在免疫组化结果中可见(GMFG在间质中表达量最高,随着恶性程度的增高,腺体细胞中GMFG的表达增多。 3.Transwell结果示,相对于对照组,干扰GMFG组细胞的侵袭迁移数目均减少;加入外源性重组GMFG后,细胞迁移数目增多。 4.Western Blot结果发现,干扰GMFG后,MMP-2表达降低,vimentin表达降低,E-Cadherin表达升通常高。 四、实验结论 第二部分实验首次证明了GMFG能够抑制结肠癌细胞LoVo的侵袭迁移,并且加入外源性的GMFG能促进LoVo细胞的迁移,说明内源性外源性的GMFG均能影响结肠癌细胞LoVo的侵袭迁移。除此之外,我们也发现GMFG在肿瘤组织中的表达高于正常结肠癌旁组织,GMFG的高表达可能与结肠癌的转移有关。进一步的分子机制研究发BMS-354825说明书现,干扰GMFG后MMP-2降低,证明基质金属蛋白酶的改变也参与到结直肠癌侵袭迁移过程中。而且干扰GMFG后,出现了EMT现象的逆转,所以抑制GMFG表达使肿瘤细胞发生MET现象,从而降低其侵袭迁移,从而解决肿瘤转移问题。 第三部分GMFG在细胞有丝分裂中后期表达及其与细胞骨架的关系 实验目的 研究GMFG在细胞有丝分裂过程中的分也布特点及其与细胞骨架的关系。 一、实验方法 1.细胞株:LoVo、HUVEC、SiHa、HeLe、KBV 2.细胞免疫荧光染色:取对数生长期LoVo、SiHa、HeLe、KBV、HUVEC细胞做GMFG的细胞免疫荧光染色,观察GMFG在四种细胞中的分布特点。 3.细胞周期检测:将对数生长期HUVEC细胞分为三组,分别为对照组、0.5mg/mL组、1.Omg/mL,处理6h后,收集细胞用流式细胞仪检测细胞周期。