P>0.

天然小分子化合物鹅不食草有效成分6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)对肺癌细胞的作用,及对表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor, EGFR)印制剂吉非替尼的增效作用。吉非替尼(Gefitinib)是1990年发现的一种表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(Epidermal

growth factor receptor inhibitor, EGFR-TKI),之后的研究发现吉非替尼具有抑制肺癌细胞的生长、转移和血管生成,并且有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,适用于治疗以前接受过化学治疗的局部晚期以及转移性非小细胞性肺癌。基于现有的临床研究结果,吉非替尼对于那些适用的病例有很好的治疗效果,然而因为吉非替尼是激酶抑制剂的原因,所以长时间使用极其容易产生抗药性以及副作用,因此在使用吉非替尼的时候经常需要停药很长时间或者和其他药物一起使用。6-氧-当归酰多梗白菜菊素(6-O-angeloylplenolin,6-OAP)是从鹅不食草中提取的一种倍半萜类小分子化合物,研究发现其对多种肿瘤具有抑制作用。实验室的前期研究发现6-OAP靶向SCF复合物诱导细胞周期G2/M期阻滞的分子机理,并且具有适应的药代动力学特征。进一步我们发现6-OAP对多种肺癌细胞系具有抑制作用,并且在小鼠模型上也具有显著的抗癌效果,前期研究发现其对多种肿瘤具有抑制作用,并且可以增加地塞米松对骨髓瘤的敏感性。因此,我们探索了6-OAP与吉非替尼联合使用是否会克服吉非替尼的耐药性。吉非替尼是表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂,抑制其下游信号通路,6-OAP通过作用于SCF复合物也作用众多的细胞通路,通过对比发现6-OAP与吉非替尼的联合用药比两药单独使用有更好抑制细胞增殖的效果,使用软件计算协同指数。因此我们选用肺腺癌细胞系A549细胞作为我们研究的主要对象,发现6-OAP与吉非替尼的联合使用可以明显的抑制晓得侵袭转移的能力,并且有明显的统计学意义,进一步研究发现6-OAP联合吉非替尼可以明显下调p-AKT、p-ERK等蛋白的水平,增强吉非替尼的抗肺癌作用,为吉非替尼耐药的病人提供了新的治疗可能,为中医药联合西药治疗癌症增加了可能。2.西药治疗疾病的优势是作用机制比较清楚,针对的病症也比较清楚,而中医药的优势在于经过数千年的传承,对于治疗疾病有着自己一整套的完整体系,而具体的作用机制不清楚,这阻碍了中医药在全世界范围内的认可。因此筛取中药中的有效成分是刻不容缓,实验室中拥有众多中药提取物,我们使用多种癌症细胞用来筛取中药中可以抗击癌症细胞系的提取物。我们发现多种抗击癌症的活性成分,Evo是我们近期发现的一个新的天然小分子化合物,初步的研究发现Evo能抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞在G2/M期阻滞,后续的研究正在进行中。
沙门菌是一种革兰氏阴性兼性细胞内的细菌病原体,具有广泛的宿主谱,在全球范围内感染病例中均表现出有较高的发病率和死亡率。沙门菌的致病性主要依赖于其侵袭细胞及在细胞内生存的能力。而这又依赖于其两个毒力岛SPI-1及SPI-2编码的两个III型分泌系统(T3SS)。T3SS具有分泌和转导多种细菌毒力因子进入宿主细胞的功能。Sop 许多 NSC 23766浓度 B是SPI-1重要的分泌毒力因子,具有肌醇磷酸酶活性,在沙门菌侵入过程中可诱导多种磷酸肌醇的去磷酸化作用。Sop

B已经被证明在侵染过程中影响多种细胞通路,包括细胞膜褶皱形成及抑制SCV与溶酶体的融合等。目前,对于Sop B功能的研究主要关注于其在沙门菌侵染及胞内存活过程中的作用。虽然有研究表明Sop B能够影响多种对炎性反应有调控作用的细胞信号通路,但Sop B是否影响炎性反应的报道仍不多见。炎性体是天然免疫系统的重要组成部分。炎性体是一种多蛋白复合体,在感染或应激条件下,促进促炎细胞因子成熟释放。炎性体组成包括:受体,接头蛋白及效应因子caspase-1。PRRs,包括NLR家族及ALR家族等都能启动炎性体的组装。活化的NLR或ALR促进ASC的聚集,而ASC的聚集招募caspase-1进入ASC斑点,启动caspase-1的自溶性活化,从而诱导的IL-1β及IL-18的蛋白水解过程。作为宿主重要的防御机制,炎性体的活化受到多种因素的严格调控,例如:受体的自抑制及修饰作用。病原同样可以利用毒力因子抑制炎性体功能,从而达到免疫逃逸的目的。既然,Sop B蛋白在沙门菌侵染及维持胞内存活都具有重要的作用,其是否影响沙门菌诱导的炎性体活化。因此,本研究利用λRed重组系统对沙门菌SL1344进行Sop 购买17-AAG B编码基因的敲除,并以低拷贝的p STV28为表达载体分别构建了全长sop B基因回补质粒及sop B突变回补质粒。随后,将回补质粒电转至△Sop B菌株中,由此成功获得三株重组菌株,包括△Sop B::Vect,△Sop B::Sop B及△Sop B::C460S。炎性体活化试验中,为了探究Sop B蛋白是否影响沙门菌诱导的炎性体。应用ELISA方法检测Sop B对沙门菌诱导的IL-1β进行测定,LDH的释放分析细胞死亡,并应用Western

blot分析caspase-1、IL-1β、AKT的活化情况及ASC寡聚化水平。免疫荧光分析ASC斑点形成水平等。结果显示沙门菌毒力因子Sop B通过诱导AKT信号活化显著抑制沙门菌诱导的炎性体活化。
研究背景:乳腺癌是目前中国女性最常见的恶性肿瘤,也是全世界肿瘤致死的首要原因。三阴性乳腺癌是指免疫组织化学染色显示雌激素受体、孕激素受体和人类表皮生长因子受体2均为阴性的一种特殊的乳腺癌。三阴性乳腺癌约占乳腺癌的12-17%,比非三阴性乳腺癌的侵袭性更强、复发转移更早,在转移性乳腺癌中生存率更低,预后更差。此外,由于三阴性乳腺癌对内分泌治无反应,目前治疗主要以手术为主,辅以全身性化疗,但该肿瘤异质性大,临床预后差,寻找有效的分子指标和治疗靶点已迫在眉睫。LETM1蛋白是一种在人类及酵母中都较为保守的线粒体内膜蛋白,它能减少线粒体的生成及ATP的产生。其表达水平的异常能诱发线粒体功能的紊乱,从而导致包括肿瘤等人类多种疾病的发生。在人类众多恶性肿瘤中都发现LETM1蛋白表达水平显著升高,但是LETM1过表达在三阴性乳腺癌中的临床病理特点和预后意义仍不清楚。本研究旨在探讨LETM1蛋白过表达在三阴性乳腺癌中的临床预后评估意义。材料与方法:选取组织标本共214例,其中包括107例三阴性乳腺癌,42例导管内原位癌,65例癌旁正常组织。首先,应用细胞免疫荧光染色检测方法分析LETM1蛋白在MCF-7乳腺癌细胞中的定位情况。然后采用免疫蛋白印迹方法在三阴性乳腺癌组织中对LETM1蛋白进行相对定量,验证LETM1蛋白在三阴性乳腺癌中是否存在过表达。最后,采用免疫组织化学方法检测LETM1蛋白在三阴性乳腺癌、导管内原位癌及正常组织中的表达情况,并分析其蛋白表达在三阴性乳腺癌中的临床病理意义。结果:1.

05)。SKOV3与巨噬细胞共培养后B7-H1的表达升高(P
间充质干细胞(MSCs)是一种多潜能成体干细胞,在体外诱导剂的作用下能向成骨细胞分化。在MSCs向成骨细胞分化过程中,受到MAPKs、BMPs、Notch和Wnt等多种信号通路的调控。其中MAPKs信号通路研究比较深入,近年来研究表明,在MAPKs信号通路的5种途径中,ERKs、p38MAPK和JNKs途径参与了成骨细胞增殖和分化的信号转导。现对MAPKs通路与其参与的MSCs增殖和成骨分化过程简要综述。
骨质疏松症是一种中老年人易患的骨骼性疾病,目前骨质疏松症的治疗方法主要有物理疗法、药物疗法和运动疗法等,相比其他几种方法,物理疗法具有较小副作用的优点,然而现有的关于物理疗法的研究仅仅是对低频脉冲电磁场疗法、超短波疗法、体外脉冲疗法和联合疗法中的一种进行研究,因此,具有一定的局限性,并不能充分、全面地体现现有物理治疗方法的研究工作进展。因此,为了更全面阐释物理治疗方法的相关研究工作,笔者分别从低频脉冲电磁场疗法、超短波疗法、体外脉冲疗法和联合疗法等方面加以总结,并着重阐释了低频脉冲电磁场疗法,描述了其治疗机理,从骨密度、骨组织形态和生物力学特性等方面对其治疗效果进行评价。同时,对其他物理疗法进行了大致说明。
骨关节炎是一种以关节软骨破坏、软骨下骨的硬化和滑膜反应为特征的慢性疾病。目前发现甲状旁腺激素(Parathyroid

C59 wnt细胞系 hormone,PTH)能够抑制骨关节炎患者软骨细胞终末期成熟分化,有明显软骨保护、延缓骨关节炎进展的作用。通过研究PTH、PTHR与骨关节炎的关系,对骨关节炎治疗及预后将起到重要的指导作用。
①目的探讨骨关节炎(Osteoarthritis,OA)中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的表达及其意义。②方法采用免疫组织化学技术检测60例OA患者及20例正常对照组膝关节软骨与滑膜中磷酸化p38(P-p38)、NF-κB P450 抑制剂 p65的表达,并进行相关性分析。③结果 P-p38、NF-κBp65蛋白在实验组阳性表达的积分光密度(IOD)值均显著高于正常对照组(P
目的研究匹格列酮对各种应激条件下肾小球系膜细胞的保护作用,进一步探讨匹格列酮保护糖尿病肾病的作用机制。方法分别以高葡萄糖、糖基化终产物和过氧化氢孵育大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cells,MCs);以p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路特异性抑制剂SB203580和匹格列酮(pioglitazone,PO)分别预处理RMCs,再给予上述3种刺激因素孵育RMCs,观察RMCs中磷酸化p38MAPK、核因子(NF-κB)和转化生长因子(TGF-β)蛋白表达。结果与各刺激组相比,匹格列酮预处理的肾小球系膜细胞p38MAPK、NF-κB和TGF-β蛋白表达水平降低。结论匹格列酮对肾小球系膜细胞具有一定的保护作用,保护机制可能与其抑制p38MAPK信号通路激活及减少NF-κB、TGF-β的表达相关。
越来越多的研究发现,在人类多种原发和浸润性肿瘤中检测到S100A9的高表达。S100A9/S100A8已被证实参与调控细胞增殖和肿瘤转移等过程。目前已知很多肿瘤可以影响该二聚体的表达,但是在不同来源的肿瘤发生过程中,S100A9的表达情况各异,也具有组织器官特异性,可能由于S100A9蛋白在不同肿瘤细胞中的作用及其机制不同。了解S100A9在癌症中的表达及其机制,可为寻找新的生物标志物和治疗靶点提供依据,在消化系统恶性肿瘤早期诊断、治疗及判断预后等方面具有重要意义。本文就S100A9蛋白在消化系统恶性肿瘤中的表达及其机制方面的研究进展进行
目的:观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)是否能够诱导小鼠B细胞活化及其机制。方法:SEA和脂多糖(LPS)分别体外刺激小鼠脾脏CD19+B细胞,72

h后用流式细胞术分别检测B细胞表面CD80、CD86及CD40的表达和B细胞细胞周期的改变;用荧光染料CFSE分裂法检测B细胞增殖;用ELISA法检测培养上清中白介素(IL-)10、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。同时利用ERK、JNK、p38MAPK和NF-κB信号转导抑制剂检测B细胞分泌细胞因子水平的变化。结果:SEA与LPS组可以活化小鼠脾脏CD19+B细胞,使其表面高表达CD80、CD86和CD40;同时诱导S/G2期的B细胞比例显著增加,SEA可以诱导B细胞增殖。SEA与LPS能刺激脾脏CD19+B细胞分泌高水平的IL-10、IL-6。分别阻断NF-κB、ERK、JNK和p38MAPK信号转导通路后可以抑制B细胞IL-10和IL-6的分泌。结论:SEA可以上调小鼠脾脏B细胞表面共刺激分子表达、促进其增殖。同时,SEA可以通过NF-κB、ERK、JNK和p38MAPK信号转导通路刺激小鼠B细胞分泌细胞因子。
血管抑制因子是由嗜铬颗粒蛋白A的N端氨基酸序列经蛋白酶水解作用衍生而来的具有多种生物学活性的多肽。血管抑制因子可参与多个生理、病理过程,包括抑制血管收缩,拮抗肾上腺素能的心脏兴奋作用,保护心肌缺血/再灌注损伤,调节内皮屏障功能,构成天然免疫防御屏障及调节血管新生等。血管抑制因子在心血管系统中的调节作用备受关注,但仍有诸多的未知,研究工作尚需继续。
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目的观察不同吸烟时间大鼠支气管上皮细胞铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn

或者 SOD)和激活蛋白-1(AP-1)mRNA及其蛋白的表达水平以及二者的相关性,探讨激活蛋白-1(AP-1)在吸烟所致慢性阻塞性肺疾病(COPD)氧化/抗氧化失衡中的作用。方法自制大鼠实验性被动吸烟装置,建立吸烟引起慢性阻塞性肺疾病的动物模型,将40只大鼠随机分为不吸烟组、吸烟1月组、吸烟2月组、吸烟3月组,每组各10只。分别采用免疫组织化学法和原位杂交半定量技术检测支气管上皮细胞Cu-Zn SOD和AP-1(c-fos和c-jun)mRNA及其蛋白的表达水平。结果吸烟3月组大鼠出现了肺气肿的病理改变。吸烟各组大鼠支气管上皮细胞c-fos、c-jun mRNA及其蛋白的表达水平均较不吸烟组明显增高,差异有显著性(P<0.01),吸烟各组间比较差异亦有显著性(P<0.

There is preclinical data to support inhibition of the pathway, and phase Ⅰ to Ⅲ trials involving inhibitors of the pathway have been or are being conducted in solid tumors and breast cancer. Everolimus, an mTOR inhibitor, is 已经 currently approved for the treatment of hormone receptor(HR)-positive, human epidermal growth

factor receptor 2(HER2)-negative breast cancer. In this review, we summarise the efficacy and toxicity findings from the randomised clinical trials, with simplified guidelines on the management of potential adverse effects. Education of healthcare professionals and patients is critical for safety and

compliance. While there is some clinical evidence of activity of mTOR inhibition in HR-positive and HER2-positive breast cancers, the benefits may be more pronounced in selected subsets rather than in the overall population. GDC-0994供应商 Further development of predictive biomarkers will be useful in the selection of patients who will benefit from inhibition of the PI3K/Akt/mTOR(PAM) pathway.
2015年RSNA大会中,乳腺影像学是其重要组成部分。乳腺论文方面在论文数量方面较往年明显增加,且有更多新的技术和进展在乳腺检查中得到应用。和往年相比内容有如下方面的特点和热点:1乳腺对比增强光谱X线成像是今年研究的一个热点,乳腺断层摄影(DBT)方面的论文数目是较往年明显增多;2MRI的研究内容出现新的进展,主要是DKI和高时间/空间分辨率序列(TWIST VIBE)的应用;3核医学方面论文主要集中在PET-MRI的新进展;4超声方面主要研究了其在检测乳腺肿瘤的生物学行为的潜在价值,但论文数目不多。
磷脂肌醇(PI3K)-蛋白激酶B(PKB,Akt)-雷帕霉素靶体蛋白(mTOR)通路抑制剂耐药现象的出现,与其上下游相关联的其他癌蛋白信号通路的反馈机制密切相关。目前已经报道的有关PI3K-Akt-mTOR通路抑制剂耐药机制,基本上可以分为与FOXO和激素受体相关,依赖于MYC,依赖于β-catenin,依赖于JAK/STAT通路,依赖于MAPK通路,及与AXL相关的耐药机制。PI3K-Akt-mTOR通路抑制剂的耐药,极大地影响了该类小分子靶向药物在临床上的使用,通过对其耐药性产生的机制进行探讨和总结,为临床上和其他药物联用克服该类靶向药物耐药提供策略。
越来越多的分子靶向治疗药物广泛用于妇科恶性肿瘤的临床治疗,尤其是卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌等常见妇科恶性肿瘤。本文阐述针对各种妇科恶性肿瘤,尤其是卵巢癌的临床研究。各种研究表明:以细胞凋亡调控因子、细胞生长的信号转导途径、细胞周期调节蛋白等为靶点的靶向治疗药物,作用力强、副作用小,在妇科恶性肿瘤的治疗中发挥重要作用的,已成为一个重要的研究方向。
磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol

INCB024360溶解度 3-kinase,PI3K)-蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)-雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)信号通路与细胞的生长、增殖、分化、凋亡、代谢等密切相关,在多种实体肿瘤中已发现该信号通路的异常。近年来,以抑制该通路特定位点的靶向治疗已成为抗肿瘤的研究热点。许多该位点新型抑制剂也已进入淋巴瘤的临床试验中,本文就该通路在淋巴瘤中的活化状态及各个分子靶点抑制剂的研究进展做一综述。
肺癌的全称为原发性支气管肺癌,是目前世界范围内死亡率最高的恶性肿瘤。在我国,随着人口老龄化和空气污染等生活环境的变化,肺癌的发病率持续升高,发病率和死亡率在恶性肿瘤中均居首位。全国肿瘤登记中心2014年发布的数据显示,2010年我国新发肺癌病例60.59万。肺癌最主要的病理类型包括小细胞肺癌和非小细胞肺癌,其中非小细胞肺癌占肺癌总数的80%~85%。非小细胞肺癌的主要
Since the discovery that non-small cell lung cancer(NSCLC) is driven by epidermal growth factor receptor(EGFR) mutations, the EGFR tyrosine kinase inhibitors(EGFR-TKIs, e.g., ge fi tinib and elrotinib) have been effectively used for clinical treatment. However, patients eventually develop drug resistance.

05)。联合MK-2206可明显降低阿霉素对两种细胞IC50值,但MCF-7/ADR细胞的降低程度明显大于MCF-7细胞(P0.05)。单独MK-2206处理后,MCF-7细胞p-(Thr308)Akt蛋白表达明显下调(P0.05);MCF-7/ADR细胞以上两种蛋白的表达均明显下调(均P
子宫内膜癌是常见的女性恶性生殖道肿瘤,其晚期或复发患者的预后仍然较差。近些年新出现的靶向治疗已成为晚期或复发子宫内膜癌的重要治疗手段。PI3K/Akt/mTOR信号通路在子宫内膜癌的发生发展过程中起着重要的调节作用,抑制该通路有效位点的靶向治疗可能提高晚期或复发子宫内膜癌的治疗效果。但目前针对该信号通路的药物研究仍处于初步阶段,仍需要更多的临床试验加以明确疗效。
脑胶质瘤病(GC)是一种病因未明的罕见颅内原发性肿瘤,呈弥漫性、浸润性生长,但保存脑组织的大体结构是其主要特征;其临床症状复杂多样,影像学表现特异性不强,只有通过病理学检查方能确诊。由于GC的特性,手术、化疗和放疗的疗效均不理想,预后不佳。本文着重阐述了GC的诊断及治疗的新进展,供同道参考。
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The

KRX-0401体外 estrogen receptor(ER) pathway plays a critical role in breast cancer development and progression. Endocrine therapy targeting estrogen action is the most important systemic therapy for ER positive breast cancer. However its efficacy is limited by intrinsic and acquired resistance. Mechanisms responsible for endocrine resistance include deregulation of the ER pathway itself, including loss of ER expression, posttranslational modification of ER, deregulation of ER coactivators; increased receptor tyrosine kinase signaling leading to activation of various intracellular pathways involved in signal

Inhibitor Library transduction, proliferation and cell survival, including growth factor receptor tyrosine kinases human epidermal growth factor receptor-2, epidermal growth factor receptor, PI3K/AKT/mammalian target of rapamycin(m TOR), Mitogen activated kinase(MAPK)/ERK, fibroblast growth factor receptor, insulin-like growth factor-1 receptor; alterations in cell cycle and apoptotic machinery; Epigenetic modificationincluding dysregulation of DNA methylation, histone modification, and nucleosome remodeling; and altered expression of specific micro RNAs. Functional genomics has helped us identify a catalog of genetic and epigenetic alterations 一般 that may be exploited as potential therapeutic targets and biomarkers

of response. New treatment combinations targeting ER and such oncogenic signaling pathways which block the crosstalk between these pathways have been proven effective in preclinical models. Results of recent clinical studies suggest that subsets of patients benefit from the combination of inhibitor targeting certain oncogenic signaling pathway with endocrine therapy. Especially, inhibition of the m TOR signaling pathway, a key component implicated in mediating multiple signaling cascades, offers a promising approach to restore sensitivity to endocrine therapy in breast cancer. We systematically reviewed important publications cited in Pub Med, recent abstracts from ASCO annual meetings and San Antonio Breast Cancer Symposium, and relevant trials registered at Clinical Trials.gov. We present the molecular mechanisms contributing to endocrine resistance, in particular focusing on the biological rationale for the clinical development of novel targeted agents in endocrine resistant breast cancer.

人绒癌细胞系JEG-3生长在含10%的胎牛血清，2mmol/L谷氨酰胺，1mmol/L丙酮酸钠，100U/ml青霉素和100U/ml链霉素的RPMI-1640培养基中，置于37℃，5%CO2培养箱中培养，每2-3d换液一次。当细胞长至70-80%左右时用0.02%EDTA和0.25%胰酶消化液按1:3的比例进行传代。 2.JEG-3细胞以初始浓度为5×104个/mL接种于24孔板，置于37℃，5%CO2培养箱中培养，次日换以无血清的RPMI-1640饥饿培养12h。将细胞分为空白对照组，2h

TGF-β1刺激组，6h TGF-β1刺激组。培养终止前2h和6h分别给予不同组细胞5ng/ml的TGF-β1刺激，空白对照组除外。每组设置3个复孔，用免疫荧光染色法对P-Smad的表达及核转位情况进行检测。 3. JEG-3细胞以初始浓度为5×104个/mL接种于6孔板，置于37℃，5%CO2培养箱中培养，次日换以无血清的RPMI-1640饥饿培养12h。将细胞分组设置为6个组，分别为：空白对照组，TGF-β1刺激组，p38抑制剂（SB203580）1μM组，p38抑制剂（SB203580）3μM组， TGF-β1受体阻滞剂（LY364947）1μM组，TGF-β1受体阻滞剂（LY364947）3μM组。培养终止前4h分别给予各抑制剂组细胞相应浓度的TGF-β1受体阻滞剂（LY364947）及p38抑制剂（SB203580）。在终止培养前2h，给予各组细胞5ng/ml的TGF-β1刺激，空白对照组除外。用免疫印迹法检测各组细胞中Smad3以及P-Smad3的蛋白表达水平。 Selleckchem Rigosertib 4. JEG-3细胞以初始浓度为5×104个/mL接种于6孔板，置于37℃，5%CO2培养箱中培养，次日换以无血清的RPMI-1640饥饿培养12h。将细胞分组设置为6个组，分组情况如上所述。培养终止前4h分别给予各抑制剂组细胞相应浓度的TGF-β1受体阻滞剂（LY364947）及p38抑制因子（SB203580）。在终止培养前2h，给予各组细胞5ng/ml的TGF-β1刺激，空白对照组除外。用实时定量PCR法检测smad3的mRNA表达水平。 selleck合成 结果： 1.在对照组中，P-Smad的表达成云雾状主要呈现在胞浆中，少量表达在细胞核。TGF-β1给予2h后，P-Smad3呈现胞浆胞核均表达。在TGF-β1给予6h后，P-Smad3主要表达在胞核，即TGF-β1给予6h，P-Smad3基本完成了由胞浆到胞核的核转位过程。

2．与空白对照组相比，TGF-β1刺激组的Smad3，P-Smad3蛋白表达增高(P<0.05)，而TGF-β1受体阻滞剂（LY364947）1μM组，TGF-β1受体阻滞剂（LY364947）3μM组中随TGF-β1受体阻滞剂浓度的升高，Smad3，P-Smad3的蛋白表达呈浓度依赖性降低(P<0.05)。与TGF-β1刺激组相比，p38抑制剂（SB203580）1μM组，p38抑制剂（SB203580）3μM组中随着抑制因子浓度的升高，Smad3，P-Smad3蛋白的表达亦呈浓度依赖性降低(P<0.05)。与其TGF-β1刺激组相比，随着抑制剂浓度的升高，TGF-β1受体阻滞剂组和p38抑制剂组中Smad3的转录表达水平逐渐降低(P
绒毛膜癌(choriocarcinoma CC)简称绒癌，是一种继发于正常或异常妊娠之后的滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic tumor,GTT)。绒癌分为妊娠性绒癌（gestational choriocarcinoma，GC）和非妊娠性绒癌（non-gestational choriocarcinoma，NGC）两种。转化生长因子β1(transforming growth factor beta1, TGF-β1)是一种多功能多肽类细胞因子，因其能够调节细胞增殖、分化和凋亡，促进细胞外基质(ECM)形成，参与胚胎发育调节等，成为目前研究最多的参与滋养细胞侵入调节的细胞因子。其I型受体（TβR-I）和Ⅱ型受体（TβRⅡ）是跨膜的丝氨酸/苏氨酸激酶，TGF-β1与TβR-I/TβRⅡ结合后，使得下游Smads蛋白磷酸化，继而启动细胞内信号转导，调节细胞核内靶基因的转录而发挥其生物学效应。其中，TGF-β1、TβR或Smads任一环节元件异常，都可以引起TGF-β/Smads信号传导紊乱。

并且 丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-actived protein kinase，MAPK）信号转导通路是细胞内的主要信息传递系统，在人类已鉴定出四条MAPK通路，其中，p38MAPK通路在细胞恶变和肿瘤浸润转移过程中发挥重要作用。参与了调节多种肿瘤细胞中侵袭相关基因的表达。有些学者研究了在皮肤光老化的治疗中以及TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞的纤维化过程中Smad2/3与p38MAPK的相互作用，揭示了在多种疾病的发生机制中两条信号通路间的串话现象。c-myc基因是一种原癌基因，与细胞周期关系密切，一旦被激活，可通过对细胞的增殖作用，参与肿瘤的发生和发展。c-myc癌基因基因定位于染色体8q24，全长6-7kb，含3个外显子，编码蛋白由49个氨基酸残基组成，分子量达64/67kd。c-myc是细胞内多种信号通络下游的靶基因，c-myc蛋白作为转录因子，在调节细胞增殖、分化和凋亡方面发挥重要作用，它的过度表达可促进肿瘤细胞的生长[7]，因此，我们用MTT法观察了5ng/ml TGF-β1在不同作用时间下对绒癌JEG-3细胞的增殖的影响，寻找一个合适的不引起细胞增殖的时间点，用不同浓度的TGF受体Ⅰ、Ⅱ抑制剂（LY364947）和p38MAPK抑制剂（SB203580）作用JEG-3细胞，并通过qRT-PCR法检测JEG-3细胞中c-myc及TβRⅠ、 TβR Ⅱ mRNA的差异表达，以期进一步揭示绒癌的生物学转化机制。 目的：通过qRT-PCR法检测JEG-3细胞中c-myc及TβRⅠ， TβR ⅡmRNA的表达差异，以期探讨绒癌中TGF-β1介导的Smads与p38MAPK信号转导的相互作用，从而更深一步地揭示绒癌的恶性转化、侵袭和转移的分子机制。 方法：体外常规培养绒毛膜癌JEG-3细胞系，当细胞达到80%融合度后，用0.25%胰蛋白酶（含0.

1RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路中Wnt5a的mRNA表达 Wnt5a是Wnt/Ca2+信号通路是一种重要的起始蛋白，在正常大鼠肝脏细胞中含量很少，几乎不表达。虽然Wnt与不同的受体结合后，能够激活不同的Wnt通路，包括经典Wnt通路，但在本实验中，Wnt经典通路激活后，通过RT-PCR显示，各组Wnt5a的mRNA相对表达量与对照组相比无明显差异，无统计学意义。 2.2RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路中Frizzed2的mRNA表达 Frizzed2是Wnt信号通路的中一种跨膜受体蛋白， Wnt5a与其结合后激活Wnt/Ca2+信号通路，在正常大鼠肝脏细胞中表达很少，几乎不表达。通路RT-PCR测其在SB21676320μM、10μM、肝复康药物血清治疗组、肝复康加SB216763的mRNA相对表达量与正常血清对照组相比无明显变化。 2.3RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路中CAMKII的mRNA表达 CAMKII是Wnt/Ca2+信号途径下游一种关键的蛋白激酶，在正常大鼠肝脏细胞表达微量，几乎不表达。通过RT-PCR检测CAMKII在各组的mRNA相对表达量，发现与正常血清对照组相比没有表达差异，无统计差异性，说明在使用SB216763后，Wnt/Ca2+信号途径可能没有受到Wnt/β-Catenin信号通路的影响而发生相应的改变。 2.4RT-PCR检测Wnt/Ca2+信号通路MMP-7的mRNA表达 MMP-7在正常大鼠肝脏细胞中表达很少，几乎不表达。在RT-PCR检测结果中，虽然与正常血清对照组相比，SB21676320μM组中的mRAN表达相对量增加，但是差异没有有显著性。在其它三组SB21676310μM、肝复康药物血清组及肝复康加SB21676320μM中的mRNA相对表达量均无明显变化。

selleckchem 3Western-blot检测实验结果 MPP-7在正常肝脏组织细胞很少表达，几乎不表达。与正常血清组相比SB21676320μM增多较为明显，10μM及肝复康、肝复康加SB216763组表达则无明显差别，且表达均不明显，与RT-PCR的实验结果一致，这可能与其复杂的表达调控有关。 结论： 1、Wnt/β-catenin信号通路激活后，可上调大鼠HSC-T6细胞活性；肝复康对活化的大鼠HSC-T6细胞有一定的抑制作用。 2、Wnt/β-catenin信号通路激活后，Wnt/Ca2+信号通路可能不受相关影响。
背景 精神分裂症(Schizophrenia, SZ)是一种慢性致残性精神疾病。与成年起病的患者比较,儿童精神分裂症患者有更显著的遗传因素和更明显的神经发育障碍,多起病缓慢,治疗效果更差,精神残疾的发生率更高。越来越多的研究显示神经发育障碍在精神分裂症发病中起重要作用,这种发育障碍可表现为脑结构及功能的异常。神经系统软体征(Neurological

soft signs, NSS)是轻微的脑功能障碍体征,与精神疾病的异常神经发育有关,被认为是精神分裂症的内表型特征。精神分裂症断裂基因1(Disrupted-in-Schizophrenia-1, DISC1)是精神分裂症的易感基因,在神经元增殖、分化、迁移和成熟过程中起重要作用。 目的 1.调查儿童精神分裂症患者神经系统软体征的发生状况。 2.分析儿童精神分裂症患者神经系统软体征与颅脑结构的关系。 3.探索儿童精神分裂症患者神经系统软体征、颅脑结构与DISCI

这个 rs4658971多态性的关联。 4.探讨DISCI rs4658971多态性与儿童精神分裂症的关联。 方法 1.用剑桥神经科检查(Cambridge Neurological Inventory, CNI)软体征测试分量表(soft signs assessment subscale)评估192例儿童精神分裂症患者的神经系统软体征,用196名性别、年龄与患者相匹配的健康儿童(儿童对照组)作对照。 2.在磁共振成像(Magnetic resonance imaging, MRI)下测量307例儿童精神分裂症患者(病程≤24个月)的颅脑结构,测量径线包括：三脑室横径宽度、三脑室侧壁至左右脑岛面距离、侧脑室前角间最大距、侧脑室体最大距、左右颞角宽度、左右外侧裂脑沟根部宽、额叶脑沟宽、顶叶脑沟宽、纵裂宽度、左右尾状核头宽度和胼胝体厚度。 3.用聚合酶连反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测445例儿童精神分裂症患者(患者组)DISC1单核苷酸多态性(Single neucleotide polymorphism,SNP)位点rs4658971的多态性,用432名健康人(健康对照组)作对照。 PHA-739358研究购买 4.用阳性和阴性症状量表(Positive and Negative Symptom Scale, PANSS)评定445例儿童精神分裂症患者的精神症状。 5.用χ2检验比较患者组与儿童对照组之间及不同基因型患者之间NSS各条目阳性检出率、患者组与健康对照组之间的DISC1rs4658971基因型频率及等位基因频率的差异；用Spearman等级相关(用rs表示相关系数)分析患者组神经系统软体征评分与颅脑结构测量值及PANSS评分之间的相关性；用Pearson相关(用r表示相关系数)分析颅脑结构测量值与PANSS评分之间的相关性；用非参数检验(Mann-WhitneyU检验)比较患者组与儿童对照组之间、不同基因型患者之间NSS评分的差异；用协方差分析(年龄作为协变量)比较不同基因型患者之间颅脑结构测量值的差异；用t检验比较不同基因型患者之间PANSS评分的差异。检验水准α为0.05,双侧检验。为尽量避免由于因子较多造成的多重比较错误的发生,进行多重检验校正。 结果 1.儿童精神分裂症患者与儿童对照组之间NSS比较 (1)患者组及儿童对照组NSS各条目的阳性检出率分别为7.8%-66.7%,2.6%-34.7%。χ2检验结果显示,患者组的左右对指运动(χ2=16.98,5.18)、左右序列对指运动(χ2=25.25,13.82)、左右轮替运动(χ2=17.59,15.91)、左右拳手掌测验(χ2=37.26,39.67)、Oseretsky测验(χ2=32.03)、右手指感觉测验(χ2=4.36)、左右皮肤书写感测验(χ2=24.12,12.97)、右侧镜像运动1(χ2=4.88)、扫视时头移动(χ2=6.25)、眼睛闪烁(χ2=8.