本课题主要是对电离辐射诱导肠道细胞生理功能变化,从ce RNA网络探究GSDME与细胞焦亡,阐明细胞焦亡在电离辐射诱导肠上皮损伤及辐射防护作用及分子机制。研究内容1.体外培养人肠上皮和结肠癌细胞,经不同剂量照射后,通过检测焦亡指标,研究细胞焦亡参与肠上皮细胞辐射损伤调节的分子机制;2.通过mi RDB、Target Scan、mi RWalk、micro RNA.org等网站预Tozasertib核磁测与焦亡蛋白GSDME相关的mi RNA,选择出可信度高的结果,应用RT-PCR、报告基因实验确认其中对GSDME有调控作用的mi RNA,系统研究mi RNA调控GSDME表达在辐射诱导肠损伤中的作用和分子机制;3.构建辐射诱导焦亡相关的ce RNA网络研究,文献查找与mi RNA相关的长链非编码RNA,确定其与电离辐射具有明显的效应关系,干涉长链非许多编码RNA,检测GSDME基因表达变化情况;4.过表达GSDME过表达或抑制长链非编码RNA,对电离辐射后细胞形态和功能进行研究;5.研究ce RNA在辐射诱导的细胞焦亡中的作用机制。研究结果1.电离辐射诱导肠上皮细胞焦亡;2.GSDME蛋白在辐射诱导的肠道焦亡过程其关键作用;3.miR-448在电离辐射肠细胞中,特异性靶向GSDME基因,抑制其表达;Bromosporine小鼠4.NEAT1-miR-448-GSDME调控轴在辐射诱导肠细胞焦亡过程起重要作用。结论本课题研究发现,电离辐射诱导肠上皮细胞发生由蛋白GSDME介导的细胞焦亡。mi R-448特异性靶向GSDME m RNA,通过结合3’-UTR抑制其表达。lnc RNA NEAT1通过竞争性结合mi R-448,构成ce RNA调控轴,进而调控GSDME表达。
目的观察七氟烷干预下海马神经元焦亡过程的形态学变化及神经元相关蛋白表达特征。