简要介绍了宏基因组的概念及宏基因组克隆技术的基本操作流程和技术要点,重点阐述了目的基因富集、核酸提取、载体和宿主系统选择、宏基因组文库筛选等”"瓶颈”"技术的研究进展。目的基因富集技术主要包括稳定同位素探针(SIP)、抑制消减杂交(SSH)和差异显示(DD)等。基因文库筛选分为序列依赖性筛选和非序列依赖性筛选,其中序列依赖性筛选包括特定基因PCR、反转录PCR(RT-SAHA HDAC半抑制浓度PCR)、DNA微阵、亲和捕获等技术;非序列依赖性筛选主要指基于基因表达活性筛选和基因”"陷阱”"技术等。此外,介绍了一些近年来通过构建宏基因组文库筛选目的基因的应用实例。”
“利用触角电位(EAG)技术测定了烟蚜茧蜂(Aphidius gifuensis)对蚜虫性信息素(荆芥醇和荆芥内酯)和报警信息素(反-β-法尼烯)以及烟草挥发性物质的很少电生理反应。结果表明:雌蜂和雄蜂对蚜虫性信息素、报警信息素、烟草挥发物均有反应,但雌雄蜂对这些化学信息物质的嗅觉敏感性存在差异,雌蜂对荆芥醇、荆芥内酯、顺-3-己烯-1-醇、反-2-己烯醛、水杨酸甲酯和里那醇的EAG反应都大于雄峰,证明雌雄蜂在利用寄主栖境中信息化学物质方面存在不同的策略,它们分别识别了不同的有关寄主的化学指纹图;烟蚜茧蜂对烟AdriamycinDMSO溶解度草气味组分具有不同的敏感性,对绿叶气味组分的EAG反应要强于对萜类化合物的反应,绿叶气味组分很有可能在其寻找桃蚜的过程中发挥远距离定向作用。”
“有机磷化合物在农业中的广泛应用,给农作物带来增产的同时对环境造成污染,严重威胁着人类的健康,其生物解毒已受到高度重视。有机磷水解酶(OPH)是目前处理有机磷化合物最有效的水解酶类,而通过基因工程手段获得高表达、高降解效率的OPH,尤其是OPH的表面显示技术是近年来的研究热点。