05) 结论 1、FSK、RA、HRG、PDGF-AA、bFGF诱导剂能诱导新生大鼠海马神经干细胞分化为施万样细胞。 2、神经干细胞源性施万样细胞表达胶质细胞标志性蛋白：S-100和P75,表达P0、Krox-20、Oct-6等施万细胞标志性mRNA;分泌促进神经元轴突生长的可溶性营养因子。 3、神经干细胞分化为施万样细胞过程中磷酸化ERK表达增强,ERK信号转导通路被激活。 4、在神经干细胞分化为施万样细胞过程中,加入ERK信号转导通路抑制剂U0126,能够抑制神经干细胞分化为施万样细胞。P38、JNK信号转导通路抑制剂SB203580和SP600125对神经干细胞分化为施万样细胞无明显作用。
目的：文献提示活化小胶质细胞介导的炎症反应在脊髓创伤继发性损伤中起重要作用；EGFR通路和小胶质细胞的活化有一定的相关性。本研究旨在探讨EGFR通路的激活与小胶质细胞活化相关炎症的关系,EGFR抑制剂对小胶质细胞活化相关炎症的影响,以及EGFR抑制剂对脊髓继发性损伤和损伤后修复的影响。

点击此处 方法：LPS刺激模拟小胶质细胞的炎症活化,自由落体打击法建立脊髓创伤大鼠模型。C225或AG1478干预活化细胞或损伤动物。逆转录PCR和ELISA检测小胶质细胞的IL-1β和TNFα的合成和分泌；免疫荧光法观察小胶质细胞形态变化,pEGFR的表达,脊髓损伤后胶质细胞的活化以及血管的改变；Western Blot检钡EGFR、pEGFR、MAPKs、IL-1β和TNFa的表达；钙成像技术和钙抑制实验检测钙活动在LPS诱导的EGFR磷酸化中的作用；干湿重法评价水肿程度；轴突示踪检测轴突修复；BBB评分和CBS评分评估神经功能的恢复。 结果：1)LPS诱导小胶质细胞出现活化形态,pEGFR表达增高,以及IL-1p和TNFa的mRNA表达和培养上清液中蛋白含量的显著增高；与LPS刺激组相比,这些变化在C225干预组和AG1478干预组被明显抑制。2)LPS刺激可迅速引起小胶质细胞内的钙活动；EGFR的磷酸化可以被BAPTA/AM或KN62抑制,但是不能被EGTA抑制。3)LPS诱导BV2细胞Erkl/2、JNK和p38的磷酸化增加,以及IL-1β和TNFα的表达升高；此现象可以被C225和AG1478缓解。U0126,SP600125和SB203580不同程度抑制了LPS诱导的小胶质细胞的IL-1p和TNFa表达。4)在脊髓损伤后,pEGFR的表达显著增高,并定位于活化的小胶质细胞。5)C225和AG1478抑制脊髓损伤区pEGFR、Erk1/2和p38MAPK的表达,减少IL-1β和TNFα的表达,减轻组织含水量,减轻胶质细胞活化,并缓解脊髓损伤灶附近血管的扩张和高通透性改变；干预同时减轻了胶质疤痕的形成和坏死灶的面积,并伴有轴突恢复和损伤14d、28d时神经功能的改善。

许多 结论：EGFR抑制剂通过抑制MAPK通路缓解了LPS对小胶质细胞的活化作用；并缓解脊髓损伤后的急性期炎症改变,从而减轻继发性损伤,促进轴突修复和脊髓损伤大鼠的神经功能恢复。EGFR通路可以成为脊髓损伤治疗的靶点；C225和AG1478有望在脊髓损伤治疗中发挥积极作用。
背景: 糖尿病能够引起机体多种组织器官损伤甚至功能衰竭。随着人们生活水平的提高,肥胖人群逐年增加,2型糖尿病的发病率逐年上升,其并发症糖尿病心肌病(DCM)日益受到重视。高脂能够诱导心肌细胞发生凋亡,而心肌细胞凋亡在DCM的发病机制中占有重要地位,然而,有关高脂诱导心肌细胞凋亡的具体机制目前尚未彻底阐明。

有关基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)的很多研究证明,SDF-1参与调节许多重要的生物过程,包括心脏和神经元发育、干细胞动员、血管新生、肿瘤发生及转移等。SDF-1调节这些迥异的生物进程是通过其经典的细胞表面特异性趋化因子受体4(CXCR4)实现的。但近年来研究发现,CXCR4并不是SDF-1在细胞表面的唯一受体,除CXCR4外还存在CXCR7,但CXCR7并不能广泛表达,其与CXCR4相比具有不同的生物学功能。 关于SDF-1对心脏系统的影响,既往研究主要集中于其动员干细胞至心脏损伤的部位,并通过血管新生修复心脏损伤,但SDF-1对脂毒性所致的心脏细胞损伤是否具有直接保护作用目前尚未有相关报道。 Selleck Sorafenib 目的: 本研究在体外用饱和脂肪酸棕榈酸酯(palmitate,Pal)模拟2型糖尿病时机体内的高脂环境,来处理大鼠胚胎心肌细胞(H9c2),一方面拟阐明脂毒性诱导心肌细胞发生凋亡的机制;另一方面,探讨SDF-1β对高脂诱导的H9c2细胞凋亡是否具有保护作用,若具有保护作用,拟揭示其分子机制。 方法: 1. Pal诱导H9c2细胞凋亡及机制研究 (1)首先用Pal处理H9c2细胞,做剂量效应及时间效应实验,分别用western-blot检测cleaved-caspase3和细胞死亡ELISA试剂盒检测DNA链断裂来观察Pal诱导细胞的凋亡效应,从而选择出Pal诱导H9c2细胞凋亡的最适剂量及最佳处理时间。 (2)用western-blot的方法检测Pal诱导细胞凋亡不同信号通路上的关键蛋白(p-p53、p53、Bax、Bcl-2、AIF、GRP78、caspase12、CHOP and caspase8)进而确定Pal诱导H9c2心肌细胞凋亡的具体途径。 (3)用western-blot的方法检测3-NT,观察Pal能否引起H9c2细胞的硝化损伤。 (4)用western-blot的方法检测不同的阻滞剂或清除剂(apocynin、MnTMPyP、L-NAME、urate、4-PBA)对Pal诱导细胞硝化损伤、内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)及凋亡的影响,并明确硝化损伤、ERS及凋亡这三种现象之间是否有内在联系。 2.