以脂血血浆为研究材料,进行血浆前处理,通过尿激酶激活血浆,经Lysine-sepharose亲和层柱,最后获得高纯度的PIC;处理过的血浆经过氯化钡吸附、饱和硫酸铵沉淀后,获得抗凝血酶(Antithrombin,AT)与凝血酶原(Prothrombin,Pro-T);采用Ecarin蛇毒激活Pro-T获得DorsomorphinT,将T与AT分别通过Heparin-sepharose亲和柱以提高其纯度,使其在体外混合反应得到TAT混合物,再经Heparin-sepharose亲和柱除去未反应的T与AT,最终获得高纯度TAT。通过SDS-PAGE、紫外分光光度法与HISCL自动分析仪对产物进行鉴定与定量。确认细节结果表明 PIC最佳激活条件为2 mg尿激酶/100 m L血浆,37℃激活30 min,最终获得2.5 mg PIC,经SDS-PAGE鉴定纯度在90%以上;Pro-T的激活条件为0.5 m L蛇毒/100 m L血浆,37℃激活20 min,从100 m L血浆中获得2.1 Epigenetics Compound Librarymg T与6.2 mg AT;T与AT体外最佳反应质量比例为0.7∶1,经SDS-PAGE鉴定TAT的纯度在80%以上。
背景与目的免疫检查点抑制剂单药治疗在驱动基因阳性的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)患者中疗效甚微。研究表明,部分驱动基因阳性患者靶向治疗耐药后对免疫联合治疗仍有效。国内研究甚少。