第二部分：血清microRNA作为骨肉瘤生物标记物的研究。通过这些研究,揭示miR-125b-STAT3反馈调节环路在骨肉瘤发生、发展中的作用机制,发现潜在的治疗靶标和可供诊断参考的生物标志物,有望为骨肉瘤的临床诊断和治疗提供新的策略和方法。 第一部分miR-125b-STAT3调节环路在骨肉瘤中发生、发展中的作用机制研究 第一节miR-125b-Sselleck怎么样TAT3环路在骨肉瘤组织和细胞中的表达 目的：研究骨肉瘤组织和细胞系中miR-125b和STAT3的表达水平。 方法：通过实时定量RT-PCR法,在骨肉瘤和癌旁组织二组样品中以及骨肉瘤的三种细胞系,检测miR-125b的表达水平。其次,通过免疫印迹法(Western blot)检测骨肉瘤组织和细胞系中STAT3的蛋白水平。 Akt抑制剂结果：与癌旁组织相比,骨肉瘤组织中miR-125b水平显著降低。与HEK-293细胞系相比,骨肉瘤的三种细胞系(MG-63,Saos-2, U2-OS)中miR-125b水平显著降低。与癌旁组织相比,骨肉瘤中STAT3蛋白表达水平显著升高；与HEK-293细胞系相比,骨肉瘤的三种细胞系(MG-63,Saos-2,U2-OS)还有中STAT3蛋白表达水平均显著提高。 结论：骨肉瘤组织和骨肉瘤细胞中,miR-125b表达水平显著降低,而STAT3的表达水平显著升高。此结果提示二者可能参与骨肉瘤的发生、发展过程。 第二节miR-125b靶向调控下游基因STAT3 目的：验证STAT3为miR-125b的下游靶基因。 方法： 1.我们运用Targetscans/PICTAR等靶基因预测软件预测miR-125b的下游靶基因可能为STAT3。