【方法】以曲酸为阳性对照分别测定B2-3-5和B6-1-4两菌株发酵产生的代谢物粗提物对蘑菇酪氨酸酶的抑制活性；应用LC-MS代谢组学方法检测两株菌在相同条件下产生的所有代谢物质；采用单变量、多元变量、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法识别差异代谢物；利用层次聚类分析(HCA)法对识别的差异物GSK2399872A细胞系进行聚类分析；通过KEGG代谢通路对比法分析这些差异代谢物主要参与的代谢途径。【结果】表明菌株B2-3-5代谢物提取物对蘑菇酪氨酸酶二酚酶活性的抑制率为67%，其IC_(50)为0.277 mg/mL，同属菌株B6-1-4代谢物提取物则对酪氨酸酶无抑制活性。采用代谢组学的检测分子量方法从2菌株的代谢物中筛选出63个差异代谢物，其中氨基酸类化合物、维生素类化合物和羧酸类化合物的种类以及相对含量均是B2-3-5菌株明显高于B6-1-4菌株。通过代谢途径分析发现这些差异代谢物主要参与15个代谢通路，其中维生素B6生物合成通路的影响较为显著。【结论】本研究推测临床试验B2-3-5菌株可能是增加一些氨基酸类、维生素类以及羧酸类等小分子化合物的含量来抑制酪氨酸酶活性。维生素B6代谢途径的上调也表明菌体细胞可通过产生维生素B6与酪氨酸酶中的必需氨基作用或清除酶催化循环过程中产生的活性氧(ROS)来抑制酪氨酸酶活性。
目的建立一种基于钙激活氯离子通道(CaCC)可敏感检测胞质内第二信使Ca~(2+)的细胞模型。