5年,有效地改善预后。但是,靶向治疗在使我们受益的同时也给我们带来一定困扰,其毒副反应不可忽视,严重者可导致治疗终止。皮肤毒性、胃肠道毒性、心血管毒性是临床最常见不良反应,其次还包括血栓栓塞、胃肠道穿孔、肝毒性、蛋白尿、神经系统毒性、呼系统毒性、甲状腺功能减退等少见不良反应。对毒副反应的治疗西医目前尚未达到满意效果,临床研究证实,我们应当尽早在治疗的全过程中介入中医药手段,控制毒副作用,最大限度发挥靶向药物对肿瘤的抑制作用,才能给患者带来最多的生存效益。目的：观察养肺消疹方治疗肺癌靶向药物所致皮疹的临床疗效,本观察涉及的靶向药物为吉非替尼(Gefitinib易瑞沙)、厄洛替尼(Tarceva特罗凯)、埃克替尼(Icotinib凯美纳)、克唑替尼(Crizotinib赛可瑞)。观察患者皮疹分级、中医症候积分、皮肤病患者生活质量评分及肿瘤标志物变化,同时对本方进行安全性评价。方法：将入选的80例因服用吉非替尼、厄洛替尼、艾克替尼、克唑替尼而致皮疹的患者随机分为2组,其中治疗组40例,对照组40例,治疗组给予养肺消疹方口服联合外用治疗,对照组采用氢化可的松乳膏外涂治疗。两组患者均进行为期14天的治疗,追踪观察14天,30天为1治疗周期。在治疗前及治疗后,根据1ASCC

寻找更多 (Multinational Association of Supportive Care in cancer skin toxity study group)分级系统对患者的皮肤毒性进行分级,评价患者的中医症候积分,根据皮肤病生活质量指数(Dermatology life quality index DLQI)评价患者的生活质量,记录患者肿瘤标志物变化。1周期结束后,采用SPSS20.0进行数据统计。结果：经统计学分析,30天后治疗组与对照组的皮疹分级、中医症候积分、生活质量评分均有所下降,两组治疗后在皮疹分级上有差异(P<0.05),治疗组疗效优于对照组,皮疹分级疗效评价中治疗组总有效率为75%,对照组总有效率为55%。两组中医证候评分对比,统计学具有显著性差异(P<0.01),治疗组中医证候疗效明显优于对照组。两组生活质量评分对比,统计学显示具有显著性差异(P0.05)。
目的1采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative

有 real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术分别检测119例非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者原发灶及71例转移灶组织中EML4-ALK (echinoderm microtubule-assciated protein-like4 anaplastic lymphoma kinase, EML4-ALK)融合基因阳性表达情况。2对其中15例既有原发灶癌组织又有转移灶癌组织的NSCLC患者,同时检测NSCLC原发灶和转移灶组织中EML4-ALK融合基因,探讨表达一致性情况。3结合患者的基线资料,分析NSCLC原发灶组织和转移灶组织中EML4-ALK融合基因阳性表达情况与临床病理、血清血管内皮生长因子(vascular Selleckchem Galunisertib endothelial growth factor, VEGF)含量水平之间的关系。方法1收集2013年2月至2014年11月北京军区总医院、中国人民解放军总医院附属304医院经病理学确诊的119例NSCLC患者原发灶及71例转移灶新鲜组织或者石蜡组织标本,其中对15例患者既收集了原发肺组织标本也收集了转移灶组织标本。同期收集所有患者(除去配对的15例,共175例)的血清标本。2利用qRT-PCR技术分别对119例NSCLC原发灶及71例转移灶组织中EML4-ALK融合基因的阳性表达情况进行检测,分析患者的临床病理特征与EML4-ALK融合基因的阳性表达是否有关。3采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked

immunosorbent assay, ELISA)检测175例NSCLC患者血清VEGF含量,分析EML4-ALK融合基因状态与血清VEGF的关系。结果1 NSCLC患者原发灶及转移灶肿瘤组织中EML4-ALK融合基因阳性表达情况175例NSCLC患者组织标本中,13例呈EML4-ALK融合基因阳性,阳性率为7.4%(13/175)。119例NSCLC原发灶组织中检测出10例EML4-ALK融合基因表达阳性,阳性率为8.4%(10/119)。71例NSCLC转移灶组织中检出5例EML4-ALK融合基因表达阳性,阳性率为7.1%(5/71)。转移灶组织中包括40例淋巴结组织,10例脑组织,10例骨组织,8例体表软组织,1例肝组织,1例结肠组织以及1例胸膜组织,其中淋巴结、骨、脑和胸膜组织中检测出融合基因,其阳性表达率分别为2.5%(1/40)、20%(2/10)、10%(1/10)、和100%(1/1)。2 NSCLC患者原发灶及转移灶组织中EML4-ALK融合基因状态与患者临床病理特征的关系(1)119例NSCLC患者原发灶组织中EML4-ALK融合基因阳性率在吸烟组和不吸烟组中分别为1.8%和14.3%(P=0.034),在腺癌组和非腺癌组分别为14.1%和1.9%(P=0.044),两者差异均有统计学意义；在男性组和女性组中分别为5.1%和11.7%(P=0.335)；在年龄>60岁组和年龄≤60岁组分别为6.6%和10.3%(P=0.679)；在低分化组和中高分化组分别为4.0%和11.6%(P=0.255)；在Ⅰ-Ⅱ期组和Ⅲ-Ⅳ期组分别为7.

05)；所有正常细胞均未见染色体改变。 (2)CEP7、CEP8和CEP17三种探针在腺癌中的阳性率均高于在鳞癌和小细胞癌的阳性率,但仅CEP8探针在腺癌中阳性率与其在小细胞癌的阳性率差异有统计学意义(P=0.044)。

(3)FOB细胞学诊断肺癌的敏感性为54.1%(33/61),若以CEP7、CEP8、CEP17任意一个探针阳性为M-FISH阳性,细胞学结合M-FISH可使诊断敏感性提高至80.3%(49/61),且不降低细胞学诊断的特异性(100.0%)。 2. EGFR和k-ras基因突变检测 (1)50例细胞学标本中,DNA提取的满意率为86.0%(43/50),其中42例有特异性PCR扩增产物可以进行测序。 (2) EGFR基因总突变率为33.3%(14/42)。其中第19外显子突变率为16.7%(7/42),第20外显子突变率为4.8%(2/42),第21外显子突变率为11.9%(5/42),未检出第18外显子突变。EGFR19和21外显子突变占EGFR突变总数的85.7%(12/14),显著高于EGFR20外显子突变(P=0.03)。 (3) EGFR女性突变率47.8%(11/23)显著高于男性(15.8%,3/19)(P=0.028)；非吸烟患者突变率为53.3%(8/15)显著高于吸烟患者(22.2%,6/27)(P=0.040)；腺癌患者突变率为38.7%(12/31),3例非肺癌患者未见EGFR基因突变。 (4) k-ras基因突变率为4.8%(2/42),均为第12号密码子替代突变。 (5)未发现EGFR基因突变与k-ras基因突变共存于同一病例。 结论 1.FOB细胞学液基薄片上可以建立与细胞形态相结合的M-FISH技术。FOB细胞学诊断的癌细胞、可疑癌细胞及非典型细胞均可发生7、8和17号染色体多体,此技术可能成为辅助FOB细胞学提高肺癌诊断敏感性的有效途径。 这个 2.采用细胞学标本进行EGFR和k-ras基因突变检测方法可行、结果可靠,对无法获得组织学标本的肺癌患者可以尝试采用细胞学标本进行检测。
肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor, HGF）是一种多功能的蛋白。c-Met为HGF的受体，是一种原癌基因的蛋白产物。它是一种具有生长因子受体结构和功能性质的跨膜酪氨酸激酶。一旦结合至其配体，该受体发生自我磷酸化可刺激其内在的酪氨酸激酶活性，从而引起细胞的迁移、增殖和侵袭等行为的改变。已在多种人类的肿瘤中发现c-Met基因的过表达。HGF/c-Met通路已被证实影响着许多恶性肿瘤的发生和发展。在骨髓瘤病人的血清和骨髓中发现HGF浓度明显高于正常人，并且发现这跟病人的预后呈明显的负相关。之前有研究显示，c-Met及其配体HGF在多株骨髓瘤细胞系和原代骨髓瘤细胞中高表达。此外，有研究指出HGF可促进骨髓瘤细胞的增殖和迁移。

TEK kinase activty 综上，我们推测阻断HGF/c-Met信号通路也许对多发性骨髓瘤的治疗具有重要的意义。NK4是一种HGF的拮抗剂，由N末端的发夹结构和4个kringle结构域组成。NK4一旦结合至c-MET上，可竞争性拮抗HGF所诱导的c-MET酪氨酸磷酸化作用，从而抑制HGF所介导的细胞增殖、迁移和侵袭。此外，NK4还具有抑制成纤维细胞生长因子（BFGF）和血管内皮生长因子（VEGF）所诱导的血管生成作用。NK4除了HGF拮抗活性外的抗血管生成活性可能与其结构类似血管抑制生长因子的4个kringle结构域有关。NK4这种具有抑制肿瘤细胞和肿瘤血管生成的多重功能，暗示了其在多发性骨髓瘤患者治疗的潜在价值。在本课题，我们初步探讨了Ad-NK4对多发性骨髓瘤细胞系RPMI8226生物学行为的影响及可能的机制，旨在为NK4在多发性骨髓瘤治疗中的潜在临床应用提供理论基础和实验依据。 第一部分利用Gateway技术构建重组腺病毒pAd-NK4 研究目的:利用Gateway技术构建含人肝细胞生长因子（HGF）NK4基因的重组腺病毒载体。研究方法:以含有HGF/NK4基因的质粒为模板PCR扩增NK4基因，将回收的NK4PCR产物片段克隆至腺病毒穿梭载体pYr-adshuttle-6获得重组质粒pYr-adshuttle-6-NK4。从该重组质粒上，利用LR同源重组将NK4-IRES-EGPF表达框转移至腺病毒骨架质粒pAD/BL-DEST，获得重组腺病毒质粒pAd-NK4-IRES-EGFP。该质粒经pacI线性化后转染293包装细胞获得重组腺病毒rAd-NK4-IRES-EGFP。采用TCID50（Tissue cell infectious dosage50，TCID50）法测定重组腺病毒滴度。重组腺病毒分别经酶切和PCR等方法进行鉴定。荧光显微镜观察转染效果。研究结果:证实腺病毒载体中含有NK4基因的目的片段；病毒滴度为6.3×108PFU/ml；荧光显微镜发现该重组腺病毒能在HEK293细胞中高效的表达。结论:利用Gateway技术可以快速地构建同时表达NK4蛋白和绿色荧光的重组腺病毒，为下一步开展关于NK4基因的肿瘤治疗提供了基础。 Axitinib 第二部分Ad-NK4对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖的影响 研究目的:观察Ad-NK4对人多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖的影响及可能机制。研究方法:1.

Western blot和RT-PCR检测在转染Ad-NK4的RPMI8226细胞中NK4的表达。2.MTT法体外观察Ad-NK4对RPMI8226细胞增殖抑制作用。3. PI单染流式细胞仪检测Ad-NK4对RPMI8226细胞凋亡发生率的影响。4. DNA琼脂糖凝胶电泳实验验证Ad-NK4对RPMI8226细胞的诱导凋亡作用。5. Western blot检测Akt/mTOR通路主要执行蛋白、细胞周期调控蛋白及细胞凋亡相关蛋白的表达。研究结果:1.Ad-NK4转染的RPMI8226细胞组中NK4基因的表达明显高于对照组。2. Ad-NK4转染的RPMI8226细胞组在24、48和72小时的增殖抑制率分别为33.5%±1.21%、52.8%±1.63%和54.8%±1.77%（p<0.05）。另外，RPMI8226细胞与基质FN粘附实验显示：Ad-GFP组、Ad-NK4组、UO126作用组、RAPA作用组及AG490作用组对粘附的抑制率分别为0、46.2%、59.4%、7.7%和55.8%，其中Ad-NK4组、UO126作用组和AG490作用组对粘附的抑制率均明显高于未转染组（P0.05）。2.RPMI8226细胞与ECV304粘附实验显示：Ad-NK4组、UO126作用组、RAPA作用组及AG490作用组对粘附的抑制率分别为61.9%、58.8%、20.7%和54.1%，均明显高于未转染组（P0.05）。3.与未转染组或Ad-GFP组相比较，Ad-NK4组能明显降低RPMI8226细胞MMP-2、MMP-3和VEGF蛋白的表达水平（P0.05）。另外，Ad-GFP组和未转染组之间对MMP-2、MMP-3、MMP-7和VEGF蛋白的表达水平无明显差别（P>0.

45%、22.58%。结论 GSK-3β是一个潜在的AD治疗靶点,LiCl可以通过抑制其活性发挥保护细胞的作用。
BACKGROUND: Retinoid X receptor(RXR) plays a

central role in the regulation of intracellular receptor signaling pathways. The activation of RXR has protective effect on AG-014699体外 H2O2-induced apoptosis of H9c2 ventricular cells in rats. But the protective effect and mechanism of activating RXR in cardiomyocytes against hypoxia/reoxygenation(H/R)-induced oxidative iniury are still unclear.METHODS: The model of H/R injury was established through hypoxia for 2 hours and reoxygenation for 4 hours in H9c2 cardiomyocytes of rats. 9-cis-retinoic acid(9-cis RA) was obtained as an RXR agonist, and HX531 as an RXR antagonist. Cultured cardiomyocytes were randomly divided into four groups: sham group, H/R group, H/R+9-cis RA-pretreated group(100

nmol/L 9-cis RA), and H/R+9-cis RA+HX531-pretreated group(2.5 μmol/L HX531). The cell viability was measured by MTT, apoptosis rate of cardiomyocytes by flow cytometry analysis, and mitochondrial membrane potential(ΔΨm) by JC-1 fluorescent probe, and protein expressions of Bcl-2, Bax and cleaved caspase-9 with Western blotting. Dinaciclib浓度 All measurement data were expressed as mean±standard deviation, and analyzed using one-way ANOVA and the Dunnett test. Differences were considered signif icant when P was
目的观察祛痰化瘀利湿方对人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法将GSK-3β选择性小分子抑制剂作用于正常人滑膜细胞,以激活Wnt/β-catenin信号通路。提取并检测胞核蛋白β-catenin的表达,从而确定最佳激活时间点。将对数生长期的滑膜细胞分为正常组、SB-216763激活组、祛痰化瘀利湿方组,分别采取相应的干预措施。Western blot方法检测滑膜细胞胞核蛋白β-catenin及其下游基因Cyclin D1和MMP-7的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测滑膜细胞培养上清液中Cyclin D1和MMP-7的表达。结果成功激活正常人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路,SB-216763干预后激活组胞核蛋白β-catenin及其下游基因Cyclin D1和MMP-7表达较正常组显著升高(P
精神分裂症断裂基因1(DISC1)是精神疾病的重要候选基因,是精神分裂症、双相情感障碍、抑郁症、自闭症和阿斯伯格综合征的一个共同的危险因素。许多遗传研究证实,DISC1不只是与精神分裂症有关,而且与各种伴有神经发育异常和细胞内的脑功能障碍信号通路有关。目前对DISC1在中枢神经系统作用的研究主要集中在神经元发生和神经元突触发育方面,如神经元的成熟、增殖、迁移、定位、分化,树突生长和突触可塑性等。DISC1编码DISC1蛋白,DISC1蛋白是一种多功能支架蛋白,它在成人大脑,尤其在海马齿状回的神经发生和神经发育方面具有重要的作用。DISC1有望成为精神疾病和癫的一个治疗靶点。本文就DISC1的生物学特性及主要相关信号通路作一综述。
目的:探究氯化锂(Lithium

Selleckchem NLG919 chlorid,LiCl)对人骨髓间充质干细胞(human Mesenchymal Stem Cells,hMSCs)迁移的影响。方法:采用划痕试验、Transwell chamber等方法,在梯度浓度LiCl作用下,观察对hMSCs迁移效果的影响并进行分析。结果:1划痕试验显示hMSCs在梯度浓度LiCl作用下,细胞迁移距离逐渐减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:LiCl可抑制hMSCs的迁移且呈浓度依赖性。
目的:观察补肾活血方对人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:采用GSK-3β选择性抑制剂SB-216763作用于正常人滑膜细胞,然后提取和检测胞核蛋白β-catenin的表达,确定激活正常人滑膜细胞的Wnt/β-catenin信号通路的最佳时间点,然后给予补肾活血方含药血清干预,采用Western Blot检测人滑膜细胞胞核蛋白β-catenin及其下游基因MMP-7和Cyclin D1的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测滑膜细胞上清液中MMP-7和Cyclin D1的表达。结果:Western Blot结果显示:成功激活正常人滑膜细胞Wnt/β-catenin信号通路,与正常组比较,SB-216763干预组的人滑膜细胞核蛋白β-catenin、MMP-7和Cyclin D1的表达明显升高(P
目的探讨糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)对巨噬细胞系RAW264.7活化的影响。方法将生长状态良好的RAW264.7细胞分为3组:实验对照组、脂多糖(LPS)组和GSK-3β特异抑制剂SB216763干预组,在12 h、24 h进行指标检测。采用Western印迹法检测细胞GSK-3β、p-GSK-3βser9蛋白的表达,ELISA试剂盒法检测细胞上清IL-10、TNF-α的变化,RT-PCR检测细胞中5-LO mRNA变化,免疫荧光法检测ED1表达,电镜下观察RAW264.

MET amplification INNO-406 价格 leads to Gefitinib resistancein lung cancer by activating ERBB3signaling[J].Science,2007,316(5827):1039-1043.②Bean J,Brennan C,Shih JY,et al.METamplification occurs with or without T790M mutationsin EGFR mutant lung tumors with acquired resistanceto Gefitinib or Erlotinib[J].Proc Natl Acad Sci USA,2007,104(52):20932-20937.
近年来,尽管恶性肿瘤的检测和治疗手段取得了长足进步,但肿瘤转移仍然是恶性肿瘤治疗失败和患者死亡的最主要原因。系统生物学和功能基因组学的发展使我们从分子水平对转移本质有了深入认识,在对肿瘤遗传异质性(tumor heterogeneity)、转移前生境(pre-metastatic niche)、上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、失巢凋亡抗性(anoikis resistant)、血管与淋巴管生成(angiogenesis

and lymphangiogenesis)等恶性肿瘤转移相关机制形成共识的基础上,提出了加强分子靶向治疗、针对肿瘤干细胞治疗、充分利用小干扰RNA技术等临床抗肿瘤转移的治疗策略。

不能手术和已转移的原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)预后很差,放化疗难以使患者受益。近年来,分子靶向治疗对一些肿瘤已取得突破性进展,肝癌的分子靶向治疗也在临床试验中取得了令人鼓舞的结果。目前的肝癌临床研究主要针对EGFR、VEGF/VEGFR、HGF、MMP、乙肝表面抗原等靶点。本文针对肝癌的分子靶向治疗的研究进展进行了综述。
目的探讨自分泌运动因子受体(AMFR)、C-Met蛋白在舌鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SABC方法检测80例舌鳞状细胞癌组织切片中AMFR、C-Met的表达。结果与正常舌组织相比,AMFR在舌癌中高表达(76.25%),与TNM分期有相关性(P<0.05)。C-Met蛋白的阳性表达率为83.75%,与组织学分化,TNM分期,有无淋巴结转移有相关性(P<0.05)。AMFR和C-Met蛋白的表达呈正相关(P<0.05)。结论舌癌中的AMFR和C-Met蛋白高表达,对于估计舌鳞状细胞癌的生物学特性具有重要的价值,为舌鳞状细胞癌综合治疗的提供一定的理论基础。
肝细胞生长因子(HGF)是一种多肽生长因子,具有促进包括肝细胞、上皮细胞、内皮细胞、造血细胞等多种类型细胞的生长、迁移和形态发生的作用.它还参与多种细胞的增殖、迁移,对各类肿瘤的侵袭转移有着重要的诱导作用.本文通过对近年来国外有关文献的回顾,希望能够为进一步探讨HGF及其受体在卵巢癌治疗中的具体意义提供新的思路.
原癌基因c-Met是前列腺癌基因治疗研究的理想靶点,HGF/c-Met信号系统的研究历史已久。本文就HGF/c-Met信号系统在前列腺癌的研究作一综述。

目的:构建和鉴定人肝细胞生长因子受体(cM

selleck激酶抑制剂 et)的shRNA的真核表达载体。方法:人工合成针对cM et的4对shRNA序列并定向克隆到siRNA(sm all interference RNA)真核表达载体RNA i-Ready pSIREN-DNA-D sRed-Express Vector上;采用双酶切和测序法鉴定。结果:酶切及测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致。结论:成功构建肝细胞生长因子受体靶向shRNA的真核表达载体。
Recepteur Selleckchem AZD1480 d’origine nantais(RON)belongs to a subfamily of receptor tyrosinekinases(RTK)with unique expression patterns and biological activities.RON isactivated

by a serum-derived growth factor macrophage stimulating protein(MSP).The RON gene transcription is essential for embryonic development and critical inregulating certain physiological processes.Recent studies have indicated thataltered RON expression contributes significantly to cancer progression andmalignancy.In primary tumors,such as colon and breast cancers,overexpressionof RON exists in large numbers and is often accompanied by the generation ofdifferent splicing variants.These RON variants direct a unique program thatcontrols cell transformation,growth,migration,and invasion,indicating that al-tered RON expression has the ability to regulate motile/invasive phenotypes.These activities were also seen in transgenic mice,in which targeted expression ofRON in lung epithelial cells resulted in numerous tumors with pathological fea-tures of human bronchioloalveolar carcinoma.Thus,abnormal RON activation isa pathogenic factor that transduces oncogenic signals leading to uncontrolledcell growth and subsequent malignant transformation.