05，P＜0.01)。结论PCF可抑制8J·cm~(-2)UVA诱导的HaCaT细胞凋亡，其作用机理与抑制UVA诱导的ROS产生、p38MAPK通路激活和caspase-3活化有关。
在动物体内，干细胞持续更新分化产生的各类型终末分化细胞对维持组织器官的功能有着至关重要的作用。哺乳动物睾丸中的精原干细胞(SSCs)持续分化产生精子这一过程贯穿于雄性个体生长发育的整个时期，可以说SSCs是种系维持和遗传进化的一个桥梁和枢纽。SSCs不仅可作为再生性治疗的优良种子细胞，也是成体干细胞研究的良好体外模型。微小RNA (microRNAs)在多种组织器官细胞的基因调控中发挥重要的作用，包括细胞自我更新、分化、增殖及凋亡，同样也是干细胞的重要调控因子。miR-34家族中的miR-34c，在细胞内的多个过程中都有作用，对精子发生过程也有重要的调控作用。Nanos是一类进化保守的RNA结合蛋白，在生殖细胞发育中发挥功能，包括原始生殖细胞和生殖干细胞。在小鼠中，Nanos2在SSCs中表达，在精子发生过程中具有维持干细胞多能性的作用。本研究以miR-34c作为研究对象，预测发现Nanos2是miR-34c的靶基因之一，构建其双荧光素酶报告基因载体及双荧光素酶报告基因突变载体验证靶基因，通过在分离的原代及传代SSCs中转染合成的miRNA模拟物、抑制物，及使用含有miR-34c慢病毒颗粒转导小鼠的曲细精管，检测、分析生殖细胞分化特异性标志基因的变化，深入研究了miR-34c对生殖细胞分化特异性标志基因的调控作用，研究结果证实miR-34c可能会通过靶向Nanos2以促进SSCs的分化。

1.小鼠精原干细胞的分离和培养 采集新生6至12dpp小鼠睾丸，去除白膜，用胶原酶和DNA酶消化使SSCs与睾丸支持(Sertoli)细胞分离。传代SSCs使用不同溶液及因子组合筛选培养体系，最终确定DMEM+15%KSR+0.25μmol OSI-744 价格 L-1A83-01为无血清无饲养层最佳培养体系。在该培养体系下细胞传代，通过形态学观察、计数结合PCR、免疫荧光染色、BrdU掺入染色、AP染色等检测方法，对分离的SSCs特性进行鉴定后证实：该培养体系能够维持小鼠SSCs的自我更新，证明所培养的精原干细胞为典型SSCs。

CP-868596数据表 2.与小鼠精原干细胞发育密切相关的miR-34c靶基因的筛选、确定 通过miRwalk (miRNA靶基因预测)网站，得到一系列miR-34c可能直接作用的靶基因，从中选择了一个与小鼠SSCs发育及精子发生密切相关的Nanos2基因。通过构建含有Nanos2-3′UTR及miR-34c预测结合靶位点突变Mut-Nanos23′UTR的双荧光素酶报告基因载体，与miR-34c共转染Hela细胞，测定双荧光素酶发光值。结果证实Nanos23′UTR与miR-34c直接结合，这提示miR-34c可能通过靶向Nanos2发挥作用。 3. miR-34c在小鼠雄性精原干细胞精子发生过程中的作用 通过向SSCs中转染合成的miR-34c模拟物和抑制物，以及含有miR-34c慢病毒毒液的培养液培养小鼠曲细精管，通过qRT-PCR技术及免疫荧光染色、Western BIO GSK-3 花费 blot、曲细精管的Whole-mount staining等方法检测减数分裂相关基因的表达变化。检测结果发现，过表达miR-34c后，Nanos2表达特异性显著下调，Scp3、Stra8等减数分裂后期标记基因的表达明显上调。以上实验结果表明，miR-34c可促进小鼠SSCs向精子细胞分化。
目的：探讨新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织中C/EBPβ基因、Ki-67基因和PCNA基因的表达，阐明C/EBPβ基因在新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织细胞增殖的作用。

方法：收集喀什地区人民医院，自治区人民医院2010年1月至2012年9月维吾尔族患者10例新鲜癌组织样本及10例新鲜癌旁组织标本，使用RT-PCR方法，检测C/EBPβ基因和Ki-67基因的mRNA表达水平。收集维吾尔族子宫颈组织石蜡包埋标本100例。使用免疫组织化学方法检测C/EBPβ基因、Ki-67基因和PCNA基因蛋白质表达水平。 结果:1. C/EBPβ基因在新疆维吾尔族子宫颈癌旁组织中mRNA表达水平高于癌组织。Ki67基因在新疆维吾尔族妇女子宫颈癌组织中的mRNA表达水平高于癌旁组织。2. C/EBPβ蛋白在维吾尔族妇女慢性子宫颈炎组织中表达水平高；在子宫颈鳞癌组织中表达水平低。与此不同的是，Ki-67蛋白质和PCNA蛋白质在慢性子宫颈炎组织中表达水平低;而在子宫颈鳞癌组织中表达水平高。C/EBPβ蛋白、Ki-67蛋白质和PCNA蛋白质在子宫颈鳞癌组织和慢性子宫颈炎组织中的表达水平分析使用非参数秩和检验统计结果表明，C/EBPβ蛋白在维吾尔族子宫颈鳞癌组织与慢性子宫颈炎组织表达水平有统计学差异。Z=-4.415,P双侧为0.000（P
目的：本研究以体外培养的细粒棘球蚴原头节为研究对象，将不同浓度的P38抑制剂ML3403体外作用于细粒棘球蚴原头节，探讨P38抑制剂ML3403体外对细粒棘球蚴原头节的作用。 方法：从自然感染细粒棘球蚴病的绵羊肝脏内采集细粒棘球蚴原头节，将其加入RPMI1640培养基中体外培养，5d后，将原头节分别加入不同浓度ML3403（12.5、25、50、80、100μmol/L）中体外孵育。每组加入原头节约2000个。不同浓度ML3403作用不同时间，在光镜下观察原头节的形态变化，同时利用伊红染色的方法显示原头节的活力并绘制活力曲线；电子显微镜下观察原头节超微结构改变；用Western blot检测原头节内p38蛋白表达水平；用Caspase-3活性检测试剂盒检测原头节内caspase-3酶活性。 结果：孵育5d后，正常和DMSO对照组的原头节形态和活力几乎没有改变，而50μmol/LML3403组原头节活力下降约50.5%。通过伊红染色观察发现，随着ML3403作用时间的延长和浓度的增加，ML3403对原头节的生长抑制作用越明显。连续观察5d，100μmol/LML3403组对原头节有较强的杀伤作用，此时几乎没有存活的原头节；80μmol/L和50μmol/LML3403组的头节活力也分别仅为13.34±2.09%和49.5±1.